配体结合区论文_郭彬,熊向华,汪建华,游松,张惟材

导读:本文包含了配体结合区论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:受体,葡萄球菌,金黄色,雌激素,基因,催乳素,蛋白。

配体结合区论文文献综述

郭彬,熊向华,汪建华,游松,张惟材[1](2015)在《成纤维细胞生长因子受体3胞外配体结合区的重组表达及其与A型肉毒毒素重链C端的相互作用》一文中研究指出目的:实现成纤维细胞生长因子受体3(FGFR3)胞外配体结合区FGFR3D23的表达与纯化,并鉴定其与A型肉毒毒素重链C端(Bo NT/AHc)的相互作用。方法:全基因合成的FGFR3D23基因片段经酶切连入p TIG(+)质粒,转化大肠杆菌BL21(DE3)后IPTG诱导表达,获得的包含体经Ni2+柱纯化,透析复性后通过pull-down及ELISA检测纯化蛋白与Bo NT/AHc的相互作用。结果与结论:SDS-PAGE分析结果显示得到相对分子质量约27×103的蛋白特异表达条带,表达量为1.39 mg/L,包含体占73.4%;纯化和复性得到的目的蛋白纯度约96%,复性率约3%;pull-down及ELI-SA实验结果证明FGFR3D23可以与Bo NT/AHc特异性地相互作用。(本文来源于《生物技术通讯》期刊2015年02期)

尹荣兰,尹荣焕,白文林,李琳,任清丹[2](2014)在《金黄色葡萄球菌FnbA配体结合区基因核酸疫苗的构建与免疫试验》一文中研究指出扩增了奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤粘连结合蛋白A(Fnb A)配体结合区基因,并将其克隆至真核表达载体p VAX1启动子下游,构建成真核表达质粒,通过体外细胞转染试验,运用IFA方法进行抗原性初步确认,所构建的重组DNA疫苗质粒能在真核细胞中表达外源基因并被金黄色葡萄球菌抗体特异性识别。为进一步评价侯选疫苗的免疫原性,进行了BALB/c小鼠免疫试验,分别检测免疫后的ELISA抗体水平、Th1/Th2类细胞因子水平以及T淋巴细胞增殖试验。结果表明,构建的核酸疫苗p VAX1-p Fnb A免疫小鼠后,ELISA抗体水平提高,Th1/Th2类细胞因子含量提升,T细胞增殖能力增强。(本文来源于《中国兽医杂志》期刊2014年11期)

杨益虎[3](2014)在《金黄色葡萄球菌富丝氨酸重复蛋白SraP配体结合区以及肺炎链球菌L,D-羧肽酶DacB的结构与功能研究》一文中研究指出(I)金黄色葡萄球菌富丝氨酸重复蛋白SraP配体结合区(ligand-binding region, BR)的结构与功能研究金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是一种革兰氏阳性菌,它可以导致多种疾病,比如感染性心内膜炎、骨髓炎、脓毒性关节炎以及败血症等。金葡菌表面的SraP是一种富含丝氨酸高度糖基化的蛋白(serine-rich repeat glycoproteins, SRRPs)。SraP可以通过其配体结合区域(ligand-binding region, BR)粘附血小板进而导致感染性心内膜炎。为了阐释SraP与宿主之间的相互作用机制,我们通过X-射线晶体学的方法解析了配体结合区域SraPBR的结构,其分辨率为2.05A。SraPBR的整体结构呈伸展的杆状,由四个分开的模块组成,它们的结构分别与豆科凝集素(Legume lectin)、免疫球蛋白结合蛋白β-grasp折迭以及钙粘素(Cadherin)相似。基于结构分析,结合生物化学、微生物学和细胞实验,可以发现L-lectin模块能特异性地与N-乙酰神经氨酸(Neu5Ac)结合,进而介导SraPBR黏附到A549细胞表面来侵染宿主细胞。而β-grasp折迭模块不具备免疫球蛋白结合蛋白结合活性。另外,C端的两个串联的钙粘素模块与真核生物的钙粘素相似,但是它们的钙离子结合方式不同。小角X射线衍射和分子模拟实验证明SraPBR C端的叁个模块通过钙离子维持整体结构的相对刚性,从而将L-lectin模块支出细菌细胞外发挥粘附功能。另外,通过突变实验以及最近鉴定SraP的底物叁糖,我们认为SraPBR通过特异性识别唾液酸化的受体来介导金黄色葡萄球菌粘附以及侵染到宿主表皮细胞中。该研究将为开发针对金黄色葡萄球菌的新型疫苗或者抗生素提供理论指导。(Ⅱ) DacB的结构与酶学研究肺炎链球菌中的细胞壁肽聚糖L,D羧肽酶DacB是特异水解肽聚糖肽段L-赖氨酸和D-丙氨酸之间的肽键的酶。敲除DacB基因后会导致肺炎链球菌细胞形态以及隔板分裂的缺陷,暗示DacB在肽聚糖的重塑中发挥重要的作用。因此,DacB有可能作为潜在的抗生素靶标。通过X-射线晶体学的方法解析了DacB的结构,分辨率为2.1A。这是第一个革兰氏阳性菌中的L,D-羧肽酶的叁维结构。DacB整体呈球状,由一些个α螺旋及其围绕的核心β-sheet组成。结构分析显示DacB是M15B蛋白酶家族的成员。与M15B蛋白酶家族不同的是,DacB的活性位点有一个六配位的锌离子组成,锌离子与His-Asp-His-Glu四联体以及另外两个水分子配位。通过生化实验发现肽聚糖的四肽(L-Ala-D-iGln-L-Lys-D-Ala)是DacB的合适底物。通过分子对接以及突变实验,鉴定了结合四肽底物的关键残基。基于这些研究成果将为开发针对肺炎练球菌的新型疫苗或者抗生素提供理论基础。(本文来源于《中国科学技术大学》期刊2014-05-01)

