奶牛源乳酸菌的分离、鉴定及其微生态制剂的研究

奶牛源乳酸菌的分离、鉴定及其微生态制剂的研究

论文摘要

为筛选出能用于防治奶牛子宫内膜炎的益生性乳酸菌菌株并以其为原材料制作微生态制剂,采集产后30~50 d健康奶牛的子宫颈口处分泌物,利用MRS选择性培养基厌氧培养方式进行乳酸菌初步筛选。纯化得到的单株菌株进行染色和镜检,将典型的乳酸菌进行生化鉴定。提取其DNA,扩增16S rDNA全序列并测序,将所得序列与NCBI核酸数据库进行同源性比对,明确各分离菌株种属归属。将鉴定得到的单株乳酸菌过滤以及离心获取上清,得到的上清进行抑菌实验。采用琼脂扩散法检测对大肠埃希菌的抑菌活性。以得到的良好抑菌能力的菌株为原材料进行混合抑菌,进行微生态制剂最优比例的探究,并研究这些菌株的生长曲线和产酸能力。结果显示,经染色镜检、生化鉴定和16S rDNA测序分析和单株抑菌实验得到6株较好的抑菌能力的乳酸菌,其中鼠李糖乳杆菌、魏斯式细菌和粪肠球菌的混合上清抑菌效果最好,具有较强的生长和产酸能力。研究得到了可用于防治奶牛子宫内膜炎益生菌株,可进一步用于临床试验探究。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料
  •     1.1.1 菌源样品
  •     1.1.2 培养基与试剂
  •     1.1.3 仪器与设备
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 样品采集与增菌培养试验
  •     1.2.2 分离和纯化
  •     1.2.3 革兰染色和镜检
  •     1.2.4 触酶试验
  •     1.2.5 生化鉴定
  •     1.2.6 乳酸菌DNA的提取
  •     1.2.7 乳酸菌16S rDNA扩增
  •     1.2.8 16S rDNA序列测定及分析
  •     1.2.9 单株细菌上清抑菌试验
  •     1.2.10 混合上清抑菌试验
  •     1.2.11 生长曲线
  •     1.2.12 产酸能力曲线
  • 2 结果与分析
  •   2.1 分离乳酸菌菌株革兰染色镜检
  •   2.2 菌株生化鉴定
  •   2.3 16S rDNA基因扩增
  •   2.4 测序比对
  •   2.5 单株细菌抑菌试验
  •   2.6 混合菌株抑菌试验
  •   2.7 生长曲线测定
  •   2.8 产酸能力试验
  • 3 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 桑梦琪,喻琴,邵丹,董书伟,王东升,张世栋,武小虎,严作廷

    关键词: 乳酸菌,微生态制剂,奶牛子宫炎,抑菌

    来源: 微生物学杂志 2019年01期

    年度: 2019

    分类: 基础科学,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所甘肃省中兽药工程技术研究中心,甘肃农业大学动物医学院

    基金: 国家重点研发计划资助项目(2017YFD0502200)

    分类号: S852.6

    页码: 44-51

    总页数: 8

    文件大小: 1100K

    下载量: 342

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