蛋鸡体内AMPK酶活分布及应激对AMPK酶活影响研究

蛋鸡体内AMPK酶活分布及应激对AMPK酶活影响研究

秦玉辉[1]2003年在《蛋鸡体内AMPK酶活分布及应激对AMPK酶活影响研究》文中研究说明本试验旨在研究蛋鸡体内AMP激活的蛋白激酶(AMPK)的酶活分布,以及应激对蛋鸡生产性能、血液生化指标、AMPK及乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性的影响。试验采用单因子试验设计,分为对照(C)、饥饿(F)和热应激(H)叁个处理组。18只健康的产蛋鸡按体重一致的原则分成3组,再随机分配到3个处理组。所有蛋鸡先在常温(18±2℃)下预饲一周,然后再进行正式试验。C组在18±2℃环境饲养,自由采食,F组饥饿48小时,环境温度与对照组一样,H组在38±2℃高温(湿度40%-50%)环境生活72小时,自由采食。试验结束时,每组选取5只鸡屠宰,取骨骼肌、肝脏、十二指肠和心脏以测定其中的AMPK和ACC活性。屠宰时抽血以测定血清碱性磷酸酶(ALP)、乳酸脱氢酶(LDH)、甘油叁酯(TG)、总胆固醇(TC)和血糖(GLU)含量。 试验结果表明,饥饿引起蛋鸡产蛋率下降33.33%。同时引起血清ALP活性升高156.19%(p<0.05),LDH升高105.06%(p<0.05),甘油叁酯降低80.01%(p<0.01),血清总胆固醇和血糖分别下降27.84%和9.87%。热应激引起蛋鸡日采食量下降50.71%(p<0.01),产蛋率下降53.33%。血清ALP活性升高134.53%(p<0.05),LDH活性升高22.62%。血清TG浓度下降49.79%(p<0.01),TC下降25.49%,血糖约有下降。 蛋鸡肝脏、骨骼肌、心肌和十二指肠具有不同的AMPK酶活,其中骨骼肌和心肌AMPK活性较高,肝脏中活性最低。饥饿引起蛋鸡肝脏AMPK活性升高3.35%,ACC活性降低8.15%;十二指肠AMPK活性升高14.61%,ACC活性下降25.30%(p<0.01);骨骼肌AMPK活性升高6.29%,ACC活性则不受影响;饥饿对心肌AMPK和ACC活性没有影响。热应激引起蛋鸡肝脏AMPK活性升高16.27%,ACC活性下降22.46%(p<0.05);骨骼肌AMPK活性升高20.61%,对ACC没有影响;心肌AMPK酶活升高7.32%,ACC活性下降26.16%;十二指肠AMPK活性升高11.36%,ACC活性下降4.19%。 由以上结果得到以下结论:(1)蛋鸡肝脏、骨骼肌、心肌和十二指肠都有AMPK分布,因组织器官不同AMPK酶活存在一定差异。(2)饥饿或热应激引起蛋鸡某些组织器官AMPK激活,ACC活性下降以及血清甘油叁酯、胆固醇含量下降。结果表明AMPK与蛋鸡应激代谢有关。

秦玉辉, 张克英, 陈代文, 余冰[2]2004年在《蛋鸡体内AMPK酶活分布及应激对AMPK酶活的影响》文中认为本试验旨在研究蛋鸡体内AMP激活的蛋白激酶(AMPK)的酶活分布,以及应激对蛋鸡生产性能、血液生化指标、AMPK及乙酰辅酶A羧化酶(ACC)活性的影响,以初步了解AMPK是否与蛋鸡的应激调节有关。试验采用单因子试验设计,分为对照(C)、饥饿(F)和热应激(H)3个处理组。18只健康的产蛋鸡按体重一致的原则分成3组,再随机分配到3个处理组。所有蛋鸡先在常温(18±2℃)下预饲1周,然后再进行正式试验。C组在18±2℃环境饲养,自由采食;F组饥饿48 h,环境温度与对照组一样;

