导读:本文包含了甲醇酵母论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:酵母,甲醇,蛋白,在线,肽酶,乙酰胆碱,淋巴管。
甲醇酵母论文文献综述
陶婷婷,升恭[1]（2018）在《甲醇酵母合成生物学研究获最新进展》一文中研究指出近日，代谢工程领域权威期刊《代谢工程》在线发表了华东理工大学生工学院张元兴教授团队蔡孟浩研究组关于甲醇酵母合成生物学方面的最新研究进展。该研究通过在甲基营养型酵母——毕赤酵母中异源重构并优化了降血脂药物洛伐他汀、降血脂药物辛伐他汀关键中间体莫纳(本文来源于《上海科技报》期刊2018-01-26）
刘东奇,王喆,王翔,尹翠玉,张宇峰[2]（2016）在《甲醇酵母细胞破壁与蛋白纯化工艺研究》一文中研究指出利用碱溶、离心、破壁、酸沉对甲醇蛋白粗品进行纯化。研究了适合于甲醇酵母细胞破壁及胞内蛋白纯化的条件。结果表明:热碱与高压均质联合处理法较生物酶解处理法、热碱处理法及高压均质处理法对细胞破壁效率高;采用p H 10.0、60℃热处理2 h,100 MPa压力均质3次,细胞破壁率可达87.6%;在p H 4.5时,破壁后上清液蛋白沉淀量最大,所得纯化甲醇蛋白中粗蛋白质含量达到82.5%,纯化效果较为理想。(本文来源于《中国油脂》期刊2016年06期）
李军明,林衡,张立超,葛高顺,胡学军[3]（2013）在《重组人C反应蛋白在甲醇酵母中的分泌表达及鉴定》一文中研究指出目的构建重组人C反应蛋白(rhCRP)甲醇酵母分泌表达菌株,表达、纯化rhCRP并鉴定其免疫反应性。方法将人工设计合成的rhCRP基因克隆到甲醇酵母表达载体pPICZαA上,经SacⅠ线性化得到重组质粒pPICZαA/rhCRP后转化至甲醇酵母X-33中,利用甲醇诱导进行分泌表达,并用组氨酸标签进行亲和层析纯化rhCRP。采用SDS-PAGE、Western blotting检测表达、纯化的目的蛋白,通过间接酶联免疫吸附试验(ELISA)鉴定其免疫反应性和稳定性。结果成功构建人CRP的重组甲醇酵母表达载体pPICZαA/rhCRP,重组酵母菌株成功诱导分泌表达23×103的rhCRP;一步纯化即得纯度为90.42%的目的蛋白,间接ELISA法检测表明,纯化产物rhCRP具有特异的免疫反应性和一定的稳定性。结论利用甲醇酵母表达系统,成功获得了较高纯度的具有免疫反应性的rhCRP,为下一步制备抗人CRP抗体及自主研发人CRP检测试剂提供重要的实验基础。(本文来源于《重庆医学》期刊2013年28期）
徐婷婷,陈锐博,暴元元,赵卫东,郑振宇[4]（2012）在《植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein基因在乙醇氧化酶缺陷型甲醇酵母中的表达及其活性分析》一文中研究指出采用BglⅡ酶切重组表达载体pPIC9K-Bra,纯化后电击转化甲醇酵母菌GS115,构建乙醇氧化酶缺陷型表达菌株GS115-pPIC9K-Bra,筛选鉴定后,以0.5%的甲醇进行诱导,表达的目的蛋白约占上清总蛋白的95%,纯度较高,并具有一定的甜度。成功构建了乙醇氧化酶缺陷型的甲醇酵母表达菌株,为深入研究其应用奠定了基础。(本文来源于《生物技术通报》期刊2012年12期）
李素霞,袁勤生[5]（2008）在《重组羧肽酶原B甲醇酵母的构建与分泌表达》一文中研究指出目的构建重组羧肽酶原B甲醇酵母工程菌株。方法将羧肽酶原B编码基因整合入酵母质粒,电转化至甲醇酵母中,His缺陷培养基和G418抗性筛选获得阳性克隆株。用大肠杆菌表达的羧肽酶原B免疫家兔制备羧肽酶原B兔抗血清;经发酵、甲醇诱导后,蛋白质印迹(Western-blotting)免疫检测蛋白质的表达。结果获得高抗体滴度的羧肽酶原B兔抗血清,蛋白质印迹免疫检测重组酵母经甲醇诱导表达后的上清阳性。结论获得了重组羧肽酶原B甲醇酵母工程菌株,可分泌表达重组羧肽酶原B。(本文来源于《食品与药品》期刊2008年11期）
