猪圆环病毒pSCA-Cap-T2A-Rep重组载体的构建及小鼠免疫试验

论文摘要

克隆猪圆环病毒1型（PCV1）的Rep基因和猪圆环病毒2型（PCV2）Cap基因,利用T2A片段进行连接,并插入到载体pSCA,构建pSCA-Cap-T2A-Rep重组质粒。转染PK-15细胞后通过Western blot技术检测目的蛋白的表达。大量提取构建的重组质粒后进行小鼠接种试验。56只小鼠随机分为8组,每组7只。第1,2,3组为质粒注射组,注射质粒质量分别为50,100,200μg/只;第4～6组分别为与1～3组注射相同剂量质粒+免疫佐剂对应组;第7组为注射生理盐水对照组;第8组为注射生理盐水+佐剂对照组。首次接种后14 d进行第2次接种,处理方法同第1次。在首次接种后0,14,21,28 d从试验小鼠眼静脉丛采血,ELISA方法检测血清中PCV2 Cap蛋白抗体。结果显示,pSCA-Cap-T2A-Rep重组质粒接种小鼠血清中Cap蛋白特异性抗体在接种后14～28 d均为阳性;质粒+免疫佐剂组比质粒注射组小鼠特异性抗体水平显著升高。结果表明,pSCA-Cap-T2A-Rep重组质粒在试验小鼠中产生有效的特异性抗体,为进一步优化免疫方法、在试验猪上的应用及猪圆环病毒核酸疫苗的研制提供了依据。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 赵紫印,罗丽华,冯秀,姜艳芬,韩国阳,王怡然,张彦明,周宏超,郭抗抗

关键词: 猪圆环病毒,蛋白,动物试验

来源: 中国兽医学报 2019年06期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 西北农林科技大学动物医学院

基金: 陕西省科学研究发展计划资助项目(2015NY177),陕西省科技统筹创新工程计划资助项目(2014KTCQ02-02),2016年度杨凌示范区农业科技示范推广能力提升资助项目(TS-2016-12)

分类号: S852.651

DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.06.03

页码: 1058-1063+1112

总页数: 7

文件大小: 1175K

下载量: 163

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