商振达[3]2014年在《饥饿应激对藏羊AMPK及相关酶活性、糖酵解及肉品品质的影响》文中指出藏羊是经过长期自然选择和人工选育下逐渐形成的、具有高原特色的物种,生活在海拔3000m-5000m的高寒地区。与其他家畜的肉品相比,羊肉具有高蛋白、高能量、低脂肪和低胆固醇等特性而受到消费者的青睐。但是,藏羊生产过程中因季节性的营养不均衡导致的饥饿应激、长途运输或者长时间的驱赶等多种因素造成的应激对藏羊的生长发育、繁殖性能和屠宰后肉品品质影响很大。一磷酸腺苷蛋白激酶(AMPK)被称为机体的“代谢感受器”,在动物适应和抵御应激反应的过程中具有重要作用。本研究通过克隆AMPK的叁个亚基Prkag、Prkaa和Prkab;检测藏羊各组织中叁个基因的表达模式;分析糖类和脂肪代谢关键酶AMPK、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)和糖原合成酶(GS)叁种酶在藏羊体内的分布后;分析了饥饿应激(正常饲养、饥饿24h、饥饿48h和饥饿后补饲四个实验组)对藏羊上述叁种酶活性、肌肉糖酵解指标和肌肉品质指标的影响,初步阐明了藏羊饥饿应激与叁种酶活性变化、肉品品质的关系。该研究结果为通过预防应激来提高肉品品质提供技术基础。主要研究结果如下:(1)研究结果表明,AMPK的Prkag、Prkaa和Prkab叁个亚基在藏羊骨骼肌、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和小肠等7种组织中均有分布,且各组织表达水平存在差异。(2)研究结果表明,饥饿应激可以使Prkag在藏羊心脏、肝脏和骨骼肌中的表达量显着升高(p<0.05);Prkaa的表达量只在藏羊的骨骼肌中有显着升高,而在心脏和骨骼肌中略有升高(p>0.05);Prkab的表达量只在藏羊的骨骼肌中有升高的趋势,在心脏和肝脏中几乎没有变化。(3)AMPK、ACC和GS叁种酶在藏羊骨骼肌、心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏和小肠等7种组织均存在,且在各组织中的酶活性存在差异。饥饿应激使藏羊骨骼肌、肝脏、肾脏和小肠组织中的AMPK酶活升高,ACC和GS酶活下降。(4)饥饿应激时间小于24h时对藏羊骨骼肌中的AMPK、ACC和GS活性、糖酵解指标以及肉品品质没有显着的影响,而饥饿应激时间超过48h时骨骼肌中的AMPK的活性升高,ACC和GS的活性下降;糖原含量减少,乳酸含量增加,pH值降低;肌肉的熟肉率和滴水损失下降,剪切力升高(p<0.05)。(5)藏羊不同部位的肌肉中,AMPK的活性大小为股二头肌>颈部肌肉>背最长肌;糖原含量为股二头肌>背最长肌>颈部肌肉;背最长肌的熟肉率和滴水损失最大;股二头肌的剪切力最大。饥饿应激对藏羊叁个部位肌肉的上述指标都有不同程度的影响,其中,对股二头肌的糖酵解和肌肉品质影响最大。本研究得到饥饿应激可以通过改变AMPK、ACC和GS的活性,影响肌肉的糖酵解速度,进而影响藏羊宰后的肌肉品质。给藏羊的生产带来很大的影响,给养殖业带来危害。

