导读:本文包含了印迹细胞论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:印迹,基因,细胞,色素,蛋白质,通量,表观。
印迹细胞论文文献综述
贺麒龙,魏绪宇,韩晓英,周茜,王海全[1]（2019）在《孕期暴露PCB118对F1代小鼠卵母细胞表观印迹和成熟的影响》一文中研究指出目的:多氯联苯(Polychlorinated biphenyls,PCBs)是目前受到关注的一类持久性有机污染物,共包含209种同系物,曾被广泛应用在生产生活中。人类摄入的PCBs90%以上来源于饮食,主要是动物性食品。PCB118(2,3‘,4,4’5-pentachlorobiphenyl)是PCBs同系物中的一类毒性较强的二恶英类似物,存在于哺乳动物的脂肪组织、血清、乳汁及卵泡液中。研究报道暴露PCBs可以对小鼠神经及生殖系统产生影响,但孕期暴露PCB118对子代小鼠卵母细胞成熟及DNA甲基化的影响还未见系统报道。材料和方法将雌性与雄性ICR小鼠以2∶1的比例合笼,见栓后将怀孕小鼠随机分为叁组,并参考人乳汁中PCB118的残留量,将暴露剂量设定为20和100μg·kg~(-1)/day,暴露时间为胎儿原始生殖细胞迁移至生殖脊的阶段(妊娠7.5至12.5天)。检测F1代7～8周龄雌鼠的脏器系数,卵母细胞表观印迹模式,DNA甲基转移酶(Dnmts)和去甲基化酶(Tets)的表达水平以及评估卵母细胞的质量。结果通过小鼠孕期暴露不同剂量的PCB118,发现F1代雌鼠肝脏、大脑、肾脏的脏器系数均有降低的趋势。我们随后探究了PCB118对F1代小鼠卵母细胞印迹基因甲基化的水平,发现在实验组的F1代小鼠卵母细胞中,Snrpn,Peg3以及Igf2r基因差异甲基化区域的CpG位点出现了异常的甲基化模式,上述叁个印迹基因表达量也呈现升高的趋势,并且小鼠卵母细胞5-甲基胞嘧啶的水平显着下降而5-羟甲基胞嘧啶的水平显着上升。通过qRT-PCR数据分析发现卵母细胞中Dnmts以及表观调控因子Uhrf1的mRNA表达水平降低,而去甲基化酶Tet3的mRNA表达水平升高。进一步探究孕期暴露PCB118对子代小鼠卵母细胞成熟的影响,发现F1代小鼠卵母细胞的成熟率和受精率均显着降低,并具有剂量依赖的效应;实验组F1代雌鼠的卵母细胞出现了染色体排布紊乱及纺锤体形态异常的现象,卵母细胞RNA-seq数据结果显示实验组小鼠发育、凋亡、细胞骨架装配等相关基因的表达与对照组相比出现明显差异。结论孕期暴露PCB118会影响F1代小鼠卵母细胞表观遗传修饰和成熟过程,这可能是通过改变了卵母细胞中Dnmts,Uhrf1以及Tet3的表达而导致的。因此,人们应当重视在孕期通过饮食来源摄入PCB118对子代卵母细胞质量造成的潜在影响。(本文来源于《中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集》期刊2019-09-17）
王双寿,葛琼琼,程婕,黄伟[2]（2019）在《基于分子印迹技术的细胞靶向识别研究进展》一文中研究指出分子印迹技术(Molecular imprinting technology,MIT)是一项模拟抗体等靶向生物分子识别专一性的仿生分子识别技术,由于其预定性强、识别选择性好、成本低廉等优势而被广泛应用。细胞靶向识别是MIT近些年发展起来的一个重要研究方向,在分子生物学、医疗诊断等领域极具应用前景。本文从分子印迹材料的合成方法、识别原理及其应用等方面介绍了MIT在细胞靶向识别领域的研究进展,最后提出了MIT在细胞靶向识别方面尚存的若干问题并对其未来可能的发展方向进行了展望。(本文来源于《贵州师范大学学报(自然科学版)》期刊2019年04期）
