导读:本文包含了活性复合真皮基质论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:真皮替代物,脐带间充质干细胞,壳聚糖,体外构建
活性复合真皮基质论文文献综述
韩焱福,柴家科,李东杰,孙天骏,陶然[1]（2009）在《胶原-壳聚糖-微孔真皮基质复合膜与成纤维样细胞体外构建活性真皮替代物》一文中研究指出目的:将体外分离培养、扩增的人脐带间充质干细胞诱导为成纤维细胞,将其接种于胶原-壳聚糖-微孔真皮复合膜上,探讨一种理想的活性真皮替代物构建的可行性。方法:复苏本实验室冻存的第3代脐带间充质干细胞,采用真皮成纤维细胞诱导液诱导分化脐带间充质干细胞,并予以免疫荧光细胞化学染色鉴定。采用冷冻干燥法构建胶原-壳聚糖-微孔真皮复合膜,Co60消毒备用。将分化的成纤维样细胞按1x105/cm2密度种植在上述复合膜上,体外培养5天后收集样品,冰冻切片,DAPI染色,观察细胞的分布情况,于接种后1d,3d,5d,7d和14天分别进行CCK8检测细胞增殖情况。3d、5d、7d和14d收集细胞-支架复合物样品进行扫描电镜观察细胞在复合膜上的粘附和生长。用免疫荧光化学染色观察CollagenⅠ,CollagenⅢ的沉积。收集1d 7d 14d和21d的培养液,采用ELISA检测IL-6、IL-8分泌量。结果:脐带间充质干细胞可诱导分化为成纤维细胞,诱导后细胞强阳性表达Ⅰ型胶原、Ⅲ型胶原及成纤维细胞特异性蛋白。诱导分化的成纤维细胞在胶原-壳聚糖-微孔真皮复合膜上粘附良好,分布均匀,细胞增殖与单层培养体系相似。培养7d有明显的CollagenⅠ、CollagenⅢ的沉积。构建的真皮替代物培养7d,14d时IL-6、IL-8分泌量明显增高,7d达峰值。结论:胶原-壳聚糖-微孔真皮复合膜与成纤维样细胞体外构建活性真皮替代物是可行的,为下一步构建组织工程全层皮肤建立了坚实研究基础。(本文来源于《中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编》期刊2009-11-01）
张向荣,刘德伍,郭光华,彭燕,林尊文[2]（2008）在《血管内皮生长因子165基因修饰人骨髓间充质干细胞复合兔脱细胞真皮基质构建活性组织工程皮肤》一文中研究指出背景:利用组织工程原理构建的人工皮肤替代物用于皮肤移植可有效解决供皮不足这一难题,但组织工程皮肤很大程度上受制于移植物血管网缺乏造成的细胞供养障碍而导致失效。目的:以血管内皮生长因子165基因修饰的人骨髓间充质干细胞复合兔脱细胞真皮基质,拟构建活性组织工程皮肤。设计、时间和地点:以基因工程为基础的组织构建实验,于2008-03/06在南昌大学第一附属医院烧伤研究所完成。材料:普通级新西兰大白兔5只用于提取脱细胞真皮基质原料,由南昌大学医学院动物科学部提供,人骨髓间充质干细胞取自临床骨髓穿刺检查正常的患者,pShuttle-CMV/VEGF165质粒转化大肠杆菌菌种由武汉协和医院郜勇博士惠赠。方法:无菌条件下切取兔耳全层皮肤,将2cm×2cm皮片置于0.25%胰酶-EDTA消化液中去掉表皮,再置入曲拉通X-100溶液使真皮细胞完全脱净,磷酸盐缓冲液反复清洗,即为脱细胞真皮基质,4℃保存备用。采用密度梯度离心与贴壁筛选法体外分离培养人骨髓间充质干细胞,取传至第3代细胞,按5×105/孔密度接种,待细胞达80%融合时进行脂质体介导的pShuttle-CMV/VEGF165质粒转染,接种于制备好的脱细胞真皮基质上体外联合培养。