陈晓春[4]2006年在《AMPK对产蛋鸡胆固醇代谢的调节作用》文中研究表明要实现人为调控产蛋鸡的脂质代谢,降低鸡蛋胆固醇含量,必须了解产蛋鸡脂类代谢和胆固醇沉积机制。近年来研究发现由一磷酸腺苷(AMP)激活的蛋白激酶(AMP—activated protein kinase,AMPK)在能量代谢特别是在脂质代谢中起着重要作用。AMPK活化可使β-羟基-β-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶(HMGR)、乙酰辅酶A羧化酶(ACC)等磷酸化而失去活性,从而抑制胆固醇和脂肪酸的合成。由此推测“AMPK可能介导产蛋鸡胆固醇的代谢”。为了初步探讨AMPK是否参与产蛋鸡胆固醇代谢的调控,本研究在建立产蛋鸡肝脏AMPK整体活化模式的基础上,考察AMPK活性变化对产蛋鸡胆固醇代谢、鸡蛋中胆固醇沉积的调节作用及对产蛋鸡内分泌激素的影响;同时研究AMPK是否参与介导调节鸡蛋胆固醇沉积的物质—洛伐他汀的降胆固醇作用。研究包括四个试验: 试验一:考察二甲双胍(metformin)是否与AMPK的激活剂—AICAR有相似作用,可作为产蛋鸡肝细胞AMPK的激活剂,为产蛋鸡AMPK整体活化做准备。以产蛋鸡肝细胞为材料,研究添加AICAR和二甲双胍对产蛋鸡肝细胞AMPK、HMGR、ACC和细胞脂质代谢的影响。加入油酸钠为脂质合成底物。采用单因子设计,分为4个处理,分别为基础培养液(对照组),基础培养液加入0.5mmol/LAICAR、0.5mmol/L二甲双胍和1.0mmol/L二甲双胍,培养时间100min。结果表明: 1、二甲双胍具有与AICAR相似的作用,0.5mmol/L、1.0mmol/L二甲双胍组AMPK活性分别较对照组提高37.4%(P<0.05)和99.2%(P<0.01)。二甲双胍活化AMPK后,可抑制ACC和HMGR的活性。AMPK与ACC、HMGR活性呈负相关,相关系数分别为-0.696(P=0.01)和-0.317(P=0.162)。 2、加入二甲双胍可抑制产蛋鸡肝细胞甘油叁酯(TG)和总胆固醇(TC)的合成,AMPK活性与肝细胞甘油叁酯、总胆固醇的合成量呈负相关,相关系数分别为-0.448(P=0.032)和-0.493(P=0.017)。 根据本试验结果,二甲双胍能激活产蛋鸡肝细胞AMPK。 试验二:考察在日粮中添加二甲双胍(以盐酸二甲双胍形式)能否激活产蛋鸡肝脏AMPK,确定适宜的添加量,为产蛋鸡整体活化肝脏AMPK奠定方法学基础。采用单因子试验设计,试验选用高产新罗曼产蛋鸡40只分为4个处理,即基础日粮组(对照组)、基础日粮中分别添加0.6%、0.8%、1.0%的盐酸二甲双胍(metformin-HCl)。每个处理5个重复,每个重复2只鸡。正式试验期3周。试验结束时每个处理组随机选出5只鸡剖杀,取样测定肝脏AMPK、ACC、HMGR活性及

