DHRS2蛋白对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响

论文摘要

目的研究DHRS2蛋白对肠癌耐药细胞敏感性影响及其机制。方法利用串联质谱标签法（TMT）对结直肠癌耐药细胞系HCT116/OXA与其亲本进行差异蛋白筛选;CCK-8法检测结直肠癌耐药细胞株HCT116/OXA对奥沙利铂敏感性及沉默DHRS2蛋白对其耐药性影响;蛋白质印迹法验证差异表达蛋白以及检测沉默DHRS2蛋白后对相关信号通路蛋白调节作用。结果耐药细胞株HCT116/OXA中DHRS2蛋白水平明显高于亲本细胞株（P<0.001）;沉默DHRS2蛋白可增加HCT116/OXA对奥沙利铂的敏感性;同时下调P53蛋白和切除修复交叉互补基1（ERCC1）蛋白的表达。此外,干扰P53蛋白后,ERCC1蛋白表达也明显减少。结论沉默DHRS2蛋白可部分恢复结直肠癌耐药细胞株HCT116/OXA对化疗药物敏感性,其机制可能为通过下调P53蛋白进而抑制ERCC1蛋白表达引起。

论文目录

1 材料与方法

1.1 主要材料

1.2 方法

1.2.1 细胞培养

1.2.2 CCK-8法检测细胞存活率

1.2.3 细胞转染

1.2.4 蛋白提取和蛋白质印迹检测

1.2.5 TMT定量蛋白组学

1.2.5.1 TMT标记及HPLC分级

1.2.5.2 质谱分析

1.2.5.3 生物信息学分析

1.3 统计学处理

2 结果

2.1 HCT116/OXA耐药细胞模型验证

2.2蛋白质谱结果表明DHRS2在HCT116/OXA显著升高

2.3 Western blot验证DHRS2蛋白上调

2.4干扰DHRS2表达后HCT116/OXA细胞对奥沙利铂耐药性下降

2.5沉默DHRS2增加HCT116/OXA奥沙利铂治疗敏感性的机制

3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 李济民,杨芳,袁伟奇,王昊,罗以勤

关键词: 结直肠癌,化疗耐药,蛋白,奥沙利铂

来源: 安徽医科大学学报 2019年12期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 肿瘤学

单位: 安徽医科大学附属安徽省立医院检验科

基金: 安徽省自然科学基金(编号:1608085MH229,1608085QH217)

分类号: R735.34

DOI: 10.19405/j.cnki.issn1000-1492.2019.12.012

页码: 1899-1903

总页数: 5

文件大小: 1332K

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DHRS2蛋白对结直肠癌细胞化疗敏感性的影响

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