导读:本文包含了实时荧光论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:荧光,实时,定量,病毒,乙型肝炎,特异性,链球菌。
实时荧光论文文献综述
戴陈伟,童琳,武昌俊,许勇,李舜[1]（2019）在《实时荧光定量PCR技术快速检测志贺氏菌》一文中研究指出目的建立实时荧光定量PCR法快速检测志贺氏菌。方法提取志贺氏菌基因组为模板扩增virA基因片段,将目的片段连接至pMD19-T载体得到重组质粒,转化大肠杆菌DH5α感受态细胞,验证所得到的重组质粒,以紫外分光光度计测量重组质粒吸光度值A_(260),并换算为质粒拷贝数后作梯度稀释得到不同浓度的质粒标准品;进行荧光定量PCR分析并通过特异性、灵敏性实验以验证该方法的可行性。结果重组质粒标准品浓度在103～108 copies/μL范围内线性关系良好(r~2>0.99),实时荧光定量PCR检测志贺氏菌时出现良好的扩增曲线,鼠伤寒沙门氏菌、金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均未出现扩增曲线。志贺氏菌的检出限为100CFU/m L。结论本方法便捷、高效、可靠,可用于志贺氏菌的快速定性定量检测。(本文来源于《食品安全质量检测学报》期刊2019年23期）
王楷宬,王素春,樊擎莹,孙亚伟,康京丽[2]（2019）在《H9亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用》一文中研究指出为建立一种快速准确检测H9亚型禽流感病毒基因的检测方法,根据GenBank中H9亚型禽流感病毒血凝素编码基因进行荧光检测引物和探针设计,建立了一种针对H9亚型禽流感病毒的荧光RT-PCR检测方法。利用该方法进行灵敏度和特异性检测,并用本方法和国家标准中的荧光RT-PCR检测方法,同时对临床样本进行检测。结果显示,仅H9亚型禽流感病毒出现了正常荧光检测曲线,而其他病毒及阴性对照均未出现;检测灵敏度为RNA终浓度10~(-4) ng/μL(1.30×10~4 copies/μL);临床样本检测结果与国标方法一致,符合率为100%。结果表明,该方法特异性强、灵敏度高,可用于H9亚型禽流感病毒检测。(本文来源于《中国动物检疫》期刊2019年12期）
海小,刘国强,罗建兴,郭梁,郭元晟[3]（2019）在《TaqMan实时荧光PCR检测水牛源性成分》一文中研究指出随着动物源性产品中掺假造假事件不断增多以及动物来源性疾病的传播风险逐渐加大,作为保障食品安全和维护消费者权益的高效检测手段,动物源性成分的检测技术已成为国内外的研究热点。根据出入境检验检疫行业标准SN/T 3730.7—2013《食品及饲料中常见畜类品种的鉴定方法第7部分:水牛成分检测实时荧光PCR法》合成引物和探针,利用TaqMan实时荧光聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction, PCR)技术检测鲜肉及加工肉制品中的水牛源性成分。结果表明,所研究的引物和探针具有较强的特异性(只对水牛来源DNA具有明显扩增)和较高灵敏度(检出限可到达10 fg/μL,掺假灵敏度可达0.1%),同时具有较广泛的适用性(可以对市售加工制品进行准确的源性检测)。通过所建立的标准曲线能进行定量检测。(本文来源于《食品工业》期刊2019年11期）
李楠,李婕,李亚红,严芳,吴晓昀[4]（2019）在《实时荧光定量PCR法检测肾移植术后BK病毒和JC病毒感染及临床意义》一文中研究指出目的检测肾移植患者术后BK病毒DNA和JC病毒DNA并探讨其临床应用价值。方法应用实时荧光定聚合酶链反应(PCR)对广东省第二人民医院125例同种异体肾移植患者术后血液及尿液标本分别进行BK病毒DNA和JC病毒DNA检测。结果 125例肾移植患者中,病毒尿症阳性共35例(28.0%),其中尿BK病毒DNA阳性25例(20.0%)、尿JC病毒DNA阳性10例(8.0%);病毒血症有20例(16.0%),其中血液BK病毒DNA阳性20例(16.0%)、JC病毒血症未检出;BK病毒DNA血液和尿液均为阳性有5例(4.0%),并经肾脏穿刺病理活检确证为BK病毒相关性肾病(BKVAN)。结论尿液、血液中的BK病毒和JC病毒检测能够早期发现BK、JC病毒感染,为预防肾移植术后多瘤病毒相关性肾病(PVAN)提供重要的依据。(本文来源于《黑龙江医学》期刊2019年11期）
