论文摘要
目的:构建带有荧光素酶基因的乙型脑炎（简称乙脑）病毒感染性克隆,并通过体外拯救获得恢复病毒,用于乙脑病毒致病机理研究、病毒感染在小鼠体内的动态分布以及乙脑疫苗免疫效果评价的高通量方法建立。方法:应用反向遗传学、融合PCR以及无缝拼接等体外重组技术,将荧光素酶报告基因（F-LUC）插入到乙脑病毒SA14-14-2全长感染性克隆的5’非编码区与C蛋白编码区之间,线性化后体外转录为RNA并转染BHK21细胞,在细胞感染和动物试验分别检测恢复病毒的拯救和F-LUC的表达情况。结果:成功构建了带有F-LUC报告基因的SA14-14-2乙脑病毒全长感染性克隆,并拯救获得了重组病毒。基因序列分析及细胞与动物水平均证明拯救的病毒可较高水平表达荧光素酶基因。结论:本研究构建出带有荧光素酶报告基因F-LUC的SA14-14-2感染性克隆,并拯救获得带有荧光素酶的重组乙脑病毒,为乙脑血清中和抗体的高通量筛选、病毒感染在小鼠体内的动态分布和致病机理研究奠定了基础。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 赵丹华,李玉华
关键词: 荧光素酶,乙脑病毒感染性克隆,重组乙脑病毒
来源: 中国药事 2019年11期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技,基础科学
专业: 生物学,基础医学
单位: 中国食品药品检定研究院
分类号: R373.31
DOI: 10.16153/j.1002-7777.2019.11.009
页码: 1264-1269
总页数: 6
文件大小: 1067K
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标签：荧光素酶论文; 乙脑病毒感染性克隆论文; 重组乙脑病毒论文;