黄秀东,王书生,陈佩新,王俊,陈耀国[6]（2008）在《人激肽释放酶-1在甲醇酵母中高水平表达、纯化与鉴定》一文中研究指出将自肾脏cDNA中获得的人激肽释放酶-1(Human kallikrein1,hK1)基因插入到pPICZαA载体中,构建甲醇酵母分泌型表达载体pPICZα-hK1,该载体转化毕赤酵母(Pichia pastoris)宿主菌X33,通过提高YPD平板和培养液中抗生素Zeocin的浓度(500~700μg/mL),筛选能高水平表达重组人激肽释放酶-1(Recombinant human kallikrein1,rhK1)的P.pastoris工程菌株。在30L发酵罐中发酵的表达条件为30oC、pH6.0,诱导64h时,发酵上清中rhK1产量达到6500u/L(约1.25g/L)。表达的rhK1有N-型糖基化程度不同的两种类型,分别是分子量偏大的rhK1-H和分子量略小的rhK1-L。通过苯基疏水作用、Cu2+螯合以及阴离子交换层析纯化,从每升发酵上清中可获得0.28g的rhK1-H和0.62g的rhK1-L,纯化的总得率约为72%,纯度不低于96%。到目前为止,该研究获得的rhK1产量高于其他研究者的结果。(本文来源于《生物工程学报》期刊2008年07期）
陈浩德[7]（2008）在《重组黑腹果蝇乙酰胆碱酯酶在甲醇酵母中表达的改善和基于此的新型农药残留快速检测传感器的改进》一文中研究指出基于酶抑制法原理的农药残留快速检测方法在我国应用最为广泛,但有两点缺陷严重限制了其发展和进一步应用:首先,关键酶乙酰胆碱酯酶的灵敏度不能满足越来越严格的检测要求;其次,采用的光学分析手段易受色素等物质干扰,测试范围小。本文在已有基础上,通过酵母密码子优化等,利用重迭PCR方法改造了黑腹果蝇乙酰胆碱酯酶DmAChE cDNA序列,在此基础上构建了以AOX启动子的酵母表达载体pPIC9K/DmAChE,在通过电击转化和MM平板快速筛选,进而获得了一株高表达R-DmAChE菌株,其摇瓶培养条件下该重组酶可被分泌到培养基中,性达718 U/mL,相比我们已经报道的未优化密码子时获得转化菌株的表达水平提高了3.4倍。在此基础上,我们将获得的高灵敏度重组乙酰胆碱酯酶用于电化学生物传感器的研制,并在其中利用碳纳米管来提高传感器的性能。采用通过碳纳米管介导电聚合普鲁士蓝作为电子传递媒介,可降低产生信号所需的氧化电压至200 mV;酶的固定采用传统可靠的戊二醛共价偶联法。碳纳米管凭借其巨大的比表面积不仅增加了普鲁士蓝的聚合量,还将信号电流值提高了40%,并将信号平衡时间缩短了300%;此外,凭借碳管创造的特殊微环境,酶传感器的热稳定性得到了提高,对一些农药检测灵敏度也显着提高,如对克百威的检测灵敏度提高了至少10倍。在4种加标饮料种探测出0.5μg/L敌敌畏和5μg/L克百威,说明该传感器能够抵抗糖、咖啡因、酒精、维生素和蛋白质的干扰。因此,本文中获得高表达量、高灵敏度的重组果蝇乙酰胆碱酯酶可为我国农药残留检测提供优质、廉价的酶原材料;同时研制出的以碳纳米管介导的新型电化学传感器具有克服干扰杂质对测定影响的能力,显着提高检测灵敏度等优点,有广泛应用于实际农药残留快速检测的潜力。(本文来源于《上海交通大学》期刊2008-06-30）
李素霞,袁勤生[8]（2007）在《重组羧肽酶原B甲醇酵母的构建与分泌表达》一文中研究指出1、研究背景及目的 PCPB 可以在大肠杆菌中得到表达,但是以包涵体形式存在,需要经过超声破碎细胞及复性等过程．所以我们尝试利用甲醇酵母(Pichia Pastoris)表达外源基因的优点,用甲醇酵母来表达 PCPB．(本文来源于《2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集》期刊2007-10-01）