谭翰清,程洁萍,伦雪恩,赵婉莎,朱素芬[5]（2019）在《札如病毒实时荧光RT-PCR的建立与应用》一文中研究指出目的建立一种可快速、全面、准确检测人感染札如病毒的Taq Man探针荧光实时RT-PCR方法。方法利用Bioedit2.0、MAGE6.0软件对可感染人的GⅠ、GⅡ、GⅣ、GⅤ基因群札如病毒进行保守序列比对,应用Primer6.0、Primer Express 3.0进行引物和Taq Man探针的设计与评价,分别设计了两套引物及Taq Man探针,克隆相应靶基因并构建阳性标准品,建立及优化一步法实时荧光RT-PCR反应体系,并进行灵敏度、特异度、临床标本验证试验。结果根据基因序列比对分析,札如病毒ORF1与ORF2连接区具有相对高保守序列,针对GⅠ、GⅡ、GⅣ及GⅤ设计了一条共用的下游引物、以及两套上游引物和Taq Man探针,能覆盖当前GenBank可见的感染人的札如病毒基因型,在同一反应管中建立了同时检测札如病毒四个基因群的实时荧光RT-PCR,并可将GⅤ与GⅠ、GⅡ、GⅣ进行初步分型,对人柯萨奇病毒、诺如病毒、轮状病毒、腺病毒等非靶标病原体无扩增,仅对札如病毒有特异扩增,最低检测下限为10拷贝/反应。结论本研究建立了札如病毒一步法实时荧光RT-PCR反应体系,可将GⅤ与GⅠ、GⅡ、GⅣ区分开来,为腹泻疫情防控和风险评估提供快速、准确的病原学依据。(本文来源于《中国热带医学》期刊2019年11期）
方志军[6]（2019）在《实时荧光PCR检测乙肝病毒DNA的效果评价》一文中研究指出目的观察应用实时荧光PCR检验法检测乙肝病毒DNA的效果,为临床提高诊断乙型肝炎病毒的准确性提供思路。方法选取2015年11月～2018年7月于本院就诊的458例乙型肝炎患者作为研究对象,所有患者均经标准的abbot药盒检测确诊,其中大叁阳患者241例,小叁阳患者217例。患者入院后均采集空腹静脉血,制样本后采用酶联免疫吸附检验法和实时荧光PCR检验,比较两种检验方法对患者乙肝类型的阳性检出率。结果实时荧光PCR检验法对大叁阳的阳性检出率为95.43%,小叁阳的阳性检出率为69.58%,均高于酶联免疫吸附检验法的85.06%、55.76%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论实时荧光PCR检验法可直观的反映乙型肝炎病情状况,具有较高的诊断效果,临床医师可在实际工作中根据患者经济、病情等综合因素进行选用。(本文来源于《医学信息》期刊2019年22期）
刘沃满,唐玉芬,李祝坤[7]（2019）在《妊娠晚期孕妇B族链球菌实时荧光定量PCR检测结果分析》一文中研究指出目的应用实时荧光定量PCR(realtime PCR)方法检测妊娠晚期孕妇B族链球菌(GBS),了解妊娠晚期孕妇GBS的感染情况,为预防GBS感染提供依据。方法选取2017年1月～2018年12月我院进行GBS检测的10 691例孕妇。采用realtime PCR技术对孕妇阴道分泌物或阴道-直肠分泌物进行GBS检测,并对检测结果进行分析。结果10 691例孕妇中GBS感染阳性1466例(13.71%);阴道-直肠分泌物的阳性率(16.30%)高于阴道分泌物(9.18%),差异有统计学意义(χ~2=106.139,P=0.000);孕晚期>30～34岁组阳性率最高(15.32%),与≤20岁组阳性率(6.36%)比较,差异有统计学意义(P<0.05),但与其他年龄组比较,差异无统计学意义(P>0.05);四季间GBS阳性率差异无统计学意义(P>0.05)。结论应用realtime PCR方法对围生期孕妇进行GBS筛查时,同时采集阴道和直肠分泌物联合检测,能明显提高GBS的检出率。GBS在妊娠晚期孕妇中的感染率较高,应加强对孕晚期孕妇的GBS筛检,阳性者及时采取干预措施,降低新生儿GBS感染,改善母婴结局。(本文来源于《中国当代医药》期刊2019年30期）
李育敏,金潇,汤花梅,阚丽娟,张水兰[8]（2019）在《2种实时荧光定量PCR仪检测HBV DNA定量结果的可比性分析》一文中研究指出目的对罗氏cobas~? z480和ABI 7500 2种荧光定量PCR分析仪测定乙型肝炎病毒核酸(HBV DNA)的结果进行比对和偏移评估。方法根据美国临床和实验室标准化协会(CLSI)EP09-C方案,采用罗氏cobas~? z480(参比系统X)和ABI 7500(待评系统Y)2种荧光定量PCR分析仪分别单次测定40份患者血清样本HBV DNA浓度,极端学生化偏差(extreme studentized deviate,ESD)法对结果进行离群值检验,绘制散点图和偏差图,拟合回归方程,计算各参数的95%置信区间(confidence interval,CI)和医学决定水平处的偏移,以≤±0.4(LOG值)为可接受标准。结果通过ESD法检验发现2个离群值,剔除离群值并补充2份相近浓度样本数据后再分析,未发现离群值。根据偏差图特征分析差值具有恒定SD变化,绘制差值频数柱状图并经单样本K-S检验,差值服从正态分布,采用均值初步估算偏移为0.086,小于可接受标准。经OLR、WLS、Deming、Passing-Baklok(P-B)模型进行回归分析,医学决定水平处的偏移均小于可接受标准。2种荧光定量PCR仪检测结果相关性好(R~2=0.997 8)。结论罗氏cobas~? z480和ABI 7500 2种荧光定量PCR分析仪测定HBV DNA的结果具有可比性。(本文来源于《临床检验杂志》期刊2019年10期）
