拟南芥可变剪切对CO2和O3浓度变化的响应研究

拟南芥可变剪切对CO2和O3浓度变化的响应研究

论文摘要

可变剪切是指DNA转录生成pre-mRNA后,pre-mRNA可以去除不同的内含子,进而得到不同的成熟mRNA。可变剪切是一种重要的转录后调控机制,它对于丰富生物体中蛋白质的类别,调控基因的表达水平和组织特异性等都具有重要的作用。研究表明,植物可变剪切能显著地被外界胁迫影响,可变剪切能够快速调节植物体内胁迫响应元件的丰度和功能。CO2和O3都是主要的温室气体,对生态系统和农业生产都有较大影响。近年来大气中CO2和O3浓度持续升高,并有继续保持上升的趋势。已有不少研究探讨过CO2和O3浓度升高对植物的影响,以及相应的响应机理,但鲜有文献报道植物可变剪切模式如何响应外界CO2和03浓度的变化。本论文以模式植物拟南芥为研究对象,从NCBI公共数据库中下载了两批拟南芥RNA-seq测序数据:(1)在低浓度CO2(150ppm)和高浓度C02(500ppm)条件下生长的拟南芥测序数据;(2)在大气正常03浓度(<100nL L-1)和高浓度O3(350nL-1)条件下生长的拟南芥测序数据。本论文使用生物信息学分析手段和工具,识别可变剪切事件,分析这些事件在不同实验组样本中的变化。本论文研究结果如下:(1)通过分析不同CO2浓度环境下生长的拟南芥的RNA-seq数据,在低浓度CO2样本中识别出了 121463个可变剪切事件,在高浓度CO2样本中识别出了122174个可变剪切事件。随着CO2浓度的升高,拟南芥中可变剪切事件数目也相应增加。通过差异分析,本论文共筛选出了 345个差异表达(DE)基因和239个差异可变剪切(DAS)基因,并且大多数DAS基因的表达丰度并没有显著变化。功能分析表明,DE基因和DAS基因的富集的基因本体(GO)条目有所不同,DAS 基因主要与‘cellular response to stress’、‘cellular response to DNA damage stimulus’等功能相关。(2)通过分析不同O3浓度环境下生长的拟南芥的RNA-seq数据,在control组样本中识别出了 5,844个可变剪切事件,在高浓度O3组样本中识别出了6,326个可变剪切事件。随着O3浓度的升高,拟南芥中可变剪切事件数目也增加。通过差异分析,本论文共筛选出了 188个DE基因和349个DAS基因。并且大多数DAS基因的表达丰度并没有显著变化。功能分析表明,DE基因和DAS基因的富集的GO条目有所不同,DAS基因主要与‘response to salicylic acid’、‘response to freezing’ 等功能相关。将CO2和O3的DAS分析结果进行比较发现,约20%的响应CO2的DAS基因在响应O3过程中也发生了显著的可变剪切变化,表明可变剪切调控可能是拟南芥同时响应CO2和O3甚至外界大气变化的途径之一。研究结果表明,拟南芥可变剪切事件数目和相关基因剪切模式都会显著受到外界CO2和O3浓度变化的影响。在响应CO2和03变化的过程中,DE基因和DAS基因都与响应外界刺激有关,但它们所行使的主要功能不同,因此推测可变剪切可能拥有一层独立的响应机制。这些研究结果对于进一步理解植物响应外界CO2和O3的机理提供了研究基础。

论文目录

  • 致谢
  • 摘要
  • Abstract
  • 第一章 绪论
  •   1.1 引言
  • 2对植物的影响'>    1.1.1 CO2对植物的影响
  • 2对植物生长发育的影响'>      1.1.1.1 CO2对植物生长发育的影响
  • 2对植物叶片气孔的影响'>      1.1.1.2 CO2对植物叶片气孔的影响
  • 2对植物的生理学影响'>      1.1.1.3 CO2对植物的生理学影响
  • 3对植物的影响'>    1.1.2 O3对植物的影响
  • 3对植物形态及生长发育的影响'>      1.1.2.1 O3对植物形态及生长发育的影响
  • 3对植物的氧化影响'>      1.1.2.2 O3对植物的氧化影响
  • 3对植物叶绿体和叶绿素的影响'>      1.1.2.3 O3对植物叶绿体和叶绿素的影响
  •   1.2 可变剪切的概念
  •     1.2.1 可变剪切
  •     1.2.2 植物可变剪切对外界胁迫响应的研究进展
  •   1.3 本论文研究内容与意义
  • 2浓度处理的样本RNA-seq测序数据分析'>第二章 拟南芥不同CO2浓度处理的样本RNA-seq测序数据分析
  •   2.1 引言
  •   2.2 材料与方法
  •     2.2.1 数据来源
  •     2.2.2 测序数据分析
  •       2.2.2.1 测序数据质量控制
  •       2.2.2.2 测序数据映射
  •       2.2.2.3 差异表达基因筛选
  •     2.2.3 可变剪切事件统计
  •     2.2.4 差异可变剪切基因筛选
  •     2.2.5 DE和DAS基因的功能分析
  •   2.3 结果与讨论
  •     2.3.1 测序数据质量控制
  •     2.3.2 差异表达基因筛选
  •     2.3.3 可变剪切事件统计及差异可变剪切基因筛选
  •     2.3.4 DE和DAS基因GO功能分析及比较
  •   2.4 本章小结
  • 3浓度处理的样本RNA-seq测序数据分析'>第三章 拟南芥不同O3浓度处理的样本RNA-seq测序数据分析
  •   3.1 引言
  •   3.2 材料与方法
  •     3.2.1 数据来源
  •     3.2.2 测序数据分析
  •   3.3 结果与讨论
  •     3.3.1 测序数据质量控制
  •     3.3.2 差异表达基因筛选
  •     3.3.3 可变剪切事件统计及差异可变剪切基因筛选
  •     3.3.4 DE和DAS基因GO功能分析及比较
  • 2和O3响应的比较'>    3.3.5 拟南芥可变剪切对CO2和O3响应的比较
  •   3.4 本章小结
  • 第四章 总结与展望
  •   4.1 总结
  •   4.2 展望
  • 参考文献
  • 攻读硕士期间发表学术论文
  • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 黄巍

    导师: 田景奎

    关键词: 拟南芥,可变剪切

    来源: 浙江大学

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学,生物学

    单位: 浙江大学

    分类号: Q943.2

    DOI: 10.27461/d.cnki.gzjdx.2019.001034

    总页数: 98

    文件大小: 6259K

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