导读:本文包含了小鼠淋巴瘤细胞试验论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:柚皮素,淋巴瘤细胞,细胞遗传毒性
小鼠淋巴瘤细胞试验论文文献综述
任萌,张建军,刘妍,胡金芳[1]（2019）在《对柚皮素的细胞遗传毒性研究——小鼠淋巴瘤试验》一文中研究指出[目的]小鼠淋巴瘤细胞胸腺激酶(TK)位点基因突变试验(MLA)是一种具有高敏感性的体外哺乳动物细胞遗传毒性评价试验方法。本试验通过研究柚皮素对小鼠淋巴瘤L5178Y细胞TK基因是否具有致突变作用,旨在为柚皮素的安全应用提供依据。[方法]小鼠淋巴瘤细胞L5178Y经自发突变清除后,依据细胞抑制试验结果,将柚皮素给药组浓度分别设置为32μg/mL、80μg/mL、200μg/mL和500μg/mL(药物接触4h),同时设溶媒对照组(DMSO)和阳性对照组,在非代谢活化条件下,阳性对照为4-硝基喹啉(4NQ),代谢活化条件下,阳性对照为苯并芘(BP)。细胞进行表达培养,并计算总悬浮增长率(SG),2d表达培养结束后,将细胞进行梯度稀释并铺平板。11d后进行平板接种效率(PE)和突变频率(MF)的测定。[结果]2d培养后非活化溶媒对照组SG为24.1,活化溶媒对照组SG为19.5,均在标准8～32之间,说明细胞生长状态良好。11d培养后通过计数平板中每孔的大小克隆数计算PE与MF。小鼠淋巴瘤试验阴性对照组成立的条件为PE在65%～120%之间,MF在(50～170)×10～(-6)之间,本试验非活化溶媒对照组细胞PE为95%,MF为73.4×10～(-6),活化溶媒对照组PE为101%,MF为125.1×10～(-6),均符合试验成立条件;阳性对照组应满足突变率绝对增加,比自发背景突变率增加至少300×10～(-6),本试验非活化阳性对照组细胞MF为618.3×10～(-6),活化阳性对照组MF为665.3×10～(-6),均符合试验成立条件。柚皮素给药组终浓度为32μg/mL、80μg/mL、200μg/mL和500μg/mL时的MF,在非活化条件下分别为94.1×10～(-6)、104.2×10～(-6)、85.6×10～(-6)和125.3×10～(-6)。在活化条件下分别为182.1×10～(-6)、158.1×10～(-6)、185.0×10～(-6)和164.2×10～(-6),各浓度组的突变率无浓度依赖性增加或可重复性的增加。[结论]柚皮素小鼠淋巴瘤试验结果为阴性,说明柚皮素对小鼠淋巴瘤细胞没有遗传毒性。通过小鼠淋巴瘤试验可以评价其他现代中药是否具有致突变作用,可以为现代中药的安全应用提供更多依据。(本文来源于《中国毒理学会中药与天然药物毒理与安全性评价第四次（2019年）学术年会论文集》期刊2019-11-15）
徐彪,王友红,杜莎莎,Millie,Chen[2]（2019）在《微孔板法小鼠淋巴瘤细胞试验的方法验证与建立》一文中研究指出小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA)为医疗器械遗传毒理试验的重要检测项目(见ISO10993.3和OECD 490),其原理为胸苷激酶(TK)可以使细胞从培养基中吸收胸苷,用于DNA合成。叁氟胸苷(TFT)为胸苷类似物,当添加到培养基后,该类似物经TK途径被磷酸化,通过抑制DNA合成而导致细胞死亡。TK基因座为杂合子(tk~(+/-))的细胞通过一步即可正向突变为tk-/-基因型,从而失去TK激酶活性。这种tk-/-突变细胞具有TFT抗性,在正常培养基中能够存活因为DNA的从头合成不需要外源性胸苷,同时不会将这一有毒性的胸苷类似物整合到DNA中。因此细胞在TFT存在情况下能生长形成的克隆可以被认为是在tk~(+/-)位点发生了突变。本实验有两种方法,一种是软琼脂法,另外一种是液态培养基微孔板法,本设施验证的是液态培养基微孔板法。目的通过选取供试品非PVC膜袋,设置适当的阳性对照(3-甲基胆蒽和4-硝基喹啉N-氧化物),检测其浸提液在添加和不添加外源性代谢活化物情况下诱导小鼠淋巴瘤细胞L5178Y(TK+/--3.7.2C)胸苷激酶(TK)位点突变的能力,验证本中心进行该项试验的能力。方法:本试验使用小鼠淋巴瘤L5178Y细胞株,该细胞来源于英国公共卫生培养物保藏所并在苏州药明康德传代培养并保存在液氮中。将L5178Y细胞暴露于供试品浸提液、阳性对照和阴性对照中,每组每系列设置2个平行。S9代谢活化系统处理4小时,非代谢活化系统处理4小时和24小时。非极性和极性介质给药体积分别为1%(v/v)和10%(v/v)。本试验中未观察到细胞毒性,因此该试验设计一个剂量水平可以接受。