李旭,彭柯力,张金鑫,高倩,张文豪[3]（2019）在《印迹基因修饰使孤雌胚胎干细胞获得四倍体补偿能力》一文中研究指出孤雌胚胎干细胞(Parthenogenetic embryonic stem cells,pESCs)的遗传物质全部来源于母源基因组,因缺失父源基因而不具备四倍体补偿的能力。为了使pESCs也具备发育到个体的能力,呈现与受精卵来源ESCs类似的多能性,文中借助CRISPR/Cas9系统对孤雌来源的pESCs中的2个重要母源印迹基因的差异甲基化区域(Differentially methylated region,DMR)进行单等位基因敲除(H19-DMR,IG-DMR),获得双基因敲除的(DKO)pESCs。结果表明,pESCs虽然来源于母源基因组,但是其形态特征、多能干性标记分子的表达水平、体外神经分化能力与受精卵来源的ESCs基本一致。最后,通过基因修饰的DKOpESCs可以通过四倍体补偿获得发育到期的胎儿,表明经过印迹基因修饰的pESCs也具有发育到一个完整个体的多能性。从而为再生医学研究提供了一类具有主要组织相容性复合基因匹配且多能性良好的资源细胞。(本文来源于《生物工程学报》期刊2019年05期）
陈志亮[4]（2018）在《氧化石墨烯-Fe(Ⅲ)@分子印迹复合材料模拟细胞色素c还原酶的研究》一文中研究指出目前我国环境水体污染现状不容乐观,环境水体中常见的污染物如重金属、有机物等主要来源于工业、农业、生活污染物的排放。环境水体污染对人类健康造成了严重的危害,开发新型污水处理技术刻不容缓。细胞色素c(Cyt c)作为一种含有卟啉环辅基的电子传递蛋白,在细胞呼吸作用中具有重要的生理功能。由于Cyt c能够通过其自身卟啉环辅基中的Fe进行电子传递且对目标污染物具有良好的识别选择性,Cyt c以及含有Cyt c的细菌能够有效去除环境水体中的污染物。但是这种生物处理方式易受环境影响且稳定性能差,因此制备具有Cyt c催化功能的高稳定性人工酶具有重要的环境意义。分子印迹聚合物(MIP)是一种具有类似于抗原-抗体之间特异性识别和结合功能的高分子聚合物,被誉为“人工抗体”,具有易合成,选择性高,稳定性好等特性。基于MIP的人工模拟酶既具有自然酶的催化特性,又具有良好的稳定性,在去除环境水体中污染物领域具有重要的应用前景。本研究旨在利用分子印迹技术制备具有Cyt c分子识别及电子传递特性的高稳定人工模拟酶,并将该模拟酶应用于环境水体中污染物的去除,研究其对污染物的去除效率及催化还原机理。目的:利用分子印迹技术制备既具有Cyt c分子识别及电子传递特性,又具有高稳定性的人工模拟酶,并将该Cyt c模拟酶应用于环境水体中污染物的去除。方法:首先选取Cr(VI)为目标污染物,利用氧化石墨烯(GO)稳定的Pickering乳液合成GO包覆的Cr(VI)离子印迹聚合物(IIP),并评价其吸附性能。该印迹聚合物能够提供模拟酶的特异性识别位点,然后利用GO与Fe(III)的配位作用在聚合物表面构建GO-Fe(III)复合材料,该材料在可见光照射下能够激发出电子,并将电子传递给印迹孔穴吸附的目标污染物,将目标污染物进行还原,由此得到Cyt c模拟酶,评价模拟酶的催化还原性能;利用细胞染毒实验评价模拟酶对Cr(VI)的解毒性能;最后以五价钒和硝基苯为目标污染物分别制备其模拟酶,并应用于五价钒及硝基苯的去除,评价其去除环境污染物的性能,探索模拟酶制备方法的普适性。结果:(1)以Cr(VI)离子为模板,以功能单体2-VP、混合交联剂TRIM与EGDMA、致孔剂甲苯等为油相,以GO水溶液为水相,形成GO稳定的Pickering乳液,成功制备了Cr(VI)离子印迹聚合物。光学显微镜显示IIP为规则的球形,直径为76.5±8.4μm,扫描电镜(SEM)显示GO能够较好的包覆于IIP表面。热力学吸附研究表明IIP的最大吸附容量q_(max)(0.68 mg g~(-1))明显高于非印迹聚合物(NIP)的q_(max)(0.43 mg g~(-1)),说明IIP对模板分子Cr(VI)具有良好的选择性识别性能。动力学吸附研究表明IIP的吸附平衡时间短,30分钟即可达到吸附平衡。干扰实验显示Cr(III),Fe(III),Fe(II)和Cu(II)等离子对IIP的吸附性能没有明显的抑制作用。