徐晶[5]2012年在《能量负平衡对小尾寒羊体内AMPK表达调控的影响》文中进行了进一步梳理近年来由于小尾寒羊养殖量增大,饲料资源季节性缺乏,在生产上常出现“一年养半年长”的现象。其主要原因是能量负平衡,直接影响了养羊业的经济效益。能量是人类赖以生存的基础,也是动植物生存的物质基础,保持能量平衡对于生存具有关键作用。而腺苷一磷酸激活的蛋白激酶(AMPK)是一种对能量平衡改变非常敏感的酶类,在应激动物的代谢中具有特殊的调节作用,一旦被激活,就会开启分解途径产生ATP,并且关闭ATP消耗过程,从而调节体内的能量平衡。本试验选择健康的3月龄体重相近的小尾寒羊18只,随机分为3组,每组6只。按国家肉羊饲养标准(NY/T816-2004)中的能量需要量配制日粮。A组采用正常营养水平日粮饲喂;B组饲喂A组采食量的60%,C组饲喂正常营养水平日粮直到屠宰前禁食72h。饲养期30d,每周空腹称重并采血,测定血清中血糖、胆固醇、甘油叁酯及碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶等相关指标。试验结束后全部屠宰,宰后立即取下丘脑、心、肝、脾、肾、骨骼肌、脂肪、十二指肠等组织样品,通过免疫组织化学和荧光定量PCR对AMPKα亚基进行定位和定量。研究能量负平衡对小尾寒羊肠道组织学形态及营养物质的利用的影响。研究禁食条件下小尾寒羊AMPKα亚基核酸水平的变化以及其下游靶蛋白糖脂代谢关键酶的活性变化。试验结果表明:1.通过免疫组织化学检测发现,小尾寒羊AMPKα亚基分布广泛,在下丘脑、肝脏、心脏、骨骼肌、脾脏、肾脏和十二指肠中均有分布。P-AMPKα(Thr172)在下丘脑、十二指肠、心脏、肝脏、骨骼肌和肾脏中均有分布。2.通过荧光定量PCR发现AMPKα1mRNA表达量在下丘脑、肝脏、心脏、骨骼肌和脂肪组织中高于对照组,但均不显着(P>0.05),十二指肠、肾脏、脾脏低于对照组且与对照组差异不显着(P>0.05)。AMPKα2mRNA表达量在下丘脑、肝脏、心脏、脾、肾和十二指肠中与对照组相比差异不显着(P>0.05),骨骼肌、脂肪表达量与对照组差异显着(P<0.05)。能量负平衡时,小尾寒羊AMPK及其下游糖脂代谢关键酶的活性也发生了变化,肝脏、脂肪、十二指肠和骨骼肌AMPK酶活处理组均高于对照组但无显着性差异(P>0.05),处理组GPAT和ACC的酶活与对照组无显着差异(P>0.05),肝脏CPT活性与对照组差异极显着(P<0.01),脂肪的CPT活性与对照组差异显着(P<0.05),十二指肠和骨骼肌CPT活性与对照组无显着差异(P>0.05)。能量负平衡时,处理组血糖与对照组之间无显着差异(P>0.05),甘油叁酯、胆固醇、碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶、谷草转氨酶、谷丙转氨酶处理组均极显着低于对照组(P<0.01)。3.能量负平衡时,小尾寒羊结肠长度显着低于对照组(P<0.05),其余肠道各段长度与对照组无显着差异(P>0.05)。结肠的鲜重显着低于对照组(P<0.05),其余各段鲜重与对照组无显着差异(P>0.05)。瘤胃的鲜重处理组极显着低于对照组(P<0.01),瓣胃、皱胃鲜重处理组显着低于对照组(P<0.05),网胃鲜重处理组与对照组之间无显着差异(P>0.05)。十二指肠、空肠、盲肠、结肠、直肠绒毛高度处理组略低于对照组(P>>0.05),回肠绒毛长度处理组略高于对照组(P>0.05)。处理组小尾寒羊瘤胃背囊上皮厚度和肌层厚度均高于对照组,但差异不显着(P>0.05),网胃、瓣胃上皮厚度和肌层厚度略低于对照组,差异不显着(P>0.05)。粗蛋白、粗脂肪、干物质、酸性洗涤纤维、中性洗涤纤维表观消化率随能量水平的下降而上升。