表型表达期结束后,调整细胞密度,接种克隆效率微孔板和突变频率微孔板。结果供试品没有降解,浸提结束后肉眼观察浸提液澄清。叁个系列均满足试验接受标准,以4小时加S9为例:极性介质/阴性对照生理盐水平均MF为93.8×10~(-6),平均克隆效率CE为118.7%,平均SG为21.8。对于非极性介质/阴性对照DMSO,平均MF为92.6×10~(-6),平均平板CE为103.8%,平均SG为22.9。对于阳性对照,2.0μg·mL~(-1)的3-甲基胆蒽诱导的突变频率(IMF)为673.6×10~(-6),诱导的小集落突变频率ISMF为303.5×10~(-6)占总突变频率的43.0%。供试品生理盐水浸提液和DMSO浸提液处理过的细胞均进行了克隆,未发现沉淀且无明显的细胞毒性。与当前介质/阴性对照相比,供试品生理盐水浸提液和DMSO浸提液的IMF分别为-2.0×10~(-6)和-3.8×10~(-6),IMF未超过通用评价因子(GEF)126×10~(-6)。结论根据以上结果,介质/阴性对照,在自发突变频率、平板克隆效率和悬浮增长率方面均满足标准,阳性对照诱导后突变频率和小集落比均满足标准,该小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验是有效的,判定非PVC膜袋为阴性,试验结果表明本设施具备开展微孔板法小鼠淋巴瘤细胞试验的能力。(本文来源于《中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集》期刊2019-09-17）
杜渝,邹思颖,张立实[3]（2013）在《小鼠淋巴瘤细胞 TK 基因突变试验检测阿特拉津的诱变性》一文中研究指出目的了解除草剂特拉津是否具有诱变性。方法采用小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验,设6.25、12.5、25、50、100μg/ml5个剂量组,不加S9条件下处理L5178Y细胞3h和12h,加S9条件下处理细胞3h,分别进行细胞毒性和突变频率的测定。结果随阿特拉津染毒剂量的增加,3种处理条件下各剂量组的相对存活率(RV)和相对悬浮增长率(RSG)均降低,突变频率增高,且有剂量反应关系;在100μg/ml剂量组L5178Y细胞tk位点突变频率与溶剂对照组自发突变频率相比差异有统计学意义。结论阿特拉津对L5178Y细胞有明显的细胞毒性和一定的遗传毒性。(本文来源于《现代预防医学》期刊2013年10期）
王欣,王雪,张旻,胡燕平,宋捷[4]（2010）在《小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变试验的结果判定》一文中研究指出小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变试验(MLA)是遗传毒性试验标准组合推荐方法之一,在药物非临床安全性评价及其他领域被广泛使用。本文以遗传毒性试验国际工作会议(IWGT)进行MLA国际验证的相关内容为依据,介绍MLA有关背景数据和结果判定的新标准,供国内同行参考,并建议在试验研究中采纳。(本文来源于《中国新药杂志》期刊2010年16期）
王欣,王雪,张旻,胡燕平,宋捷[5]（2010）在《小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变试验的结果判定》一文中研究指出小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变试验(MLA)是遗传毒性试验标准组合推荐方法之一,在药物非临床安全性评价及其他领域被广泛使用。本文以IWGT进行MLA国际验证的相关内容为依据,介绍MLA有关背景数据和结果判定的新的标准,供国内同行参考,并建议在试验研究中采纳。(本文来源于《2010年全国药物毒理学学术会议论文集》期刊2010-08-12）
赵洁,胡燕平,宋捷,张旻,李波[6]（2006）在《运用小鼠淋巴瘤细胞基因突变试验测定4,4′-二甲基二苯基碘鎓盐六氟磷酸盐的遗传毒性》一文中研究指出目的研究运用小鼠淋巴瘤试验(MLA)对4,4′-二甲基二苯基碘鎓盐六氟磷酸盐(IHT-PI820)作为食品外包装上油墨使用安全性的评价。方法采用L5178Y细胞,处理3h,表达48h后测定突变细胞频率及小集落比例。同时进行添加和未添加代谢活化系统的试验,每个条件下设6个剂量组,阴性(二甲亚砜)、阳性(甲磺酸甲酯或环磷酰胺)对照组及IHT-PI8204个剂量组(37.5,75.0,150.0和300.0mg·L-1),在相同条件下,每组设定两个平行样。结果IHT-PI820各剂量组和阳性对照组的突变频率均显着性高于阴性对照组,并且IHT-PI820各剂量组间存在明确的剂量反应关系,小集落的比例也随剂量的升高呈上升趋势。结论IHT-PI820可以诱发小鼠淋巴瘤细胞Tk基因突变,故将其作为食品外包装上的油墨使用时,应严格按照相关的行业规定操作。(本文来源于《中国药理学与毒理学杂志》期刊2006年06期）