重复利用研究显示,IIP在循环利用5次之后仍存在明显的选择性吸附性能,说明IIP具有良好的稳定性。该离子印迹聚合物能够特异性的识别目标污染物,为Cyt c模拟酶的制备提供了特异性识别位点。(2)利用GO与Fe(III)的配位作用在IIP聚合物表面形成GO-Fe(III)复合材料,以此得到Cyt c模拟酶。该模拟酶在pH4水溶液中,在可见光照射下能够选择性催化还原Cr(VI)。单一体系的光催化实验表明,光照、印迹孔穴、GO、Fe(III)在催化过程中起着关键作用。米氏方程研究表明,该模拟酶具有酶催化的性能,其米氏常数K_m为NIP的46%(米氏常数K_m越小说明酶的催化效果越好)。干扰实验表明与Cr(VI)结构相似的H_2PO_4~-能够抑制Cr(VI)的催化还原,而与Cr(VI)结构不相似的CH_3COO~-对模拟酶的催化效果没有影响,进一步表明Cyt c模拟酶具有良好的光还原选择性。机理研究表明,光照条件下GO被激发产生光生电子,电子传递给与GO配位的Fe(III),促使Fe(III)还原为Fe(II),Fe(II)将特异性吸附的Cr(VI)还原为Cr(III)。Cr在还原过程中与Fe形成水合物并沉积于聚合物表面。由此可知,我们成功制备了Cyt c模拟酶,该模拟酶能够有效催化还原溶液中的Cr(VI),并且能够将还原产物Cr(III)负载于材料表面。(3)分别利用制备的离子印迹聚合物和Cyt c模拟酶处理Cr(VI)溶液,并将处理后的溶液染毒细胞,利用细胞毒性实验评价Cyt c模拟酶对Cr(VI)的解毒效果。研究发现,印迹聚合物以多次吸附的处理方式能够有效的吸附溶液中的Cr(VI)。吸附处理后的Cr(VI)溶液染毒L02细胞时,约93%的细胞仍然具有细胞活力,表明吸附处理后的溶液几乎无细胞毒性。上述的吸附法需采用多次吸附的方式去除Cr(VI),因此开发吸附-降解于一体的Cr(VI)催化剂具有重要研究意义。本研究表明,Cyt c模拟酶光催化剂能够有效降低溶液中Cr(VI)的毒性,随着光照时间的增加,溶液中Cr(VI)的浓度逐渐降低。将催化还原处理的Cr(VI)溶液染毒HepG2细胞,结果表明IIP能够有效解毒Cr(VI),IIP光催化处理420分钟的溶液染毒HepG2细胞后,约85%的细胞仍具有活力。Hoechst 33342与PI双染的结果同样表明Cyt c模拟酶能够有效解毒Cr(VI)。因此,Cyt c模拟酶能够有效消除溶液中Cr(VI)的毒性,且解毒效果随Cyt c模拟酶光催化时间的增加而增加。(4)选取五价钒(V(V))和硝基苯(NB)为目标污染物,分别制备其Cyt c模拟酶。研究表明以Cr(VI)为结构类似物模板合成的分子印迹聚合物对V(V)表现出明显的特异性吸附性能;热力学吸附数据表明,结构类似物分子印迹聚合物(SA-MIP)的最大吸附容量q_(max)为5.44 mg g~(-1),是结构类似物非印迹聚合物(SA-NIP)最大吸附容量1.3的倍;动力学数据表明SA-MIP的吸附平衡时间短,30分钟即可达到吸附平衡;光催化数据表明在光照30分钟内溶液中V(V)明显减少,但是随后溶液中V(V)的含量没有明显的变化,这可能是由于还原反应只发生在吸附于SA-MIP表面的V(V)。以对硝基苯酚为过渡态类似物模板合成的分子印迹聚合物对NB具有较好的特异性吸附效果;光催化数据表明过渡态类似物分子印迹聚合物(TSA-MIP)能够有效催化还原NB,其表观速率常数(4.2×10~(-3) min~(-1))是过渡态类似物非印迹聚合物(TSA-NIP)表观速率常数(3.5×10~(-3)min~(-1))的1.2倍,以异硫氰酸荧光素(FITC)标记催化反应后的聚合物发现NB在催化过程中被还原为苯胺,且苯胺吸附于聚合物表面。这说明Cyt c模拟酶不仅能够有效地选择性催化还原Cr(VI),而且还能够催化还原环境中的其他污染物(V(V)和NB)。