董建勋[1]2004年在《通脉宁防治经皮腔内血管成形术后再狭窄细胞分子机制的研究》文中认为肢体动脉硬化性闭塞症 (ASO) 是因动脉粥样硬化 (AS) 导致肢体缺血甚至坏疽的严重疾病, 属于周围血管疾病中难治性疾病. 经皮腔内血管成形术 (PTA) 是治疗ASO的有效疗法之一. 然而, 在PTA后六个月内约有30~50%的病人发生再狭窄( RS)极大地影响了该疗法的效果, 成为阻碍PTA推广运用的障碍. 因此 ,防治PTA后RS是提高PTA远期疗效的关键,也是国内外血管病研究者极为关注的课题之一. 通脉宁胶囊是陈淑长教授临床用于治疗ASO 及防治PTA 后RS 的有效方剂 ,具有益气活血, 通脉止痛的功效. 前期临床及动物实验显示其具有抗PTA后RS的作用 .研究表明RS的形成是一个十分复杂的病理过程, 涉及到多个环节和众多因素, 其中血管平滑肌细胞( VSMC)增殖是其主要关键病理环节之一 .本研究以VSMC为靶细胞 ,应用血清药理学研究的方法, 观察通脉宁全方及益气拆方, 活血拆方对血管紧张素II(AngII), 溶血磷脂酰胆碱 (LPC) 诱导VSMC 增殖及相关因素的影响 ,以阐明通脉宁防治PTA 后RS 的细胞分子机制. 应用通脉宁全方及拆方提取液 ,分别连续灌胃日本大耳白兔3 d后取血, 制备相应的药物血清. 采用组织贴块法分离培养乳兔主动脉 VSMC. 经免疫组织化学染色鉴定,α-actin呈阳性. 随机将生长良好的第4~5代VSMC细胞分别以AngII, LPC为诱导因素分为空白组,AngII 组, LPC 组, 通脉宁全方组, 益气拆方组 ,活血拆方组进行以下实验研究. 1. 运用 MTT 比色法整体观察对 VSMC 增殖活性的影响; 2. 通过免疫组织化学染色法 (DAB 显色), 观察细胞胞浆α-肌动蛋白表达变化规律; 3 应用流式细胞仪定量检测细胞周期的改变; 4. 通过生物化学方法测定细胞培养上清液中总SOD 活力及MDA 含量的变化; 5. 采用硝酸还原酶法, 观察对细胞培养上清液NO 含量以及NOS 酶活力的调节; 6. 采用 Fluo-3 染色荧光探针标记检测细胞内钙离子荧光强度的变化; 7. 通过免疫组织化学染色法 (DAB 显色), 检测细胞胞浆PDGF-BB蛋白表达变化; 8. 采用 RT-PCR 法半定量检测 VSMC 的调控基因c-fos 和 c-myc 表达的改变规律. 实验结果显示, AngII, LPC 通过增加体外培养VSMC 增殖活性( OD 值 ),降低α- actin表达, 提升细胞S期, G2/M期百分比 ,降低G0/G1期百分比, 改变细胞培养上清液中NO, MDA含量, 减弱NOS ,SOD 活力, 升高细胞内Ca2+浓度, 增加胞浆PDGF-BB 表达 ,上调VSMC 的调控基因c-fos和c-myc表达 ,发挥促进VSMC增殖的作用. 通脉宁通过降低OD值 ,增加α-actin表达 ,减少细胞S期, G2/M期百分比, 增加G0/G1期百分比, 增强NOS, SOD活力及NO含量,减少MDA 生成 ,降低细胞内Ca2+浓度 ,减弱PDGF-BB 表达, 下调c-fos 和c-myc 表达, 发挥拮抗 AngII, LPC 诱导作用 ,抑制 VSMC 增殖的综合效应( P<0.01),虽然益气拆方及活血拆方组也可在一些环节显现抑制VSMC的作用, 但经过综合分析比较, 其作用不及通脉宁全方. 研究结果表明 ,通脉宁通过对细胞信息传递中的最终靶分子c-fos, c-myc等核内基因表达的影响 ,调控细胞表型转化, 阻断作为第二信使的 NO ,Ca2+, 自由基等的细胞信号转导途径 ,干预RS形成过程中发挥重要介导作用的PDGF-BB表达等环节的协同作用, 达到抑制
