![长期服用不同剂量的伊曲康唑对小鼠肝脏的影响[]](https://www.lunwen66.cn/thumb/9bc04de924c3fe2be1b2acd5.webp)
（1.长沙医学院2014级本科临床医学3班湖南长沙410219）
（通讯作者：长沙医学院基础医学院应用生物教研室湖南长沙410219）
基金项目：2015年度湖南省大学生研究性学习和创新性实验计划项目，湘教通〔2015〕269号-541
摘要目的了解小鼠长期服用不同剂量的伊曲康唑对其体重、肝脏和血清主要生化指标的具体影响，为伊曲康唑指导性用药和用药剂量的研究提供理论依据。方法对同窝别的60只小鼠使用匹配的方法均分为空白、低剂量、中剂量和高剂量四组，四周喂食后了解小鼠肝脏和血清中ALT、AST的含量变化。结果中剂量（X2=8.36，P=0.01）和高剂量组（X2=10.23，P=0.00）伊曲康唑喂食的实验组实验前后血清生化指标变化明显。结论中高剂量伊曲康唑的长期食入将对血液生化指标、肝脏产生不利影响。
关键词长期服入；不同剂量；伊曲康唑；肝脏影响
Long-termeffectsofdifferentdosesofitraconazoleinmiceliver
WENGDe-ping，ZHANGYu-qian，QINJing-feng，etal.(ChangshaMedicalUniversity,Changsha410219,Hunan，China)
Abstract：ObjectiveUnderstandthelong-termuseofmicewithdifferentdosesofitraconazolespecificimpactofbodyweight,liverandserumbiochemicalparameterstoit.MethodsOntheother60micelittermatesusingthematchingmethodsarepidedintothreegroups,low-dose,medium-doseandhighdosefourgroupsafterfourweeksfedunderstandcontentinliverandserumALT,AST's.ResultsDoseandhigh-dosegroupsbeforeandaftertheitraconazolegroupfeedingexperimentexperimentalserumbiochemicalparameterschangedsignificantly.ConclusionsHigh-doseitraconazolewillhavelong-termingestionofbloodbiochemicalparameters,liveradverseeffects.
Keywords：Liverinfluence;itraconazole;longIngestion;differentdoses
自第一个抗真菌药物——灰黄霉素于1937年问世以来，人类与真菌的斗争已持续70多年。近年来随着广谱抗菌药、免疫抑制剂、器官移植、血液透析和放化疗等的普遍使用，真菌感染的发病率逐年上升[1]，已成为严重影响人们身体健康的公众问题。伊曲康唑（ltraconazole,ITZ，斯皮仁诺）是一种三唑类抗真菌药，对念珠菌及酵母菌、霉菌、皮肤癣菌和其他致病真菌具有广谱抗真菌活性[2]，是目前临床应用最为广泛的三唑类广谱抗真菌药，但国内外医疗期刊关于伊曲康唑的不良反应常有病例报道，少数患者在应用过程中出现了肝功能异常现象[1]。本研究旨在通过建立不同剂量药物食入小鼠模型，分析不同剂量伊曲康唑食入对肝脏组织和血清中丙氨酸氨基转移酶（Alanineaminotransferase，ALT）、天冬氨酸转氨酶（AspartateTransaminase，AST）含量的测定，拟探究该药物对小鼠肝功能的具体影响，为进一步进行临床用药的研究提供线索。
1材料与方法
1.1实验对象：为60只健康的昆明小白鼠，4-5周龄，雌雄各半，体质量25g-30g之间。购置后饲养5天。
1.2仪器与试剂
（1）实验动物：昆明小白鼠，SPF级，体重25g-30g，雄性31只，雌性29只，由长沙市天勤
生物技术有限公司提供，许可证号：SCXK(湘)2014-0011。
（2）实验仪器：TGL-16GB高速台式离心机（上海安亭科学仪器），722型可见分光光度计（上海菁华仪器），灌胃针（北京冀诺泰科技发展有限公司）。