因此Cyt c模拟酶能够适用于环境中多种污染物的有效去除,具有广泛适用性。结论:利用GO稳定的Pickering乳液能够制备稳定性好、吸附能力强、抗干扰能力强的Cr(VI)离子印迹聚合物,在该聚合物表面构建GO-Fe(III)配位复合材料,即得到Cyt c模拟酶。该模拟酶能够有效去除溶液中的Cr(VI),且处理后的Cr(VI)溶液没有明显的细胞毒性。针对V(V)和NB制备的Cyt c模拟酶能够有效去除溶液中的V(V)和NB等污染物,表明本论文提出的Cyt c模拟酶制备方法具有广泛适用性,为选择性光催化还原去除污染物提供了新的方法与思路。(本文来源于《华中科技大学》期刊2018-05-01）
王北[5]（2018）在《细胞印迹技术构建及其在肿瘤细胞检测中的应用》一文中研究指出利用聚合物材料制作高度保真性的印迹基底以便用于模板的识别,这种印迹技术在分子识别与生物传感等领域具有潜在的应用价值。将结构上互补的聚合物单体通过非共价键或共价键与模板结合,随后加入交联剂进行聚合反应,反应结束后将模板洗脱出来,形成一种具有固定凹陷大小和形状及特定排列功能团的印迹基底,该印迹基底与模板分子在形状、大小等方面具有极好的互补性,因而这种聚合物具有可以特异性识别原始模板的功能。以往的研究主要集中在分子水平上,还未涉及到细胞层面,主要原因是用于分子识别元件的生物活性组分容易失活变性,而且受到模板大小复杂性的限制。因此在本论文工作中,我们研制了高度保真性的细胞印迹聚合物,可以捕获具有复杂结构的肿瘤细胞,并且进一步在不同层面探讨了印迹聚合物膜的性质,制作了快速捕获分离靶细胞的检测装置,拓展了印迹聚合物膜在生物检测与传感领域的应用。1.新型细胞印迹模型的构建及其性质的研究聚二甲基硅氧烷具有优良的生理惰性、耐热抗寒、无毒抗震等性能,且对细胞组织无副作用,符合生物医用材料的要求,在论文本部分工作中,我们利用聚二甲基硅氧烷本体和固化剂,研制了出高度保真性的细胞印迹聚合物,通过细胞印迹产生了“人造受体”,并且形成特异性的凹陷结构形状可以捕获靶肿瘤细胞。本研究在研制高度保真细胞印迹聚合物时,创新地通过双醛固定组合处理使细胞失活,具有诸多优点如(1)利用醛基交联而使细胞表面硬化;(2)消除活细胞分泌的化学物质,防止干扰细胞印迹形成过程。此外本研究还提供了一种简单价廉的单细胞分离装置,无需依靠专业或昂贵的设备,而且不需要亲和试剂或蛋白抗体,就可以对靶细胞的捕获效率达到89%,该模型高度抗干扰,可为单细胞分析、细胞组织分化以及以细胞为基础的生物医学诊断提供新的技术手段。2.基于细胞印迹的肿瘤细胞识别与检测新方法研究本部分工作中,我们在制作的细胞生物印迹聚合物膜基础上,进一步研究了其表观单分子性质和探讨了其在生物传感与检测领域的应用。我们首先制作出了高保真性的印迹聚合物膜,通过叶酸受体连接Ligprobe,然后经过RCA滚环扩增以增强表征信号,证明了在分子水平上印迹聚合物与模板细胞的高度契合。进一步研究表明,我们所构建的生物印迹能够在纳米尺度上区分靶细胞的总体大小和表面特征,因此该印迹聚合物膜可用于生物传感器,利用细胞表面膜蛋白种类差异而分离细胞,这种差异也可用作为基于生物印迹的癌症诊断工具。此外,本研究还制作基于印迹聚合物膜的电化学传感装置,该装置成本低廉,便于操作并可反复使用,在生物传感领域具有十分广阔的应用前景。(本文来源于《南京大学》期刊2018-05-01）
门婷婷[6]（2018）在《量化斑点免疫印迹分析（QDB）在组织和细胞水平揭示管家蛋白质表达的研究》一文中研究指出目的:主要用于维持细胞功能的管家蛋白质通常用作内源性对照,因为它们被认为是充分和稳定表达的。然而,理想的、稳定表达的管家蛋白质实际上并不存在。由于各种因素,细胞暴露于快速变化的微环境中,为了在这些压力下生存下来,细胞必须采取各种策略来增加其对快速变化的微环境的适应性。这些微妙的调整都可能会影响到管家蛋白质的稳定性,严重影响结果的准确性和可靠性,甚至可能完全颠覆结果。因此,明确管家蛋白质的稳定性,在蛋白质组学水平是非常关键的。