刘彬[2]2005年在《益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的干预》文中研究表明冠心病已成为严重威胁中老年人生命健康的常见病和多发病。经过20多年临床发展实践和经验积累,经皮腔内冠状动脉成形术(percutaneous stransluminal coronary angioplasty,PTCA)因操作简便,成功率高,并发症少,已成为越来越多冠心病患者广泛的治疗选择。但是PTCA后3-6个月再狭窄(restenosis,RS)发生率高达32%-57%,这严重阻碍了其在临床上的应用和发展。现代研究表明PTCA后RS是一个多环节,连续的组织反应过程。20多年来,为了预防和治疗PTCA后RS,人们对其进行了全方位,多层次的基础和临床研究,但总体效果仍不尽人意。关于再狭窄的基本病理变化,中医认为本病属于“血瘀症”范畴,基本病机是本虚标实。本虚是以脏气亏虚为主,兼以阴虚、阳虚;标实以血瘀多见,挟以痰浊、气滞、寒凝,故治宜益气活血为主。祖国医学丰富的辨证论治体系和整体调节作用以及中药复方中化学成分的多样性和生物活性的广泛性为阻断RS病理生理特点的各个方面提供了理论上的可行性。 目的: 在中医气血理论指导下,从RS发病机制的各个环节筛选有效方药,选择具有益气行气,活血化瘀的叁味药叁七、黄芪、川芎组成复方制剂,采用计量组织学方法,结合病理形态学分析,以期进一步了解RS的发生机制,并观察益气活血方对球囊损伤大鼠颈动脉狭窄的干预作用,初步探讨其作用机理,为扩大该类中药的临床应用和研发新制剂提供科学依据,从而为解决PTCA后再狭窄开辟一条新途径。 方法: SD大鼠48只,随机分成4组,每组2个时相点(5d和28d),每个时相点6只动物。A组为假手术组,12只;B组为模型组,12只;C组为益气活血汤小剂量组,12只;D组为益气活血汤大剂量组,12只。大鼠颈动脉球囊损伤模型制作参见文献[3]。益气活血汤大小剂量组白手术前一天按0.8ml/100g/d方案灌胃给药,同等条件下,正常对照组和模型组按相同方案灌服生理盐水。每组动物于相应时相点麻醉(3%戊巴比妥钠30mg/kg)放血处死后,取损伤颈总动脉,常规固定、包埋、切片,分别做HE染色、TR-A02弹力纤维染色和Masson叁色染色。然后输入HMIAS-2000型全自动彩色图象分析系统测定40倍物镜视野下血管新生内膜平均厚度、中膜厚度、内膜增生面积/中膜面积、内外弹力板周长、残余管腔面积/总管腔面积以及400倍物镜视野下单位面积胶原百分比(每个数据取同一标本不同视野下3个测量值的平均值),系统分析动脉球囊损伤后相关指标的变化及中药对其的影响。 结果: 本实验成功的复制了球囊损伤术后血管狭窄动物模型,造模方法值得推广。球囊损伤大鼠颈总动脉后,光镜下,5天模型组内膜可见内皮细胞脱落,少量VSMC增殖,随着时间的延长,动脉内膜逐渐增厚,28天模型组内膜增生厚度较5天模型组明显增加,损伤后5天各组中膜厚度无明显变化,但28天模型组中膜厚度与中药各组比较差异有显着性(P<0.05)。形态学分析结果表明,益气活血方各组大鼠术后28天内膜增生面积、内膜增生平均厚度、残余管腔面积/总管腔面积与模型组相比差别有极其显着的意义(P<0.01);益气活血方各组大鼠术后28天胶原增生情况与模型组相比差异有显着性(P<0.05)。而且从量效关系上看,大剂量益气活血方作用更明显。 结论:益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉狭窄的干预 球囊损伤大鼠颈总动脉是一个复杂的损伤修复反应过程,内膜增厚、vSMC迁移增殖、胶原增生以及血管重构共同参与了血管狭窄的形成。实验研究显示益气活血方可显着防止或减轻球囊扩张大鼠颈总动脉所致的管腔狭窄.提示益气活血方可能是通过保护血管内皮、抑制vSMC过度迁移增殖、抑制胶原增生和血管重构来干预球囊扩张所致的管腔狭窄.并且从本实验来看,通过组间比较评价其疗效,益气活血方大剂量组明显优于益气活血方小剂量组.主题词经皮腔内冠状动脉成形术益气活血再狭窄/中医药疗法
江毅[3]2008年在《益气活血方及其拆方对人血管平滑肌细胞增殖的影响》文中认为背景自经皮腔内冠状动脉成形术(Percutaneous Transluminal Coronary Angioplasty,PTCA)创立以来,经皮冠状动脉介入治疗(Percutaneous Coronary Intervention,PCI)在冠心病治疗中已具有越来越重要地位。但介入治疗术后部分患者出现的原先扩张的冠状动脉再次狭窄给患者带来巨大经济和心理负担。PTCA术后再狭窄的形成机理主要包括血管弹性回缩、损伤部位血栓形成、新生内膜过度增生及负性血管重构等。血管内膜增生的主要机制为血管平滑肌细胞(vascular smooth musclecell,VSMC)过度增生,而介入治疗后引起的生长因子和细胞因子的分泌是介导VSMC增殖的主要原因,因此,如何抑制VSMC增殖成为近年来心血管内科领域研究的热点。