主要观察指标:骨髓间充质干细胞与脱细胞真皮基质的形态观察,组织工程皮肤结构观察。结果:体外培养的骨髓间充质干细胞大部分呈梭形,基因转染后细胞形态及活性无明显影响;脱细胞真皮基质呈瓷白色,柔韧有弹性。血管内皮生长因子165基因修饰的骨髓间充质干细胞与脱细胞真皮基质共培养2d后,所构建的组织工程皮肤呈淡红色,质软,接种细胞生长状态正常,苏木精-伊红染色及扫描电镜观察可见在脱细胞真皮基质的间隙中有大量长梭形细胞附着生长。结论:血管内皮生长因子165基因转染的人骨髓间充质干细胞在兔脱细胞真皮基质中生长良好,可在体外联合构建活性组织工程皮肤。(本文来源于《中国组织工程研究与临床康复》期刊2008年43期）
活性复合真皮基质论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景:利用组织工程原理构建的人工皮肤替代物用于皮肤移植可有效解决供皮不足这一难题,但组织工程皮肤很大程度上受制于移植物血管网缺乏造成的细胞供养障碍而导致失效。目的:以血管内皮生长因子165基因修饰的人骨髓间充质干细胞复合兔脱细胞真皮基质,拟构建活性组织工程皮肤。设计、时间和地点:以基因工程为基础的组织构建实验,于2008-03/06在南昌大学第一附属医院烧伤研究所完成。材料:普通级新西兰大白兔5只用于提取脱细胞真皮基质原料,由南昌大学医学院动物科学部提供,人骨髓间充质干细胞取自临床骨髓穿刺检查正常的患者,pShuttle-CMV/VEGF165质粒转化大肠杆菌菌种由武汉协和医院郜勇博士惠赠。方法:无菌条件下切取兔耳全层皮肤,将2cm×2cm皮片置于0.25%胰酶-EDTA消化液中去掉表皮,再置入曲拉通X-100溶液使真皮细胞完全脱净,磷酸盐缓冲液反复清洗,即为脱细胞真皮基质,4℃保存备用。采用密度梯度离心与贴壁筛选法体外分离培养人骨髓间充质干细胞,取传至第3代细胞,按5×105/孔密度接种,待细胞达80%融合时进行脂质体介导的pShuttle-CMV/VEGF165质粒转染,接种于制备好的脱细胞真皮基质上体外联合培养。主要观察指标:骨髓间充质干细胞与脱细胞真皮基质的形态观察,组织工程皮肤结构观察。结果:体外培养的骨髓间充质干细胞大部分呈梭形,基因转染后细胞形态及活性无明显影响;脱细胞真皮基质呈瓷白色,柔韧有弹性。血管内皮生长因子165基因修饰的骨髓间充质干细胞与脱细胞真皮基质共培养2d后,所构建的组织工程皮肤呈淡红色,质软,接种细胞生长状态正常,苏木精-伊红染色及扫描电镜观察可见在脱细胞真皮基质的间隙中有大量长梭形细胞附着生长。结论:血管内皮生长因子165基因转染的人骨髓间充质干细胞在兔脱细胞真皮基质中生长良好,可在体外联合构建活性组织工程皮肤。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
活性复合真皮基质论文参考文献
[1].韩焱福,柴家科,李东杰,孙天骏,陶然.胶原-壳聚糖-微孔真皮基质复合膜与成纤维样细胞体外构建活性真皮替代物[C].中华医学会烧伤外科学分会2009年学术年会论文汇编.2009
[2].张向荣,刘德伍,郭光华,彭燕,林尊文.血管内皮生长因子165基因修饰人骨髓间充质干细胞复合兔脱细胞真皮基质构建活性组织工程皮肤[J].中国组织工程研究与临床康复.2008