为了明确管家蛋白质在组织和细胞中的变化水平,并提出高通量研究方法:量化斑点免疫印迹分析技术(QDB)的优势,我们进行了相关研究。方法:(1)选取14只TRAMP鼠(C57BL/6系),用Western Blot法检测14只小鼠肝脏组织中6种管家蛋白质的含量,分析不同小鼠肝脏组织之间管家蛋白质的表达。(2)将TRAMP鼠肝脏按照解剖结构分为10个部位,用Western Blot法检测肝脏10个不同部位中6种管家蛋白质的水平,分析相同组织不同部位之间管家蛋白质的表达。(3)摘取87例小鼠的整个前列腺(包括40只野生鼠,47只TRAMP鼠,均为C57BL/6系)。将小鼠分为野生组与TRAMP组,再按周龄(12W、16～18W、20～30W)分层。用QDB技术检测前列腺组织样品中管家蛋白质Tubulin的表达水平。检测Tubulin的含量,探讨Tubulin的稳定性。(4)选取8种人类细胞系,用Western Blot法和QDB技术检测细胞中管家蛋白质Tubulin的含量。分析不同细胞中Tubulin的表达水平。(5)构建HEK293T单克隆细胞(转染腺病毒EIA基因的人肾上皮细胞系),共繁殖培养12组,分别使用QDB技术和Western Blot法检测12组细胞中管家蛋白质Tubulin的含量,分析相同细胞中Tubulin的表达是否一致。结果:综合分析管家蛋白质在组织中的表达是不稳定的。利用Western Blot方法检测6种管家蛋白质在肝脏组织中的表达,分析发现表达的不稳定性,进一步用QDB技术在大规模水平检测前列腺组织中Tubulin的含量,相同或不同周龄的野生鼠或TRAMP鼠中,Tubulin的表达水平不一致且差异显着。此外,我们在细胞实验中用Western Blot分析发现管家蛋白质Tubulin稳定性,但是具体差异无法测量,进一步通过QDB技术检测管家蛋白质Tubulin的绝对含量,明确Tubulin在细胞中的水平是比较稳定的。结论:管家蛋白质可以在个体之间呈现显着变化。基于相对测量的结论本质上是有限的,而在高通量研究中测量个体蛋白质的绝对含量是蛋白质组学水平所必需的,以避免在蛋白质水平上对结果的偏倚解释。(本文来源于《滨州医学院》期刊2018-03-19）
赵晓丽,何锡文,李文友[7]（2017）在《基于磁球表面的抗原决定基印迹法用于选择性识别细胞色素c的研究》一文中研究指出本工作合成了一种核壳型的抗原决定基磁性分子印迹聚合物,并用于选择性识别目标蛋白细胞色素c(Cytochrome c,Cyt c)。制备过程中先用溶剂热法合成Fe_3O_4磁性纳米粒子,然后加入Cyt c其C端的九肽作为模板,进行一段时间的预组装,最后加入多巴胺盐酸盐(DA)溶液,调节反应体系的p H使多巴胺聚合在磁球表面。洗脱掉模板后,即得到分子印迹聚合物。优化DA的用量使聚合物达到最佳的吸附效果。在最优条件下,制得的印迹聚合物对目标蛋白有较好的吸附选择性,并且有良好的重复利用性。此外,用抗原决定基做模板制得的聚合物的吸附容量和印迹因子明显优于用相应蛋白质做模板的情况。(本文来源于《分析科学学报》期刊2017年05期）
辛晓磊[8]（2017）在《第一部分 干扰素α-1a通过激活内源线粒体凋亡通路和内质网应激凋亡通路诱导喉癌Hep-2细胞的凋亡 第二部分 微流控蛋白印迹杂交与传统Western蛋白印迹杂交对目的蛋白的检测效果差异比较》一文中研究指出研究背景与目的:喉癌传统的手术切除与放射治疗,可能会造成病人失声、毒性反应等不良后果,针对喉癌的新疗法亟待发掘。干扰素具有抗病毒、抑增殖、调节免疫系统的作用。α干扰素对人类喉癌细胞具有抑增殖的作用。但是,α干扰素调节细胞生长抑制的机理没有被充分的研究。本论文利用喉癌Hep-2细胞为模型,旨在研究IFNα-1a能够抑制喉癌Hep-2细胞增殖的分子机制。材料与方法:选取喉癌Hep-2为细胞模型,通过瞬时转染质粒过量表达IFNα-1a和外加重组蛋白IFNα-1a这两种方式,研究IFNα-1a对Hep-2细胞增殖的影响。