杀虫因子论文_田甜

导读:本文包含了杀虫因子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:线虫,杆菌,杀虫,因子,疏水,毒素,紫外线。

杀虫因子论文文献综述

田甜[1](2018)在《丁香假单胞菌杀线虫毒性因子PtxA的杀虫活性与作用机制》一文中研究指出植物寄生线虫(Plant Parasitic Nematodes)是一种高度专化型的杂食性植物病原线虫,主要寄生在植物根部,几乎可以感染所有的作物并造成作物减产,据统计可造成全世界每年1500多亿美元的经济损失。在长期的防控植物寄生线虫的实践中,人们逐渐认识到生物防治有着其它防治措施难以比拟的优势,而生防细菌在防控植物寄生线虫实践中发挥着独特作用,因此基于生防细菌的生物防治技术的研究开发受到世界各国普遍重视。丁香假单胞菌(Pseudomonas syringae)MB03是本实验室从感病植物组织中分离到的一株病原细菌,前期工作已证实该菌对模式线虫秀丽隐杆线虫(Caenorhabditis elegans)和主要的作物虫害线虫南方根结线虫(Meloidogyne incognita)均呈现杀虫活性。本研究通过序列比对确定了一种新型溶血素RTX家族的毒性因子PtxA,对该蛋白的杀虫活性、抑制线虫生长、运动、产卵和取食偏好等的性能和在线虫体内的作用部位进行了观测;对该蛋白的作用结构域进行了分析;然后对其在线虫体内的可能受体进行了初步筛选。所获得的主要研究结果如下:基于MB03菌株的基因组序列构建了该菌毒性蛋白与毒性因子的预测数据库。数据库显示MB03中共有200多个潜在的具有直接或辅助杀虫的酶类或毒性蛋白,主要种类包括有Rhs家族、几丁质酶类、胶原蛋白酶类及溶血素类蛋白等。通过VirulentPred网站进行辅助序列分析从数据库中确定一种新型溶血素RTX家族的毒性因子PtxA作为研究对象。将PtxA基因克隆到大肠杆菌(Escherichia coli)表达载体pET-28a上,并表达和纯化获得PtxA纯蛋白。纯化PtxA蛋白对秀丽隐杆线虫显示具有较强的毒性,测得LC_(50)值为65.955(41.032~125.246)μg/mL,线性回归方程(相关系数)为Y_1=-4.493+2.47X_1;对南方根结线虫的生测LC_(50)为139.825(30.139~264.375)μg/mL,线性回归方程(相关系数)为:Y_2=-6.259+2.917X_2,也呈现很强的毒性作用。对秀丽隐杆线虫L1期虫体生长抑制实验表明,PtxA蛋白具有很强的抑制生长作用,在315μg/mL作用浓度下,实验组线虫体长仅达到对照组线虫的50%。此外,PtxA蛋白能够抑制线虫产卵数,相同浓度下实验组线虫产卵数远低于对照组,在252μg/mL作用浓度下,实验组线虫平均产卵数仅为对照组的30%。取食偏好性实验表明相对重组菌来说线虫更偏向于取食含有空载的大肠杆菌。通过用绿色荧光标记秀丽隐杆线虫基因工程缺陷虫株FT63肠道和用FT63作为试虫,经PtxA作用3 d后,观察到实验组线虫竹节状荧光结构遭到部分破坏,而对照组则很完整,说明PtxA蛋白可对线虫肠道造成物理伤害。利用pDS3.0系统将ptxA基因敲除,比较PG平板上△PtxA和野生菌株MB03对秀丽隐杆线虫的毒性,结果展示了二者毒性有一定的差异,△PtxA菌株平板上线虫死亡率要小于野生菌株MB03。为验证PtxA蛋白两个预测结构域的功能,将各自编码基因片段分别克隆到表达载体上,构建大肠杆菌重组菌MB772和MB773,经表达后得到纯化蛋白DUF和M10_C。利用秀丽隐杆线虫做试虫进行液体杀虫试验,结果显示两个截断的功能结构域片段均对线虫有一定的毒性,其中DUF蛋白的毒性强于M10_C,但是两个截断结构域的蛋白毒性弱于全长结构域的蛋白毒性,反映出PtxA蛋白的毒性要靠两者协作才能完全发挥。将PtxA作为诱饵蛋白,通过酵母双杂交实验从秀丽隐杆线虫体内获取了20多个疑似受体蛋白,从中选取了rps9、rps25、daf-21和col-77等四个受体蛋白基因设计引物,以不同处理时间的线虫总RNA为模板,调查PtxA作用后不同时间线虫基因的表达量变化情况。结果显示相对于对照组来说,PtxA作用线虫12 h和24 h后,这4个基因表达量基本上都发生了下调,反映出PtxA蛋白影响了这些线虫基因的表达。(本文来源于《华中农业大学》期刊2018-06-01)