粗蛋白质、粗脂肪的表观消化率处理组高于对照组,但无显着性差异(P>0.05),干物质和中性洗涤纤维表观消化率处理组极显着高于对照组(P<0.01),酸性洗涤纤维表观消化率处理组显着高于对照组(P<0.05)。4.禁食应激条件下,处理组AMPKα1mRNA表达量在下丘脑、肝脏、心脏、十二指肠、肾脏组织中均低于对照组,但差异不显着(P>0.05),而骨骼肌、脂肪、脾脏高于对照组(P>0.05);处理组AMPKα2mRNA表达量在骨骼肌、脂肪组织中显着高于对照组(P>0.05)。禁食组肝脏AMPK的活性略高于对照组,但差异不显着(P>0.05)。禁食组GPAT和ACC的活性均低于对照组(P>0.05)。禁食组CPT活性显着高于对照组(P<0.05)。禁食组葡萄糖浓度低于对照组(P>0.05),甘油叁酯、胆固醇的浓度显着低于对照组(P<0.05),碱性磷酸酶、乳酸脱氢酶浓度高于对照组(P>0.05),谷草转氨酶略低于对照组(P>0.05)、谷丙转氨酶高于对照组(P>0.05)。

甘玲[6]2005年在《Metformin对蛋鸡AMPK活性及脂质代谢的短期效应研究》文中研究指明研究表明Metformin能够激活实验动物体内AMPK的活性,激活的AMPK将降低动物机体中脂质及胆固醇的合成代谢。Metformin能否激活蛋鸡体内AMPK的活性,以及AMPK活性变化同蛋鸡脂质代谢之间的关系有待研究。本研究旨在考察Metformin短期内能否激活蛋鸡AMPK活性,以及激活AMPK所需的适宜剂量,为蛋鸡AMPK与脂质代谢关系的研究建立良好的AMPK激活模型。 整个论文实验分为实验一和实验二。实验期为5d。实验一旨在确定短期内,Metformin激活蛋鸡AMPK活性的最适浓度。实验设4个组,其中对照组蛋鸡采食不含Metformin的基础饲粮,另叁个组饲粮分别在基础饲粮中添加0.6%、0.8%和1%的Metformin。选取日龄、体重、产蛋率相近的蛋鸡40只,按唯一差异原则将其分为4个处理组,每个处理5个重复,每个重复2只鸡。实验开始后的第2、4d早晨,分别在每个处理组选出5只鸡,进行空腹翅静脉采血,分离血清,以测定血清脂质、血糖、胰岛素和雌二醇的含量,并用氯丙嗪麻醉、剖杀,迅速取其肝脏及卵巢(包含不同大小的卵泡),以测定肝脏、卵巢AMPK的活性、肝脏总甘油叁酯(TG)、总胆固醇(TC)及不同大小卵泡胆固醇的含量。实验二旨在排除采食量不同对实验结果的影响,考察Metformin短期内对蛋鸡AMPK活性及脂质代谢的影响。采用配对实验设计,实验分为2个组,即配对组和实验组。实验组蛋鸡采食含有0.8%Metformin浓度的日粮,自由采食,配对组日粮除不含Metformin外,日粮成分与实验组相同,两处理组蛋鸡采食量相同。选出日龄、体重、产蛋率相近的产蛋高峰期的新罗曼蛋鸡20只,按两两配对的原则随机放入两个处理组。在实验开始后的第3、5d早晨,分别在配对组选出5只鸡,进行空腹翅静脉采血,分离血清,以测定血清脂质、血糖、胰岛素和雌二醇的含量,并用氯丙嗪麻醉、剖杀,迅速取其肝脏和卵巢(包含不同大小的卵泡),以测定肝脏、卵巢AMPK的活性、肝脏总甘油叁酯、总胆固醇及不同大小卵泡胆固醇的含量。所有蛋鸡在正式实验前预饲一周。 试验一结果表明,不同浓度的Metformin均显着降低了蛋鸡实验期的采食量,其中1%浓度组降低幅度最大。各浓度Metformin处理组蛋鸡体重有降低的趋势。卵巢AMPK基础活性比肝脏低46.89%(P=-0.124)。0.6%、0.8%、1%组与对照组相比,在实验结束时,肝脏AMPK活性分别增加了13.83%、25.90%、31.10%(P=0.170)。0.8%组与对照组相比,卵巢AMPK活性提高了32.73%(P<0.05)。各处理组肝组织TG、TC含