张明瑞,周盈,李福秋,姚春丽,杨鑫[9]（2019）在《实时荧光PCR检测巴西孢子丝菌的实验方法的建立》一文中研究指出目的建立一种快速、特异、灵敏的荧光PCR方法检测巴西孢子丝菌。方法比对NCBI数据库中所有巴西孢子丝菌内转录间隔区(internal transcribed spacer, ITS)序列,在保守区域设计并合成特异性引物和探针,建立并优化荧光PCR检测方法。对优化后的方法使用标准浓度核酸进行扩增效率、灵敏度及特异度评价。通过巴西孢子丝菌小鼠感染模型,与组织培养比较,对本研究中的方法进行评价。结果建立的实时荧光PCR方法对巴西孢子丝菌的检测限为100fg。该方法对申克孢子丝菌、球形孢子丝菌、其他常见致病真菌28种、常见细菌3种以及人类基因组和小鼠基因组扩增结果均为阴性,特异度为100%。对巴西孢子丝菌感染小鼠脑、肝、肺、脾、肾及淋巴结检测与培养结果相一致。结论本研究建立的荧光PCR方法可快速、灵敏、特异地鉴定巴西孢子丝菌,并能够有效的对感染小鼠模型标本进行检测,有助于孢子丝菌病的早期特异性病原学诊断。(本文来源于《中国真菌学杂志》期刊2019年05期）
刘立兵,孙晓霞,姜彦芬,王金凤,陈志敏[10]（2019）在《食品中检测志贺氏菌的实时荧光RPA方法的建立与应用》一文中研究指出本研究旨在建立志贺氏菌的实时荧光重组酶聚合酶扩增技术real-time RPA)检测方法。根据志贺氏菌侵袭性质粒抗原H基因(ipaH)的保守序列设计引物及exo探针,利用荧光检测设备实时监控反应进程,在39℃恒温下20 min即可完成检测。该方法特异性扩增志贺氏菌,对非志贺氏菌无扩增;以志贺氏菌基因组DNA为模板,该方法的检测灵敏度为3.5×10-3ng/μL,同已发表的real-time PCR方法一致。人工污染试验表明,当鸡肉、西兰花样品污染量为9 CFU/25g,增菌时间为8 h时,即可通过real-time RPA方法检出志贺氏菌。在人工污染试验中,real-time RPA和real-time PCR检测结果一致,而前者仅需7～12 min,后者则至少需要35 min(Ct值为27～34之间)。本研究建立的志贺氏菌real-time RPA方法特异性强,灵敏性高,反应时间短,操作方便,为食源性致病菌检测提供了一个新的技术平台。(本文来源于《中国食品学报》期刊2019年10期）
实时荧光论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为建立一种快速准确检测H9亚型禽流感病毒基因的检测方法,根据GenBank中H9亚型禽流感病毒血凝素编码基因进行荧光检测引物和探针设计,建立了一种针对H9亚型禽流感病毒的荧光RT-PCR检测方法。利用该方法进行灵敏度和特异性检测,并用本方法和国家标准中的荧光RT-PCR检测方法,同时对临床样本进行检测。结果显示,仅H9亚型禽流感病毒出现了正常荧光检测曲线,而其他病毒及阴性对照均未出现;检测灵敏度为RNA终浓度10~(-4) ng/μL(1.30×10~4 copies/μL);临床样本检测结果与国标方法一致,符合率为100%。结果表明,该方法特异性强、灵敏度高,可用于H9亚型禽流感病毒检测。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
实时荧光论文参考文献
[1].戴陈伟,童琳,武昌俊,许勇,李舜.实时荧光定量PCR技术快速检测志贺氏菌[J].食品安全质量检测学报.2019
[2].王楷宬,王素春,樊擎莹,孙亚伟,康京丽.H9亚型禽流感病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用[J].中国动物检疫.2019
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[8].李育敏,金潇,汤花梅,阚丽娟,张水兰.2种实时荧光定量PCR仪检测HBVDNA定量结果的可比性分析[J].临床检验杂志.2019
[9].张明瑞,周盈,李福秋,姚春丽,杨鑫.实时荧光PCR检测巴西孢子丝菌的实验方法的建立[J].中国真菌学杂志.2019
[10].刘立兵,孙晓霞,姜彦芬,王金凤,陈志敏.食品中检测志贺氏菌的实时荧光RPA方法的建立与应用[J].中国食品学报.2019
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