王东,金宏威,刘振明,张亮仁[4](2013)在《雌激素受体α36亚型配体结合区的结构模建、优化及验证》一文中研究指出目的雌激素受体(estrogen receptor,ER)参与多种重要的体内生理过程,是一个重要的受体家族。新近发现的雌激素受体α36亚型(ER-α36)通过新的作用机制调节体内功能,对其进行开拓性的研究具有重要意义。方法利用已知的ER-α36序列以及两个典型的ER-α66配体结合区的晶体结构,通过同源模建的方法构建了ER-α36配体结合区的结构模型,并采用分子动力学模拟与分子对接等方法对其合理性进行了初步验证。结果与结论 ER-α36配体结合区与传统的ER-α66相比具有显着差异,蛋白整体结构缺失四段α螺旋,口袋开放性增加且柔性提高。这些特征导致配体结合特征发生变化。雌二醇、4-羟基-他莫昔芬、genistein和G-1等已知调控分子与ER-α36的对接分析,进一步验证和解释了已报道的生物实验数据。本研究所建立的ER-α36的同源模建模型具有较好的可靠性与准确性,为进一步发现和研究新的选择性ER-α36调控分子和药物奠定了基础。(本文来源于《中国药物化学杂志》期刊2013年06期)

钟锦绣,李亚梅,关晏星[5](2013)在《乳腺癌HER-2胞外配体结合区靶点治疗的研究进展》一文中研究指出针对乳腺癌HER-2受体胞外结合区的靶点治疗成为当今研究的热点。小分子多肽、HER-2胞外结合区的单抗药物及其与蛋白毒素、放射性核素,化疗药物的偶联物即免疫偶联物既能增强药物的有效性,又可减少对正常组织的毒害。HER-2胞外区肽疫苗可有效预防HER-2高表达乳腺癌的生长。本文将对乳腺癌HER-2胞外区靶向阻断治疗的研究进行综述,为相应的临床应用提供参考。(本文来源于《中国肿瘤临床》期刊2013年17期)

吉文林,段修军,宦海琳,丁潜,孙国波[6](2013)在《1种胞外域仅含1个配体结合区的鸭催乳素受体基因的剪接异形体克隆及基因多态性分析》一文中研究指出旨在了解鸭催乳素受体的作用,应用RACE技术克隆到了1种胞外域仅含1个配体结合区的剪接异形体。序列分析表明,剪接异形体长2 535bp,含431bp 5′-UTR、1 884bp编码区和220bp 3′-UTR,可划分为11个外显子。预测蛋白含627个氨基酸,成熟蛋白603个氨基酸,N端为24个氨基酸信号肽。不同于胞外域串联2个配体结合区的典型禽类催乳素受体,预测蛋白胞外域仅含1个配体结合区,类似于哺乳动物催乳素受体。配体结合区同样含有2对半胱氨酸残基和1个WSXWS的5肽WS基序,此为细胞因子受体超家族I型受体中高度保守的2个典型特征。同时,筛选了催乳素受体基因的1个突变位点和1个SNP位点,分别位于5′-及3′-UTR区。其中,3′-UTR区SNP位点经χ2适合性检验,在鸭群体中未达到Hardy-Weinberg平衡状态。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2013年05期)

