论文摘要
目的分离、培养并鉴定兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells, BMSCs),探讨慢病毒载体介导增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, eGFP)感染兔BMSCs的最佳条件,筛选稳定转染的兔BMSCs。方法通过全骨髓贴壁法获得兔BMSCs;茜素红、甲苯胺蓝及油红O染色对BMSCs成骨、成软骨及成脂分化进行鉴定;免疫荧光组化染色检测CD44及CD90的表达;不同浓度嘌呤霉素筛选BMSCs的最小致死浓度;以感染复数(multiplicity of infection, MOI)为50、100、150、200的慢病毒载体介导eGFP转染BMSCs,倒置显微镜下观察荧光表达,并用嘌呤霉素筛出稳定转染系。结果当MOI为150,慢病毒载体介导eGFP感染兔BMSCs效率最高;嘌呤霉素筛选稳定转染兔BMSCs的最适质量浓度是1.0μg/mL。结论成功培养了兔BMSCs,用慢病毒介导的GFP标记了兔BMSCs并筛选出了稳定转染的兔BMSCs,建立了一个简便有效的干细胞标记方法,为BMSCs在动物体内实验标记示踪奠定了基础。
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文章来源
类型: 期刊论文
作者: 李琦,邹志余,杨瑞泽,邓洪利,张蕊,周劲松
关键词: 骨髓间充质干细胞,慢病毒载体,增强型绿色荧光蛋白,转染,嘌呤霉素
来源: 西安交通大学学报(医学版) 2019年04期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技,基础科学
专业: 生物学,基础医学
单位: 陕西中医药大学,西安交通大学附属红会医院
基金: 陕西省科学技术研究发展计划项目(No.2016SF-130)~~
分类号: R329.2
页码: 619-623
总页数: 5
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标签：骨髓间充质干细胞论文; 慢病毒载体论文; 增强型绿色荧光蛋白论文; 转染论文; 嘌呤霉素论文;