袁健,曹佳[7]（2005）在《小鼠淋巴瘤细胞试验用于突变检测的研究进展》一文中研究指出自从1972年小鼠淋巴瘤细胞试验(mouselymphoma assay MLA)建立以来,该试验已经广泛地用于各种理化因素的遗传毒性评价。其使用的细胞株小鼠淋巴瘤L5178Ytk+/-,-3·2·7c细胞在11号染色体上存在tk等位基因。由于只含有1个(本文来源于《毒理学杂志》期刊2005年04期）
邬鸣,张立实[8]（2005）在《小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验检测染料木素的诱变性》一文中研究指出目的:用小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验检测染料木素的诱变性。方法:不加S9活化的条件下,用染料木素5、10、15、20μg/ml处理L5178Y细胞3h,采用微孔板法进行细胞毒性、平板接种效率和突变频率测定。结果:随染毒剂量的增加,染料木素对L5178Y的细胞毒性增大。染料木素能诱发L5178Y细胞tk位点突变频率显着增高,当剂量达到15μg/ml以上时其诱发突变频率为自发突变的3倍以上。结论:染料木素对L5178Y细胞有明显的细胞毒性,并可诱发tk基因突变。(本文来源于《现代预防医学》期刊2005年08期）
邬鸣[9]（2005）在《用小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验评价叁种黄酮类化合物的诱变性和抗诱变性》一文中研究指出槲皮素、山奈酚、染料木素是膳食成分中较常见的几种黄酮类化合物。由于其具有多种生物学活性,现已大量多于药品、保健食品开发。有研究提示这几种物质可能具有一定的遗传毒性,同时也可能有一定的抗诱变性。本研究的目的是用小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验评价其诱变性及抗诱变性,一方面为其进一步的开发利用提供毒理学依据,并为TK基因突变试验在药品、保健食品原料安全性评价中的推广应用积累资料;另一方面探讨小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验用于抗诱变性评价的可能,以拓展TK基因突变试验的应用范围。 致突变试验中,在不加S9的情况下,分别以10、20、30、40、50μg/ml槲皮素,20、35、50、65、80μg/ml山奈酚和5、10、15、20μg/ml染料木素处理L5178Y细胞3h,采用微孔板法进行细胞毒性、平板接种效率和突变频率测定。结果显示,随染毒剂量的增加,3种受试物对L5178Y的细胞毒性有增大趋势。槲皮素、染料木素能诱发L5178Y细胞tk位点突变频率显着增高,且有较好的剂量反应关系。当槲皮素、染料木素剂量分别达到40μg/ml和15μg/ml以上时,其诱发突变频率均为自发突变的3倍以上。 抗突变试验中,在不加S9的情况下,分别以0.625、1.25、2.5、5、10μg/ml染料木素或槲皮素与0.5μg/ml MMC同时处理L5178Y细胞3h,并进行细胞毒性、平板接种效率和突变频率测定(方法同致突变试验)。(本文来源于《四川大学》期刊2005-04-01）
谢明[10]（2003）在《小鼠淋巴瘤细胞突变试验方法》一文中研究指出小鼠淋巴瘤细胞突变试验(简称小鼠淋巴瘤试验或MLA)是国际上较常应用的遗传毒性试验常规方法 ,有关该试验方面的报道在国内不常见 ,本文对该试验方法作了较为具体介绍 ,仅围绕该试验的96孔板法(microwellormicrotitre)展开论述 ,具有较好的可操作性(本文来源于《癌变.畸变.突变》期刊2003年03期）
小鼠淋巴瘤细胞试验论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