近年来,研究人员对药物涂层支架进行了大量研究,以期减少PTCA术后冠状动脉血管内再狭窄的发生。并且研究人员在近年的研究中也在不断地探索设计新的支架,减低再狭窄发生的可能性。药物涂层支架置入术等新技术的广泛应用逐渐显示出解决其难题的良好前景,但仍然不能完全解决所有支架内再狭窄。此外,费用昂贵、远期疗效、安全性等诸多问题,还有待大规模临床试验证实。近年临床及实验研究发现,中药对VSMC增殖的抑制效果较好,故价格较低廉且应用安全的中药极具研究价值。对于冠心病PCI术后RS诊断,公认仍然属中医“胸痹心痛病”范畴。目的在中医理论为指导下,我们认为再狭窄患者具有“胸痹心痛病史”及“导管外源机械挫伤”耗气伤血的双重特点,起病及病理演变“气虚血瘀”贯穿始终,从而推论“益气活血”治则应在防治再狭窄形成中占有重要地位。针对中医、西医对再狭窄发病机制各自认识特点,我们优化筛选出叁味文献报道最多的,具有抑制VSMC增殖、抑制动脉内皮脱落后血管内膜增生、增加冠状动脉血流等多种防治心血管疾病药效作用的“益气活血”中药,组成小复方制剂——益气活血方,观察该方及其拆方(益气方、活血方)对人血管平滑肌细胞体外培养增殖作用,以期探索益气活血方对人VSMC的作用。方法选用人血管平滑肌细胞(hVSMC),运用血清药理学方法进行细胞培养,以MTT法检测细胞生长状况,以流式细胞仪确定细胞周期分布,观察益气活血方及其拆方的含药血清对人血管平滑肌细胞增殖的影响以及对细胞周期分布的影响。所得数据以单因素方差分析以及t检验进行统计学分析。结果(1)MTT结果显示,黄芪组、活血组、益气活血组的吸光度明显低于空白对照组,差异均有极显着性(P＜0.01);而在黄芪组、活血组、益气活血组叁组组间比较中,又以活血组的吸光度最低,与其他两组比较,差异亦极显着(P＜0.01)。(2)流式细胞仪检测结果表明,与空白对照组相比,黄芪组、活血组、益气活血组G_0/G_1期细胞所占比例显着升高(P＜0.01),G_2/M期细胞仅益气活血组升高较明显(P＜0.05),而合成增殖的S期细胞明显减少。药物组之间的比较结果显示,活血组G_0/G_1期细胞所占比例最高,S期细胞比例最小,与黄芪组和益气活血组相比,差异有极显着性(P＜0.01)。结论益气活血方及其拆方(益气方、活血方)的含药血清均可抑制hVSMC的增殖,且明显抑制细胞DNA合成,使VSMC生长停滞于G_0/G_1期。且药物组间的比较提示:活血方对VSMC增殖的抑制作用最强。
王淑敏[4]2011年在《益气养阴活血化瘀方治疗PCI术后再狭窄的临床观察》文中研究表明目的:在研究和整理古今中医文献的基础上,自拟益气养阴活血化瘀方防治冠脉介入术后再狭窄的气阴两虚兼血瘀证的患者,观察其药物疗效和安全性。初步探讨中医药在防治冠脉介入术后再狭窄的作用机制,为中医药防治再狭窄提供一种思路和方法。方法:按照随机对照的方法进行临床观察。根据西医诊断标准和中医诊断及中医辩证分型标准,筛选2008年9月至2010年12月辽宁中医药大学附属医院心内科住院和门诊患者105例,随机分为对照组和治疗组;对照组给予常规西药治疗(肠溶阿司匹林、氯吡格雷、酒石酸美托洛尔、低分子肝素、他汀类降脂药及单硝酸异山梨酯);治疗组在对照组基础上加服益气养阴活血化瘀方,疗程6个月;6个月后通过临床症状和冠脉造影结果判定再狭窄的发生;计算再狭窄率,利用卡方检验,进行两个率的比较,以P<0.05为有统计学意义;通过检测血、尿、便常规和肝肾功能评定益气养阴活血化瘀方的安全性。结果:益气养阴活血化瘀方可有效防治冠脉介入术后再狭窄,能有效降低再狭窄率,(P<0.05);治疗后两组胸闷痛、心悸、气短、乏力等症状有所缓解,治疗组上述症状缓解更明显些,但无统计学意义(P>0.05),治疗前后两组患者的血、尿﹑便常规及肝﹑肾功能皆未发现异常,治疗过程中无明显不良反应发生。结论:益气养阴活血化瘀方能有效防治冠脉介入术后再狭窄,降低再狭窄率,而且安全性很高。
参考文献：
[1]. 通脉宁防治经皮腔内血管成形术后再狭窄细胞分子机制的研究[D]. 董建勋. 北京中医药大学. 2004
[2]. 益气活血方对球囊损伤大鼠颈总动脉后狭窄的干预[D]. 刘彬. 湖北中医学院. 2005
[3]. 益气活血方及其拆方对人血管平滑肌细胞增殖的影响[D]. 江毅. 湖北中医学院. 2008
[4]. 益气养阴活血化瘀方治疗PCI术后再狭窄的临床观察[D]. 王淑敏. 辽宁中医药大学. 2011