李泽[7]2010年在《AMPK活性对宰后羊肉能量代谢和肉质的影响及其机理研究》文中提出选取蒙古杂交绵羊,测定羊肉宰后的AMPK(一磷酸腺苷活化蛋白激酶)活性、糖酵解和肉质各指标,以研究AMPK对糖酵解和肉质的影响,并分析AMPK调节肉质的可能机理。结果表明:1 AMPK广泛存在于绵羊的各组织器官中,以肺脏和骨骼肌中AMPK活性最高,其次为心肌和小肠,肝脏中AMPK酶活最低。各组织器官AMPK活性差异极显着(P<0.01)。宰后0-24h间骨骼肌的AMPK活性有极显着改变(P<0.01),呈先升高后下降的趋势,活性最高值出现在宰后1h,随后开始下降,到宰后24h活性大约下降至宰后1h时的1/2。2不同月龄羊肉的AMPK活性和糖酵解指标有很大差异,18月龄羊宰后的AMPK活性和糖酵解的速度高于6月龄羊。同一月龄羊不同部位间也具有不同的AMPK活性和糖酵解指标,这些导致了不同月龄和部位间羊肉肉质的差异。3 6月龄绵羊的AMPK活性与肌糖原含量、乳酸(LD)含量、己糖激酶(HK)活性、丙酮酸激酶(PK)活性和糖酵解潜力(GP)极显着正相关(P<0.01),与pH24值和L*值极显着负相关(P<0.01),与a*值显着正相关(P<0.05),与pHi值和乳酸脱氢酶(LDH)活性正相关,与剪切力、熟肉率和滴水损失负相关,但差异均不显着(P>0.05);18月龄绵羊的AMPK活性与HK活性极显着正相关(P<0.01),与pH24值极显着负相关(P<0.01),与肌糖原含量、PK活性、LDH活性和a*值显着正相关(P<0.05),与滴水损失和L*值显着负相关(P<0.05),与pHi值、LD和GP正相关,与剪切力和熟肉率负相关,但差异均不显着(P>0.05)。4不同贮藏温度对宰后羊肉的AMPK活性、糖酵解和肉质各指标均有影响。贮藏温度越高,AMPK活性越高,糖酵解速度越快,羊肉越早进入僵直完成成熟过程;反之贮藏温度越低,AMPK活性越低,糖酵解速度越慢,羊肉完成成熟的过程越长。5随AMPK活性的升高,糖酵解酶的活性上升,糖酵解和宰后肌肉成熟的速度加快;反之随AMPK活性的降低,糖酵解酶的活性下降,糖酵解和宰后肌肉成熟的速度减慢。综合上述研究结果得到:AMPK活性与糖酵解和肉质各指标之间具有显着的相关关系。通过施加不同的条件,可以改变AMPK的活性和糖酵解,达到改变肉质的目的。通过AMPK的活性调控,得到AMPK改变肉质的可能机理是,AMPK通过调节糖酵解的关键酶HK、PK和重要酶LDH的活性,改变了糖酵解的理化指标如糖原含量、LD和pH值,使糖酵解的程度和速度发生改变,最终影响了宰后肌肉的成熟过程。

