鸭坦布苏病毒全长E蛋白可溶性表达及免疫原性分析

论文摘要

鸭坦布苏病毒病是由鸭坦布苏病毒（Duck tembusu virus,DTMUV）引起的一种以产蛋量和采食量严重下降为主要特征的传染病。应用RT-PCR方法扩增DTMUV GDHD2014-3毒株的囊膜（E）蛋白全基因序列,并将其克隆至原核表达载体pMAL-c5x,构建重组表达质粒E-pMAL。将其转化E.coli BL21感受态细胞,经诱导表达条件优化,在30℃条件下IPTG诱导,可溶性表达重组的全长E蛋白（rf E）,大小约110 ku。用Amylose Resin对目的蛋白进行纯化,并将纯化的rf E蛋白免疫Balb/c小鼠,制备多克隆血清抗体。经Nu-PAGE以及Western blot分析,成功实现rf E蛋白可溶性表达,并能与DTMUV灭活疫苗免疫鸭血清多抗产生特异性反应。间接免疫荧光试验结果表明,rf E蛋白免疫小鼠获取的多克隆血清抗体能与DTMUV反应。实现了rf E蛋白的可溶性表达及纯化,并验证rf E蛋白具有良好的免疫原性,为DTMUV的亚单位疫苗的研制以及相关诊断试剂的开发奠定了基础。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 龚凤平,冯晓声,王伟,罗梦萍,马海彬,王贵平,袁建丰

关键词: 鸭坦布苏病毒,囊膜蛋白,可溶性表达,免疫原性分析

来源: 动物医学进展 2019年11期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 广东海大畜牧兽医研究院

基金: 国家重点研发计划项目(2017YFD0500800),广州市科技计划项目(201704020083),广东省科技计划项目(2014A020208052),广东省科技发展专项资金项目(2016B020234006,2017B090904029)

分类号: S852.65

DOI: 10.16437/j.cnki.1007-5038.2019.11.003

页码: 14-17

总页数: 4

文件大小: 1168K

下载量: 176

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