刘晓艳,闵勇,黄大野,方伟,王开梅[2](2017)在《苏云金芽胞杆菌杀线虫活性因子分析及杀虫机制研究进展》一文中研究指出苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt),是一种重要的昆虫病原细菌,对多种农业害虫包括鳞翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目和线虫等具有高特异杀虫活性,是迄今应用最广泛的微生物杀虫剂。本文总结了杀线虫Bt菌株的活性因子种类以及不同类的活性物质杀线虫机制的分析,能够为生物杀线剂的研究与创制提供理论基础。(本文来源于《中国生物防治学报》期刊2017年05期)

谷祖敏,陈思,韩金栋,李修伟,周飞[3](2014)在《环境胁迫因子对杀虫真菌蜡蚧轮枝菌VL18的影响》一文中研究指出采用孢子萌发法和菌丝生长速率法考察高温、紫外线、农用化学品和盐胁迫因子对杀虫真菌蜡蚧轮枝菌VL18的影响。结果表明:高温胁迫对蜡蚧轮枝菌的孢子萌发有不同程度的抑制作用,32℃对孢子萌发几乎无影响,48℃胁迫60 min,抑制率达86.6%。紫外线照射抑制了孢子萌发,波长为254nm的紫外线抑制作用强于365nm。供试的农用化学品中,杀菌剂对菌丝生长的抑制作用最强,其次是杀虫剂,叶面肥几乎无作用。盐胁迫对VL18菌丝生长和孢子萌发均有抑制作用,且对孢子萌发的抑制作用大于菌丝生长,在NaCl浓度为0.25mol·L-1时菌丝生长抑制率和孢子萌发抑制率分别为35.09%和59.82%。(本文来源于《沈阳农业大学学报》期刊2014年01期)

张奎花,钱秀娟,刘长仲[4](2013)在《影响昆虫病原线虫共生菌发酵液杀虫活性相关因子研究》一文中研究指出应用生物测定法,研究了甘肃省3种土着昆虫病原线虫的4个优良品系共生菌的杀虫活性,及日光和紫外照射、温度对杀虫活性的影响。结果表明,不同线虫及品系共生菌对大蜡螟的胃毒活性存在显着差异,异小杆线虫共生菌HMP0627对大蜡螟的胃毒活性最高,校正死亡率和体重抑制率分别为22.20%和36.02%,斯氏线虫共生菌SAX0664对大蜡螟也有较高的致死作用。4个线虫品系共生菌对日光和紫外光照射都有较强的适应性,1.999mmol/(m2·s)日光下照射1h和18W紫外灯照射30min仍具有胃毒毒力。不同共生菌对温度的适应性存在显着差异,随着温度的升高,共生菌的胃毒毒力显着下降。到50℃时,异小杆线虫共生菌HMP0627仍有较高的致死率和体重抑制率,斯氏线虫共生菌SKX0657仍有较高的体重抑制率。(本文来源于《植物保护》期刊2013年05期)

黄威,商艳芳,高强,王成树[5](2012)在《金龟子绿僵菌转录因子Mast12调控真菌穿透能力及杀虫毒力》一文中研究指出金龟子绿僵菌作为一种生物杀虫剂,广泛应用于不同害虫的生物防治。杀虫真菌对于寄主昆虫的侵染过程包括:识别寄主,形成附着胞,穿透体壁,定殖寄主体内及致死,突破体壁再形成孢子。我们在金龟子绿僵菌中克隆到一个与酵母转录因子ste12同源的转录因子,命名为Mast12,基因缺失突变体△Mast12失去杀虫能力。通过注射和浸泡两种方式进行家蚕毒力检测,我们发现突变体浸泡时杀虫能力基本丧失,而注射时的杀虫毒力不受影响。我们将注射杀死的家蚕进行石蜡切片,我们发现突变体在昆虫体内生长正常然而失去穿透体壁的能力。进一步研究,我们发现突变体失去在塑料片上形成附着胞的能力同时却能在蝗虫翅膀上形成附着胞,这说明突变体失去识别疏水表面的能力,但对于昆虫体表的蜡质识别没有影响;通过高浓度KCl和山梨醇处理,发现突变株对于高渗条件反应有明显缺陷,这可能暗示突变体附着胞穿透方面有缺陷;通过检测蛋白降解实验我们发现,突变体降解蛋白质能力下降,这也说明突变体降解昆虫体壁角质蛋白能力下降。通过检测附着胞阶段突变体的基因表达情况,我们发现关于体壁穿透相关基因Mas1和蛋白酶基因等表达下调,证明Mast12参与调控昆虫体表降解及穿透相关的基因表达。(本文来源于《2012年中国菌物学会学术年会会议摘要》期刊2012-08-10)

