以细胞表面标志物为研究指标的光致敏体外评价方法

以细胞表面标志物为研究指标的光致敏体外评价方法

论文摘要

目的:建立一种以细胞表面标志物作为评价指标的光致敏体外评价方法。方法:应用THP-1细胞,分别与光致敏剂、光刺激剂、皮肤致敏剂、皮肤刺激剂、阴性受试物等10余种受试物进行孵育,紫外照射和非照射条件下分别检测细胞表面标志物CD54和CD86的表达变化,确定合适的辐照强度、受试物剂量和光照后检测时间点,并确定评价光致敏的敏感指标和初步判定标准。结果:光致敏剂与THP-1细胞孵育并经紫外照射后,表达CD54的THP-1细胞百分比及平均荧光强度MFI比非照射组显著增加,相对荧光强度RFI在1. 4以上。光致敏剂未引起CD86表达的明显变化。其他受试物模型在照射前后CD54的MFI未见显著变化或变化程度明显低于光致敏剂。皮肤致敏剂引起的细胞表面标志物变化特点与光致敏剂明显不同。结论:THP-1细胞表面标志物CD54对于评价化合物光致敏性具有良好的灵敏度和特异性,本研究建立了一种应用细胞表面标志物进行光致敏性评价的体外方法,初步确定了评价指标和判定标准。

论文目录

  • 材料与方法
  •   1 药物与试剂
  •   2 仪器和设备
  •   3 细胞及细胞培养
  •   4 受试物浓度的选择
  •   5 辐照强度的选择
  •   6 检测时间点的选择
  •   7 光致敏剂及其他受试物对THP-1细胞表面标志物表达影响的检测
  •     7.1 细胞铺板
  •     7.2 受试物孵育
  •     7.3 预照射处理
  •     7.4 UVA照射或避光处理
  •     7.5 样品染色及预处理
  •     7.6 数据分析
  •   8 数据处理及统计方法
  • 结果
  •   1受试物浓度的选择
  •   2辐照强度的选择
  •   3光照后检测时间点的选择
  •   4光致敏剂及其他受试物对THP-1细胞表面标志物表达的影响
  •     4.1光致敏剂6-MC, PABA细胞模型中细胞表面标志物CD54, CD86的表达
  •     4.2光刺激剂吖啶 (acridine) 、蒽 (anthracene) 细胞模型中细胞表面标志物CD54, CD86的表达
  •     4.3皮肤致敏剂细胞模型中细胞表面标志物CD54, CD86的表达
  •     4.4皮肤刺激剂SDS细胞模型中细胞表面标志物的表达
  •     4.5 THP-1细胞与阴性受试物LA孵育后细胞表面标志物的表达
  •     4.6光致敏剂兼光刺激剂Bithionol细胞模型中CD54, CD86的表达
  •     4.7光致敏剂兼皮肤致敏剂BP, PPD细胞模型中CD54, CD86的表达
  •     4.8组间比较相对荧光强度RFI
  • 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 赵华琛,刘丽,李波

    关键词: 光致敏,细胞,细胞表面标志物,平均,相对荧光强度

    来源: 中国新药杂志 2019年04期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,工程科技Ⅰ辑

    专业: 一般化学工业,药学

    单位: 国家药品监督管理局药品审评中心,中国食品药品检定研究院国家药物安全评价监测中心

    基金: 国家“重大新药创制”科技重大专项资助项目(2018ZX09201017)

    分类号: R91;TQ658

    页码: 408-417

    总页数: 10

    文件大小: 395K

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