尹荣兰,杨正涛,张艳晶,刘辉,刘珊[7](2009)在《金黄色葡萄球菌FnBP配体结合区基因的克隆及其原核表达》一文中研究指出[目的]克隆金黄色葡萄球菌FnBP配体结合区基因,并构建原核表达载体,进行原核表达。[方法]设计引物,采用PCR方法扩增FnBP配体结合区基因,T-A克隆后,构建了克隆质粒pMD18-FnBP。用BamH I和EcoR I双酶切pMD18-FnBP和pET28a(+),将纯化的基因FnBP亚克隆至pET28a(+),构建重组表达质粒pET28a-FnBP,并将其转化至大肠杆菌感受态BL21(DE3)中,IPTG诱导表达,并对表达产物进行分析。[结果]PCR扩增出1条约370 bp的目的片段,表达产物经SDS-PAGE分析,在30 kDa处出现了与目的蛋白一致的外源蛋白带,Western blot分析表明该蛋白具有金黄色葡萄球菌的抗原性。[结论]已成功构建了FnBP配体结合区基因,并在原核细胞中表达。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2009年01期)

尹荣兰,杨正涛,张艳晶,刘辉,刘珊[8](2008)在《金黄色葡萄球菌FnBP配体结合区基因的克隆及其原核表达(英文)》一文中研究指出[Objective] The study aimed to clone the FnBP ligand binding gene of Staphylococcus aureus and run prokaryotic expression by constructing a prokaryotic expression vector. [Method] The gene encoding FnBP ligand binding gene was amplified from S.aureus chromosomal DNA by PCR technique. After T-A cloning, plasmid pMD18- FnBP was constructed. pMD18- FnBP and pET28a(+)were digested by BamH Ⅰ and EcoR Ⅰ double enzymes, then the purified FnBP ligand binding gene was subcloned into the expression vector pET28a(+), and the prokaryotic expression vector pET28a-FnBP was thus constructed. The constructed plasmid pET28a-FnBP was transformed into Escherichia coli BL21(DE3) competent cells. The bacterium was induced by IPTG and the expressed products were analyzed by SDS-PAGE and Western blot. [Result] The gene fragment with the length of 370 bp was amplified by PCR approach. One approximately 30 kD exogenous protein was observed in SDS-PAGE analysis. Western blot analysis indicates the protein has antigenicity of S.aureus. [Conclusion] The FnBP ligand binding gene of S.aureus was successfully cloned and expressed in prokaryotic cells.(本文来源于《Agricultural Science & Technology》期刊2008年06期)

时国庆,郭彦峰,魏巍,宋青,张怀[9](2007)在《雌激素受体ERβ配体结合区的异源表达与纯化》一文中研究指出为研究环境化合物与雌激素受体的相互作用,在大肠杆菌中异源表达了人雌激素受体ERβ的配体结合区(hERβ-LBD)蛋白。在诱导剂(IPTG)浓度为0.2mmol.L-1,培养温度25℃,诱导时间为8h的优化表达条件下,经亲和色谱法纯化后,hERβ(LBD蛋白的产量可达236mg.L-1.(本文来源于《北京科技大学学报》期刊2007年S2期)

杜平[10](2007)在《口蹄疫病毒整联蛋白受体β_1亚基的克隆及配体结合区多克隆抗体的制备》一文中研究指出目的:克隆口蹄疫病毒(Foot-and-Mouth disease Virus,FMDV)整联蛋白受体β1亚基基因,构建其全基因组的真核表达载体。利用大肠杆菌诱导表达其配体结合区﹝Ligand-Binding Domain,LBD﹞,纯化表达产物免疫家兔制备多克隆抗体,进行免疫原性和免疫反应性分析,为探索口蹄疫病毒对αvβ1的利用率及β1亚基的功能奠定基础。方法:1.参照Genbank公布的整联蛋白β1亚基的基因组序列,设计并合成两对特异性引物,以RT-PCR方法从牛肺组织扩增出目的基因,回收纯化连入PGEM-T载体,测序鉴定。依照测序结果设计真核表达引物,以克隆载体PGEMβ1为模板扩增所需表达片段,酶切纯化后定向亚克隆至真核表达载体pCDNA3.1zero(+)中,构建表达载体pCDNAβ1。2.通过生物信息学分析,筛选β1基因的优势抗原表位,选取胞外的配体结合区与6×His融合,在大肠杆菌中大规模诱导表达,利用SDS-PAGE对表达产物进行鉴定。用Ni2+亲和柱层析纯化重组蛋白,纯化后的蛋白免疫新西兰家兔制备多克隆抗体,间接ELISA法检测免疫兔血清中重组LBD多克隆抗体的效价,对LBD的免疫原性进行分析。盐析法纯化多克隆抗体,并利用western-blot检测多克隆抗体的特异性。结果:1.0%的琼脂糖凝胶电泳显示RT–PCR产物呈弥散状态,用另一对引物进行巢式扩增,得到2400bp的目的片段;测序分析β1基因全长2394bp,编码798个aa,包括20个aa的信号肽序列,708个aa的胞外区,29个aa的跨膜区和41个aa的胞质区,哺乳动物间氨基酸同源性达94%以上;PCR、酶切、序列测定鉴定表明成功构建了真核表达载体pCDNAβ1;Expasy软件分析β1基因的抗原性及结合国外的相关资料选取346—843bp位作为配体结合区,与6×His融合;SDS-PAGE分析显示,表达、纯化后获得一相对分子量(从)约为26 KDa的目的蛋白条带,目的蛋白在菌体细胞内主要以包涵体形式存在;经Ni-NTA亲和纯化获得了较高纯度的重组蛋白;利用纯化的重组LBD蛋白免疫新西兰兔,间接ELISA法测定兔免疫血清特异性抗体效价在1:12800以上;Western-blot检测表明LBD蛋白能与LBD抗血清发生特异性反应。结论:克隆了口蹄疫病毒整联蛋白受体β1基因的全基因组,并成功构建了其真核表达载体。在大肠杆菌中成功表达了β1基因配体结合区,获得分子量为26KD的重组蛋白。LBD具有较好的免疫原性,能刺激新西兰家兔产生高效价的抗体,并具有较强的反应特异性。(本文来源于《甘肃农业大学》期刊2007-05-20)