张丽丽,梁革梅,曹广春,高希武,郭予元[6](2010)在《增强Bt Cry毒素杀虫作用的重要途径:增效因子的利用及晶体蛋白的遗传改良》一文中研究指出Bt Cry毒素广泛应用于害虫防治,但存在杀虫谱窄、活性低、靶标害虫易产生抗性等缺点。为了弥补这些不足,采取适当措施增强Cry毒素的杀虫作用十分必要。本文围绕Cry毒素的作用机理,论述了利用丝氨酸蛋白酶抑制剂、几丁质酶、增效蛋白、钙粘蛋白片段和Cyt毒素等增效因子提高Cry毒素的杀虫活性,延缓昆虫抗性的研究进展;探讨了利用基因定点突变、蛋白融合和杂交以及晶体蛋白末端小片段的去除等分子技术手段对毒素蛋白进行遗传改良,改善Cry毒素的杀虫性能,扩大其杀虫范围。(本文来源于《环境昆虫学报》期刊2010年04期)

管楚雄,曾杨,林志雄,匡石滋,孙东磊[7](2010)在《环境因子对发光杆菌毒素杀虫活性的影响》一文中研究指出本文测定了温度、pH值、太阳光照射、日光灯照射和紫外灯照射对发光杆菌Photorhabdus luminescens外毒素致死小菜蛾Plutella xylostella3龄幼虫的影响。结果表明,pH7.0~8.0、温度20~30℃杀虫效果最好,而太阳光照射2h后,杀虫效果明显下降。紫外灯和日光灯照射对杀虫效果影响不显着。(本文来源于《中国生物防治》期刊2010年S1期)

刘姣[8](2010)在《苏云金芽胞杆菌Sigma35因子对杀虫晶体蛋白基因表达的影响》一文中研究指出苏云金芽胞杆菌(Bacillus thuringiensis)是一种能产生芽胞的土壤细菌,在稳定期形成芽胞和大量的伴胞晶体形式的杀虫晶体蛋白。这种高效的蛋白表达及杀虫机制吸引了很多研究者的兴趣,但是晶体蛋白形成的分子机制和作用方式依然不是很清楚。本文主要以苏云金芽胞杆菌库斯塔克亚种(subsp. kurstaki)标准菌株为材料,从苏云金芽胞杆菌芽胞期的特异转录因子σ35入手,试图找出σ35因子与晶体蛋白表达调控之间的关系,为阐明晶体蛋白形成机制的研究工作提供有力的证据。1.苏云金芽胞杆菌穿梭载体pHT1K-Plip-TS的构建。我们将枯草芽胞杆菌的非芽胞依赖的特异性的强启动子Hpall和cry1Ac基因的终止子都克隆到苏云金芽胞杆菌穿梭载体pHT1K载体上,构建了可以在细菌的营养期表达的穿梭载体pHT1K-Plip-TS。HpaⅡ特异启动子可以使基因在苏云金芽胞杆菌从营养期开始转录,而crylAc基因的终止子结构下mRNA比较稳定,所以可以实现基因在苏云金芽胞杆菌里在早期开始表达蛋白并积累。2.σ35基因过表达工程菌的构建。克隆了苏云金芽胞杆菌库克库斯塔克亚种kurstaki (HD-1)的σ35基因到苏云金芽胞杆菌穿梭载体pHT1K-Plip-TS上,构建了σ35基因过量表达载体pHT1K-Plip-35TS,并且成功的转化到了含有cry1Aa, cry1Ab等晶体蛋白的野生型的苏云金芽胞杆菌kurstaki (HD-1)中,命名为35/kur。这样使得到芽胞期才开始表达的σ35基因可以不依赖芽胞就能在苏云金芽胞杆菌的营养生长期时开始转录表达,并在细胞中积累超过正常水平。3.蛋白质表达水平的检测。σ35基因过表达菌株(35/kur)的晶体蛋白的表达量比野生的菌株HD-1高出约2倍。同时通过RT-PCR检测到σ35基因在过表达菌株35/kur中从对数期就开始转录,而野生株HD-1在稳定期的末期才检测到转录。检测还发现杀虫晶体蛋白Cry1Aa的转录在过表达菌株中也提前了。通过SDS-PAGE检测发现在翻译水平上,过表达菌株Cry1Aa蛋白没有检测到提前表达,而是和野生株一样到稳定期才开始表达,也就是说晶体蛋白从转录到翻译还需要有其他一些基因的调控来完成,可能是在营养生长期σ35因子的过表达解除了共用启动子的基因对于它的竞争作用,但转录后水平上的调控没有同时被激活。(本文来源于《华中农业大学》期刊2010-06-01)