小鼠淋巴瘤细胞试验(MLA)为医疗器械遗传毒理试验的重要检测项目(见ISO10993.3和OECD 490),其原理为胸苷激酶(TK)可以使细胞从培养基中吸收胸苷,用于DNA合成。叁氟胸苷(TFT)为胸苷类似物,当添加到培养基后,该类似物经TK途径被磷酸化,通过抑制DNA合成而导致细胞死亡。TK基因座为杂合子(tk~(+/-))的细胞通过一步即可正向突变为tk-/-基因型,从而失去TK激酶活性。这种tk-/-突变细胞具有TFT抗性,在正常培养基中能够存活因为DNA的从头合成不需要外源性胸苷,同时不会将这一有毒性的胸苷类似物整合到DNA中。因此细胞在TFT存在情况下能生长形成的克隆可以被认为是在tk~(+/-)位点发生了突变。本实验有两种方法,一种是软琼脂法,另外一种是液态培养基微孔板法,本设施验证的是液态培养基微孔板法。目的通过选取供试品非PVC膜袋,设置适当的阳性对照(3-甲基胆蒽和4-硝基喹啉N-氧化物),检测其浸提液在添加和不添加外源性代谢活化物情况下诱导小鼠淋巴瘤细胞L5178Y(TK+/--3.7.2C)胸苷激酶(TK)位点突变的能力,验证本中心进行该项试验的能力。方法:本试验使用小鼠淋巴瘤L5178Y细胞株,该细胞来源于英国公共卫生培养物保藏所并在苏州药明康德传代培养并保存在液氮中。将L5178Y细胞暴露于供试品浸提液、阳性对照和阴性对照中,每组每系列设置2个平行。S9代谢活化系统处理4小时,非代谢活化系统处理4小时和24小时。非极性和极性介质给药体积分别为1%(v/v)和10%(v/v)。本试验中未观察到细胞毒性,因此该试验设计一个剂量水平可以接受。表型表达期结束后,调整细胞密度,接种克隆效率微孔板和突变频率微孔板。结果供试品没有降解,浸提结束后肉眼观察浸提液澄清。叁个系列均满足试验接受标准,以4小时加S9为例:极性介质/阴性对照生理盐水平均MF为93.8×10~(-6),平均克隆效率CE为118.7%,平均SG为21.8。对于非极性介质/阴性对照DMSO,平均MF为92.6×10~(-6),平均平板CE为103.8%,平均SG为22.9。对于阳性对照,2.0μg·mL~(-1)的3-甲基胆蒽诱导的突变频率(IMF)为673.6×10~(-6),诱导的小集落突变频率ISMF为303.5×10~(-6)占总突变频率的43.0%。供试品生理盐水浸提液和DMSO浸提液处理过的细胞均进行了克隆,未发现沉淀且无明显的细胞毒性。与当前介质/阴性对照相比,供试品生理盐水浸提液和DMSO浸提液的IMF分别为-2.0×10~(-6)和-3.8×10~(-6),IMF未超过通用评价因子(GEF)126×10~(-6)。结论根据以上结果,介质/阴性对照,在自发突变频率、平板克隆效率和悬浮增长率方面均满足标准,阳性对照诱导后突变频率和小集落比均满足标准,该小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验是有效的,判定非PVC膜袋为阴性,试验结果表明本设施具备开展微孔板法小鼠淋巴瘤细胞试验的能力。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
小鼠淋巴瘤细胞试验论文参考文献
[1].任萌,张建军,刘妍,胡金芳.对柚皮素的细胞遗传毒性研究——小鼠淋巴瘤试验[C].中国毒理学会中药与天然药物毒理与安全性评价第四次（2019年）学术年会论文集.2019
[2].徐彪,王友红,杜莎莎,Millie,Chen.微孔板法小鼠淋巴瘤细胞试验的方法验证与建立[C].中国毒理学会第九次全国毒理学大会论文集.2019
[3].杜渝,邹思颖,张立实.小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验检测阿特拉津的诱变性[J].现代预防医学.2013
[4].王欣,王雪,张旻,胡燕平,宋捷.小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变试验的结果判定[J].中国新药杂志.2010
[5].王欣,王雪,张旻,胡燕平,宋捷.小鼠淋巴瘤细胞tk基因突变试验的结果判定[C].2010年全国药物毒理学学术会议论文集.2010
[6].赵洁,胡燕平,宋捷,张旻,李波.运用小鼠淋巴瘤细胞基因突变试验测定4,4′-二甲基二苯基碘鎓盐六氟磷酸盐的遗传毒性[J].中国药理学与毒理学杂志.2006
[7].袁健,曹佳.小鼠淋巴瘤细胞试验用于突变检测的研究进展[J].毒理学杂志.2005
[8].邬鸣,张立实.小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验检测染料木素的诱变性[J].现代预防医学.2005
[9].邬鸣.用小鼠淋巴瘤细胞TK基因突变试验评价叁种黄酮类化合物的诱变性和抗诱变性[D].四川大学.2005
[10].谢明.小鼠淋巴瘤细胞突变试验方法[J].癌变.畸变.突变.2003