利用CCK8和MTT等方法检测IFNα-1a对Hep-2细胞增殖的抑制作用,流式分析检测IFNα-1a是否对Hep-2细胞具有促凋亡作用,用Western Blot方法检测IFNα-1a激活的具体的凋亡信号通路。研究IFNα-1a对组织细胞的特异性时,检测了 IFNα-1a对其他细胞系,如人胚肾上皮细胞HEK-293T、人肝癌细胞HepG2、人肺癌细胞A549,是否具有促凋亡作用。实验结果:IFNα-1a能显着的抑制喉癌Hep-2细胞的增殖,该抑制过程是通过诱导Hep-2细胞的凋亡来实现。IFNα-1a能抑制抑凋亡蛋白Bcl-XL的表达,促进细胞色素C由线粒体释放到胞浆,并最终激活caspase 3的切割活化,并进一步诱导caspase 3底物PARP-1的切割活化,从而激活了内源线粒体凋亡通路。IFNα-1a也能刺激内质网应激反应(ER-stress)通路相关基因GRP78和CHOP的表达上调,以及caspase4的切割活化,并进一步激活caspase 3的切割活化,也即IFNα-1a激活ER-stress介导的细胞凋亡通路。但外源凋亡通路的标志物蛋白caspase8、caspase10未被切割活化,因此IFNα-1a未激活外源凋亡通路。另外,IFNα-1a对HEK-293T、HepG2、A549未发现有明显的促凋亡影响。实验结论:IFNα-1a通过诱导Hep-2细胞的凋亡抑制了其增殖,IFNα-1a主要是通过内源线粒体凋亡通路和ER-stress凋亡通路来促进Hep-2细胞的凋亡,外源凋亡通路未被激活。IFNα-1a对其他HEK-293T、HepG2、A549细胞的凋亡无显着性影响,也即IFNα-1a对组织细胞的促凋亡作用具有组织特异性的特点。总之,我们的研究揭示了 IFNα-1a抑制喉癌细胞增殖的具体的分子机制。实验背景及说明:传统的Western蛋白印迹杂交在研蛋白质研究领域有相当广泛的应用,是实验室最常用研究技术之一,能对蛋白质进行定性和半定量的分析方法。虽然传统Western蛋白印迹杂交有广泛的应用市场,但其本身还是存在诸如:样品需求量大、费时、费力等的缺点。这里,基于反向蛋白杂交Reverse phase protein array(RPPA)的点杂交原理,我们发明了一种新型微流控纸芯片蛋白印迹杂交,相比传统的Western蛋白印迹杂交,新型微流控纸芯片蛋白印迹杂交具有样品需求量低至1μL,节省试剂至20mL,节省时间至1h,节省劳动力、高通量检测等诸多优点。尤其的,纸芯片蛋白印迹杂交,由于微流控纸芯片本身具有的优点:高比表面积、毛细作用力等,使得纸芯片蛋白印迹杂交可以检测到更微量的蛋白。实验材料与方法:本篇文章以06-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)蛋白为例,选用高表达MGMT蛋白的MCF7细胞为细胞模型,比较传统Western蛋白印迹杂交和纸芯片蛋白印迹杂交分别对经过药物一MGMT阻断剂处理后MCF7细胞的MGMT蛋白表达量的定性以及相对定量结果。实验结果:纸芯片蛋白印迹杂交可以成功进行MGMT的定性、相对定量,而且上样检测蛋白低至10-25pg,这相比于传统Western蛋白印迹杂交的上样检测蛋白1-5ng,提高了 3个数量级。整个操作流程只需要1个小时,所用试剂量少,实验成本更低,而且纸芯片的多通道构造可以实现像反向蛋白杂交分析(RPPA)一样高通量的检测组织蛋白表达量。实验结论:本篇文章的微流控蛋白印迹杂交,能检测到更微量级的蛋白,更节省试剂、样品,省时省力,省钱,高通量检测。微流控纸芯片蛋白印迹杂交的优势被估计可以用于实验室中蛋白的定性以及相对定量。(本文来源于《北京协和医学院》期刊2017-06-30）