刘飞,夏立秋,丁学知,易勇,莫湘涛[9](2008)在《营养因子对苏云金芽胞杆菌4.0718产杀虫蛋白Cry1和Cry2的影响》一文中研究指出为了提高杀虫蛋白Cry1和Cry2产量,首先采用Plackett-Burman设计筛选出发酵培养基中影响苏云金芽胞杆菌4.0718表达毒蛋白Cry1的显着性因子为黄豆饼粉和MnSO4?H2O,Cry2的产量在该配方中无显着性影响因子。然后利用最速上升实验逼近Cry1最大产出区域,找到后续试验中心点。最后通过响应面优化得到黄豆饼粉和MnSO4?H2O的最佳浓度为11.5g/L和0.02g/L,使Cry1和Cry2产量分别达到0.32mg/mL和0.11mg/mL,比原优选配方产量提高了两倍多。该优化配方发酵液对棉铃虫的半致死浓度(LC50)为1.09μL/mL,杀虫活性比原优化配方显着提高。(本文来源于《微生物学通报》期刊2008年08期)

尹伦甫[10](2007)在《水产用抗寄生虫药研发新动态——植物精油杀虫活性因子的应用》一文中研究指出寄生虫病是渔业病害中一类常见、多发且控制难度较大的疾病,因此,杀虫药在防治鱼病方面起到举足轻重的作用,占据着水产药品约1/3的份额。以往使用化学类杀虫药防治鱼类寄生虫病效果不错,但随着使用时间的推移,抗药性不断显现。同时这类药物对养殖动物具有蓄积残留效应,可引发水产品质量问题。当前大力推广的健康无公害水产养殖模式迫切需要寻求一种新型的无公害防治药物。植物精油是植物体内的次生性物质,由分子量(本文来源于《北京水产》期刊2007年06期)

杀虫因子论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis(Bt),是一种重要的昆虫病原细菌,对多种农业害虫包括鳞翅目、鞘翅目、双翅目、膜翅目和线虫等具有高特异杀虫活性,是迄今应用最广泛的微生物杀虫剂。本文总结了杀线虫Bt菌株的活性因子种类以及不同类的活性物质杀线虫机制的分析,能够为生物杀线剂的研究与创制提供理论基础。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

杀虫因子论文参考文献

[1].田甜.丁香假单胞菌杀线虫毒性因子PtxA的杀虫活性与作用机制[D].华中农业大学.2018

[2].刘晓艳,闵勇,黄大野,方伟,王开梅.苏云金芽胞杆菌杀线虫活性因子分析及杀虫机制研究进展[J].中国生物防治学报.2017

[3].谷祖敏,陈思,韩金栋,李修伟,周飞.环境胁迫因子对杀虫真菌蜡蚧轮枝菌VL18的影响[J].沈阳农业大学学报.2014

[4].张奎花,钱秀娟,刘长仲.影响昆虫病原线虫共生菌发酵液杀虫活性相关因子研究[J].植物保护.2013

[5].黄威,商艳芳,高强,王成树.金龟子绿僵菌转录因子Mast12调控真菌穿透能力及杀虫毒力[C].2012年中国菌物学会学术年会会议摘要.2012

[6].张丽丽,梁革梅,曹广春,高希武,郭予元.增强BtCry毒素杀虫作用的重要途径:增效因子的利用及晶体蛋白的遗传改良[J].环境昆虫学报.2010

[7].管楚雄,曾杨,林志雄,匡石滋,孙东磊.环境因子对发光杆菌毒素杀虫活性的影响[J].中国生物防治.2010

[8].刘姣.苏云金芽胞杆菌Sigma35因子对杀虫晶体蛋白基因表达的影响[D].华中农业大学.2010

[9].刘飞,夏立秋,丁学知,易勇,莫湘涛.营养因子对苏云金芽胞杆菌4.0718产杀虫蛋白Cry1和Cry2的影响[J].微生物学通报.2008

[10].尹伦甫.水产用抗寄生虫药研发新动态——植物精油杀虫活性因子的应用[J].北京水产.2007

论文知识图

几种苏云金芽胞杆菌质粒中转座因子和...2 配方 5 制备的肠溶性微胶囊 图 3 配方...截断结构域M10_C和DUF基因PCR扩增...国家自然科学基金资助项目2006年国家自然科...国家自然科学基金资助项目2006年国家自然科...国家自然科学基金资助项目2006年国家自然科...

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杀虫因子论文_田甜
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