彭珏,马泓冰,陶冠红[9]（2007）在《顺序注射固定化酶化学发光法在线检测甲醇酵母发酵液中的甲醇》一文中研究指出运用顺序注射分析技术,完成了样品的在线预处理,并采用固定化酶化学发光检测法测定甲醇的浓度,建立了一种在线监测甲醇酵母发酵诱导阶段发酵液中甲醇浓度的新方法。在选定的最佳条件下,甲醇浓度在0%～1.0%(V/V)范围内与化学发光强度呈良好的线性关系(R=0.9995),相对标准偏差(RSD)为1.9%(n=11),72 h内RSD为5.0%(0.2%甲醇溶液)。该法可在线自动完成过滤、稀释、测定等操作,分析速度快,长期稳定性高,能满足在线监测甲醇酵母发酵液中甲醇浓度的要求。(本文来源于《分析科学学报》期刊2007年04期）
陶蕾,吕元明,高锋[10]（2007）在《人LYVE-1的基因克隆及其在毕赤甲醇酵母细胞中的表达鉴定》一文中研究指出目的获得可溶、稳定、与人淋巴管内皮特异性透明质酸受体(LYVE-1)具备相同抗原性的重组人LYVE-1,为进一步研究LYVE-1在淋巴管形成中的作用及临床肿瘤免疫学诊断打下基础、提供材料。方法采用逆转录-酶链聚合反应(RT-PCR)自人淋巴结获得LYVE-1全长cDNA,将其克隆入真核表达载体pPICZα,构建含人LYVE-1的重组质粒(pPICZα-LYVE-1);经全自动序列分析仪测序确证后,将此重组质粒转化入毕赤甲醇酵母细胞(GS115)中进行诱导表达,表达产物经十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析及免疫印迹试验(Western blot)鉴定。结果经甲醇诱导的含pPICZα-LYVE-1的酵母细胞表达出重组人LYVE-1的融合蛋白,此蛋白在凝胶上表现为一约70 000的区带,在Western blot实验中可被LYVE-1的特异多克隆抗体识别。结论人LYVE-1融合蛋白在酵母表达系统中高水平表达,并具有与人体天然蛋白相同的抗原活性。(本文来源于《检验医学》期刊2007年04期）
甲醇酵母论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
利用碱溶、离心、破壁、酸沉对甲醇蛋白粗品进行纯化。研究了适合于甲醇酵母细胞破壁及胞内蛋白纯化的条件。结果表明:热碱与高压均质联合处理法较生物酶解处理法、热碱处理法及高压均质处理法对细胞破壁效率高;采用p H 10.0、60℃热处理2 h,100 MPa压力均质3次,细胞破壁率可达87.6%;在p H 4.5时,破壁后上清液蛋白沉淀量最大,所得纯化甲醇蛋白中粗蛋白质含量达到82.5%,纯化效果较为理想。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
甲醇酵母论文参考文献
[1].陶婷婷,升恭.甲醇酵母合成生物学研究获最新进展[N].上海科技报.2018
[2].刘东奇,王喆,王翔,尹翠玉,张宇峰.甲醇酵母细胞破壁与蛋白纯化工艺研究[J].中国油脂.2016
[3].李军明,林衡,张立超,葛高顺,胡学军.重组人C反应蛋白在甲醇酵母中的分泌表达及鉴定[J].重庆医学.2013
[4].徐婷婷,陈锐博,暴元元,赵卫东,郑振宇.植物甜蛋白des-pGlu1-Brazzein基因在乙醇氧化酶缺陷型甲醇酵母中的表达及其活性分析[J].生物技术通报.2012
[5].李素霞,袁勤生.重组羧肽酶原B甲醇酵母的构建与分泌表达[J].食品与药品.2008
[6].黄秀东,王书生,陈佩新,王俊,陈耀国.人激肽释放酶-1在甲醇酵母中高水平表达、纯化与鉴定[J].生物工程学报.2008
[7].陈浩德.重组黑腹果蝇乙酰胆碱酯酶在甲醇酵母中表达的改善和基于此的新型农药残留快速检测传感器的改进[D].上海交通大学.2008
[8].李素霞,袁勤生.重组羧肽酶原B甲醇酵母的构建与分泌表达[C].2007年全国生化与生物技术药物学术年会论文集.2007
[9].彭珏,马泓冰,陶冠红.顺序注射固定化酶化学发光法在线检测甲醇酵母发酵液中的甲醇[J].分析科学学报.2007
[10].陶蕾,吕元明,高锋.人LYVE-1的基因克隆及其在毕赤甲醇酵母细胞中的表达鉴定[J].检验医学.2007
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