miR-590-5p通过靶向PTEN调控胃腺癌细胞SGC7901对顺铂敏感性的影响

miR-590-5p通过靶向PTEN调控胃腺癌细胞SGC7901对顺铂敏感性的影响

论文摘要

目的探讨miR-590-5p通过下游靶基因磷酸酶及张力蛋白同源物基因(phosphatase and tensin homologue deleted on chromosome ten,PTEN)调节人胃癌SGC7901细胞对顺铂敏感性的作用。方法通过Targetscan等生物信息学软件预测miR-590-5p下游靶基因,并用Western blot以及qRT-PCR验证其下游靶基因的表达;通过脂质体Lipofectamine 2000将miR-590-5p mimics及miR-590-5p inhibitor分别转染至人胃腺癌细胞SGC701和SGC7901/DDP,MTT检测转染后的胃癌细胞在不同顺铂浓度(0,2,4,8,16,32μmol/L)时对细胞增殖抑制作用。结果生物信息学软件预测到miR-590-5p与PTEN能够靶向互补。Western blot以及qRT-PCR结果提示,SGC7901细胞和SGC7901/DDP分别过表达和抑制miR-590-5p后PTEN的表达分别相应降低和升高(P <0. 05)。人胃腺癌细胞SGC7901上调miR-590-5p mimics后较亲本细胞SGC7901对顺铂的敏感性升高,而转染miR-590-5p inhibitor后的SGC7901/DDP细胞对顺铂敏感性降低(P <0. 05)。结论 miR-590-5p可能通过调节下游靶基因PTEN的表达而影响胃癌细胞对顺铂的敏感性。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 细胞株及主要试剂
  •   1.2 细胞培养及转染
  •   1.3 检测SGC7901细胞及SGC7901/DDP转染后miR-590-5p的表达
  •   1.4 MTT检测转染后胃癌细胞对顺铂敏感性的变化
  •   1.5 生物信息学预测miR-590-5p的下游靶基因
  •   1.6 总RNA提取及实时荧光定量PCR检测
  •   1.7 Western blot法检测蛋白表达水平
  •   1.8 统计学分析
  • 2 结果
  •   2.1 qRT-PCR检测转染后miR-590-5p表达水平
  •   2.2 MTT检测转染后细胞增殖抑制作用
  •   2.3 Targetscan软件预测靶基因
  •   2.4 miR-590-5p对PTEN mRNA表达的影响
  •   2.5 miR-590-5p对PTEN蛋白表达的影响
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈莹,章海斌,刘玉,丁晓娇,王子安

    关键词: 胃癌,顺铂耐药性

    来源: 山西医科大学学报 2019年12期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技

    专业: 肿瘤学

    单位: 蚌埠医学院第一附属医院肿瘤内科

    基金: 安徽省教育厅自然科学研究重点项目(KJ2017A238),蚌埠医学院创新计划项目(Byycxz1813)

    分类号: R735.2

    DOI: 10.13753/j.issn.1007-6611.2019.12.001

    页码: 1635-1639

    总页数: 5

    文件大小: 877K

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