论文摘要
构建3型猪圆环病毒(PCV3)Cap蛋白的重组植物乳杆菌并进行验证。通过PCR方法扩增含1320信号肽和DCpep优化的PCV3 Cap基因(PCV3D),使用无缝克隆技术连接到pSIP411载体中,电转入克隆宿主乳球菌NZ3900中,提取测序结果正确的重组表达质粒NZ3900:pSIP411-PCV3D再次电转入植物乳杆菌Lp12,制备重组菌并验证其表达。结果显示:成功扩增出目的条带为789 bp的经过修饰和优化的PCV3 Cap基因(PCV3D)片段,重组表达质粒电转入植物乳杆菌Lp12,成功构建重组植物乳杆菌Lp12:pSIP411-PCV3D。Western blot、流式细胞术等方法检测重组蛋白表达,获得阳性结果,阳性率为47.9%;免疫荧光进一步表明重组蛋白能够在细胞中表达。本试验成功构建了1株表达PCV3 Cap蛋白的植物乳杆菌,为PCV3口服候选疫苗的开发研究提供依据。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 付婷婷,李昌,王茂鹏,许汪,韩继成,马彬尧,秦爱建,金宁一
关键词: 蛋白,植物乳杆菌,构建与表达
来源: 中国兽医学报 2019年06期
年度: 2019
分类: 农业科技,基础科学
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 扬州大学兽医学院,军事医学科学院军事兽医研究所
基金: 国家重点研发计划资助项目(2017YFD0501000),国家自然科学基金资助项目(31802224)
分类号: S852.651
DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.06.02
页码: 1052-1057
总页数: 6
文件大小: 1522K
下载量: 215
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