（3）实验试药：斯皮仁诺伊曲康唑口服液（先声再康江苏药业有限公司，编号H20130425），丙氨酸氨基转移酶测试盒,天门冬氨酸氨基转移酶测试盒,谷胱甘肽过氧化物酶测定试剂盒,甘油三酯测试盒（南京建成生物工程研究所）。
1.3处理方法
（1）对入选的60只小白鼠进行性别鉴别、称重，并进行匹配分组；按照窝别和体重进行适量匹配，随机分为五个组，每组12只，分别为：正常组、低剂量组13mg/(kg·d）、中等剂量组26mg/(kg·d）、高剂量组39mg/(kg·d）、超高剂量组52mg/(kg·d）。
（2）低、中、高、超高剂量组小鼠分别给予13mg/kg、26mg/kg、39mg/kg、52mg/kg伊曲康唑灌胃，空白对照组给予等同剂量生理盐水灌胃，灌胃时间为饲喂之前0.5-1小时，频率为每天1次，剂量以其体重为标准，每克体重配置0.1克药物。
（3）连续灌胃4周，期间密切观察小鼠体重和健康状况。
（4）每次抽血化验前，小鼠禁食12小时后抽血，同时，解剖小鼠取肝脏组织，离心后测定血清和组织中谷草转氨酶、谷丙转氨酶的含量。
1.4观察指标：包括小鼠的（进食、大小便、体质量变化、活动情况等）、前测和后测各实验室指标（ALT和AST）。
1.5统计学分析：使用SPSS18.0软件进行统计分析，计量资料使用（均值±标准差）形式进行统计描述，配对资料的比较使用配对t检验的方法，检验水准α取0.05，双侧概率。
2结果
2.1不同组别小鼠实验前后体重的变化
空白组小鼠体重增加正常，活动正常，毛发光亮，实验前测体重（29.07±3.21）克，一个月后的实验后测（36.03±4.21）克，前后体重差异显著（t=18.69，P=0.00）。其余剂量组别的小鼠体重实验前后差异不显著（P>0.05）。观察期间小鼠全部存活。
2.2实验前后不同组别小鼠肝脏中两项生化指标含量的比较
实验前后中剂量组中ALT（t=4.15，P=0.04）和AST（t=17.07，P=0.00）、高剂量组ALT（t=26.20，P=0.00）和AST（t=30.74，P=0.00）、超高剂量组中ALT（t=13.07，P=0.00）和AST（t=34.22，P=0.00）实验前后变化明显（P<0.05）。见表2。
2.3实验前后不同组别小鼠血清中两项生化指标含量的比较
低剂量组中ALT（t=13.99，P=0.00）和AST（t=38.19，P=0.00）、中剂量组中ALT（t=24.00，P=0.00）和AST（t=12.89，P=0.00）、高剂量组中ALT（t=11.31，P=0.00）、超高剂量组中ALT（t=71.34，P=0.00）和AST（t=15.34，P=0.00）实验前后变化明显（P<0.05）。见表3。
3讨论
近年来，由于抗生素、抗肿瘤药物、免疫抑制剂等的应用，器官移植、介入性治疗技术的发展，艾滋病、糖尿病、恶性肿瘤等引起机体免疫功能低下等原因，导致真菌病的发病率呈明显上升趋势[1]。肝移植术后真菌感染是移植术后患者死亡的主要原因之一，国内外报道肝移植术后真菌感染的发生率高达15%-42%，病死率达40%～80%，高于急性排异反应、肾功能衰竭和病毒感染[3]。肝脏是人体的主要代谢器官，是药物和外来物质的代谢处置中心，药物在肝脏进行代谢转化过程中有可能损害肝脏的机能，甚至造成药源性疾病，肝细胞损害是直接由于细胞内功能或膜完整性的破坏，或间接地由免疫中介的膜损伤所致[4-8]。
伊曲康唑可致患者出现乏力、右上腹疼痛、黄疸、胆汁淤积和发热等症状，实验室检查发现转氨酶和胆红素均升高[9,10]；伊曲康唑的肝毒性可发生于用药后5天至数月后。应用抗真菌药患者的基础病种类较多，长期用药者需定期监测肝功能，年长、营养不良、酗酒者尤其需要注意[11]。肝功能异常者应慎用抗真菌药。抗真菌药的肝毒性轻者可致可逆性肝功能异常，重者可发生致命性肝衰竭。一旦出现肝损伤，应立即停药并给予细胞色素C、辅酶A等对症支持治疗，必要时加用保肝药物，有可能减轻抗真菌药肝毒性的程度。
本研究显示，中高剂量伊曲康唑喂食的实验组实验前后血清生化指标变化明显，故中高剂量的伊曲康唑长期食入将对肝脏产生不利影响，但实验的指标限定于血清的生化指标，具体影响值得进一步深入研究。
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