勾晨雨,刘向臻,石晓梅,柴涵婧,方群[9]（2017）在《印迹基因CDKN1C对滋养细胞生物学功能的影响》一文中研究指出目的研究印迹基因CDKN1C对人滋养细胞生物学功能的影响。方法利用小干扰RNA沉默CDKN1C基因的表达,将人绒毛外滋养细胞(TEV-1细胞株)分为3组,空白组细胞未经转染处理,对照组细胞由不含siRNA的空白脂粒体进行转染,siRNA组细胞由包裹siRNA的脂粒体进行转染。实时荧光定量-PCR(qRTPCR)和免疫印迹(Western blot)检测TEV-1细胞CDKN1C基因的表达水平,CCK-8检测细胞增殖率,流式细胞术检测细胞凋亡及细胞周期,Transwell细胞迁移实验检测细胞侵袭和迁移能力。结果 CDKN1C基因沉默后48h TEV-1细胞早期和晚期凋亡率均降低,细胞增殖率升高;细胞周期G0/G1期比例下降、S期和G2/M期比例增高;细胞迁移和侵袭能力增强(P<0.05)。结论印迹基因CDKN1C对人滋养细胞增殖、凋亡、细胞周期、迁移、侵袭等生物学功能有调控作用。(本文来源于《广东医学》期刊2017年07期）
阎红琳,饶洁,胡继昌,袁静萍[10]（2016）在《长链非编码RNA母系印迹基因3(MEG3)通过p53促进缺血缺氧神经细胞损伤》一文中研究指出目的通过小鼠神经母细胞瘤细胞(N2a细胞)氧糖剥夺(oxygen glucose deprivation,OGD)研究长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)母系印记基因3(maternally imprinted genes 3,MEG3)在神经细胞缺氧缺血损伤中的作用,并初步探讨其机制。方法采用OGD模型诱导N2a细胞凋亡模拟神经细胞缺血缺氧损伤过程,实时荧光定量PCR检测MEG3的水平;在N2a细胞中过表达MEG3,采用PI染色检测细胞凋亡,Western blot和荧光素酶报告基因检测N2a细胞中过表达MEG3后对p53蛋白表达及转录活性的影响。结果经OGD处理后,N2a细胞MEG3水平较对照组(常氧组)明显增强;在N2a细胞中过表达MEG3能够激活p53转录活性,增强p53蛋白表达,促进细胞凋亡。结论 lncRNA MEG3可能通过p53促进凋亡,加重缺血缺氧造成的神经损伤。(本文来源于《中国组织化学与细胞化学杂志》期刊2016年04期）
印迹细胞论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
分子印迹技术(Molecular imprinting technology,MIT)是一项模拟抗体等靶向生物分子识别专一性的仿生分子识别技术,由于其预定性强、识别选择性好、成本低廉等优势而被广泛应用。细胞靶向识别是MIT近些年发展起来的一个重要研究方向,在分子生物学、医疗诊断等领域极具应用前景。本文从分子印迹材料的合成方法、识别原理及其应用等方面介绍了MIT在细胞靶向识别领域的研究进展,最后提出了MIT在细胞靶向识别方面尚存的若干问题并对其未来可能的发展方向进行了展望。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
印迹细胞论文参考文献
[1].贺麒龙,魏绪宇,韩晓英,周茜,王海全.孕期暴露PCB118对F1代小鼠卵母细胞表观印迹和成熟的影响[C].中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集.2019
[2].王双寿,葛琼琼,程婕,黄伟.基于分子印迹技术的细胞靶向识别研究进展[J].贵州师范大学学报(自然科学版).2019
[3].李旭,彭柯力,张金鑫,高倩,张文豪.印迹基因修饰使孤雌胚胎干细胞获得四倍体补偿能力[J].生物工程学报.2019
[4].陈志亮.氧化石墨烯-Fe(Ⅲ)@分子印迹复合材料模拟细胞色素c还原酶的研究[D].华中科技大学.2018
[5].王北.细胞印迹技术构建及其在肿瘤细胞检测中的应用[D].南京大学.2018
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