配体结合区论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

扩增了奶牛乳腺炎金黄色葡萄球菌纤粘连结合蛋白A(Fnb A)配体结合区基因,并将其克隆至真核表达载体p VAX1启动子下游,构建成真核表达质粒,通过体外细胞转染试验,运用IFA方法进行抗原性初步确认,所构建的重组DNA疫苗质粒能在真核细胞中表达外源基因并被金黄色葡萄球菌抗体特异性识别。为进一步评价侯选疫苗的免疫原性,进行了BALB/c小鼠免疫试验,分别检测免疫后的ELISA抗体水平、Th1/Th2类细胞因子水平以及T淋巴细胞增殖试验。结果表明,构建的核酸疫苗p VAX1-p Fnb A免疫小鼠后,ELISA抗体水平提高,Th1/Th2类细胞因子含量提升,T细胞增殖能力增强。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

配体结合区论文参考文献

[1].郭彬,熊向华,汪建华,游松,张惟材.成纤维细胞生长因子受体3胞外配体结合区的重组表达及其与A型肉毒毒素重链C端的相互作用[J].生物技术通讯.2015

[2].尹荣兰,尹荣焕,白文林,李琳,任清丹.金黄色葡萄球菌FnbA配体结合区基因核酸疫苗的构建与免疫试验[J].中国兽医杂志.2014

[3].杨益虎.金黄色葡萄球菌富丝氨酸重复蛋白SraP配体结合区以及肺炎链球菌L,D-羧肽酶DacB的结构与功能研究[D].中国科学技术大学.2014

[4].王东,金宏威,刘振明,张亮仁.雌激素受体α36亚型配体结合区的结构模建、优化及验证[J].中国药物化学杂志.2013

[5].钟锦绣,李亚梅,关晏星.乳腺癌HER-2胞外配体结合区靶点治疗的研究进展[J].中国肿瘤临床.2013

[6].吉文林,段修军,宦海琳,丁潜,孙国波.1种胞外域仅含1个配体结合区的鸭催乳素受体基因的剪接异形体克隆及基因多态性分析[J].畜牧兽医学报.2013

[7].尹荣兰,杨正涛,张艳晶,刘辉,刘珊.金黄色葡萄球菌FnBP配体结合区基因的克隆及其原核表达[J].安徽农业科学.2009

[8].尹荣兰,杨正涛,张艳晶,刘辉,刘珊.金黄色葡萄球菌FnBP配体结合区基因的克隆及其原核表达(英文)[J].AgriculturalScience&Technology.2008

[9].时国庆,郭彦峰,魏巍,宋青,张怀.雌激素受体ERβ配体结合区的异源表达与纯化[J].北京科技大学学报.2007

[10].杜平.口蹄疫病毒整联蛋白受体β_1亚基的克隆及配体结合区多克隆抗体的制备[D].甘肃农业大学.2007

论文知识图

α的结构特征的激活示意图β受体激活机制(Massagué,1998)脂质体的演变A早期的常规脂质体将水溶...受体的异源二聚体激活模型活性探针分子LX598的活性及其分离GAB...

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配体结合区论文_郭彬,熊向华,汪建华,游松,张惟材
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