李志琼[8]2007年在《α-亚麻酸对产蛋鸡脂质代谢及蛋黄胆固醇沉积的影响及其机理》文中指出本试验通过研究α-亚麻酸对产蛋鸡生产性能、血液和组织脂质含量、鸡蛋胆固醇含量、内分泌及相关酶的活性与酶基因表达的影响,旨在探明α-亚麻酸对产蛋鸡脂质代谢和胆固醇沉积的营养效应及可能机制,为深入认识蛋鸡的脂质代谢和鸡蛋胆固醇沉积规律与营养调控积累资料。试验一α-亚麻酸对产蛋鸡生产性能和鸡蛋脂质含量的影响本试验拟研究日粮添加ALA对产蛋鸡生产性能和鸡蛋脂质含量的影响。试验采用单因素试验设计,共设6个处理,日粮中ALA添加量分别为0.0%(对照组)、0.5%、1.0%、2.0%、3.0%和4.0%。试鸡为210日龄海兰褐商品蛋鸡,试验期28天。结果表明:①随着ALA添加量的增加,试验组蛋重增加,料蛋比降低。蛋重以3.0%组最高(p<0.05),料蛋比以4.0%组最低(p<0.01);②随着ALA添加量的增加,蛋黄中SFA和n-6/n-3的含量呈直线或二次曲线下降,而C18∶2、C18∶3、C20∶5和C22∶6的含量则呈直线或二次曲线增加(p<0.01);③日粮添加ALA可降低蛋黄TG和TC含量(p<0.05或p<0.01)。本试验结果表明,饲粮中添加1~4.0%ALA能提高产蛋鸡的蛋重,降低料蛋比,降低蛋黄的TG和TC含量,增加蛋黄PUFA含量。试验二α-亚麻酸对产蛋鸡血液和组织脂质含量的影响本试验在试验一的基础上考察了ALA对产蛋鸡血液和组织脂质的影响。结果表明:①第4周血清TG、TC和VLDL-C随添加ALA量呈二次曲线降低(p<0.05),其最适ALA水平分别为:4.19%、4.19%和4.26%。②大卵泡和中卵泡的TC以及大卵泡TG含量均以1.0%组最低(p<0.01),中卵泡TG含量以2.0%组最低。③肝脏中TC含量以1.0%组最低,TG以3.0%组最低(p<0.01)。本试验结果表明,饲粮中添加α-亚麻酸能降低血液、卵泡和肝脏的TG和TC含量。试验叁产蛋鸡血脂分泌量测定方法的研究本试验目的是研究建立测定产蛋鸡血脂分泌量的方法。选用15只24周龄、平均体重1.5kg的罗曼粉壳产蛋鸡,按单因子设计,共设5个处理,分别从翅静脉注射TWR 0、100、200、300和400 mg/kg体重,每只注射溶液总体积均为4ml(缓冲液为生理盐水)。预试5d,正试2d。每只产蛋鸡在注射TWR之前及注射后0.5、1、2、4、8、12、24、36和48h从翅静脉采血,测定血清TG含量。结果表明,从第8h起,注射TWR产蛋鸡的TG含量均显着高于注射生理盐水的产蛋鸡(p<0.05),但36小时后不同注射剂量下的TG含量无显着差异(p>0.05)。注射TWR产蛋鸡在0-8h的TG积累曲线均呈线性增加,到8h达最大值,此后逐渐下降。根据血清TG浓度呈线性增加的回归方程,计算出采食产蛋鸡血脂分泌量为0.1216 mmol/(min·kg体重)。在TG保持线性增加的时间区域内,TWR的注射剂量影响测定结果,其适宜注射量为200~300mg/kg体重。试验四α-亚麻酸对产蛋鸡脂质合成和分泌的影响本试验目的是进一步探明ALA对产蛋鸡脂质合成和分泌的影响。试验设二个处理,即基础日粮(不添加ALA,对照组)和添加4.0%ALA日粮两个处理,每个处理组设5个重复,每个重复10只24周龄罗曼粉壳蛋鸡。试验期14天。结果表明:①添加ALA可提高蛋重,降低料蛋比和鸡蛋TC含量;②肝脏中TG含量和脂肪酸合成酶(FAS)活性极显着下降(P<0.01);③添加ALA使第2周血清TG、VLDLy极显着下降(p<0.01),血脂分泌量降低9.4%;④肝素后血浆中脂蛋白脂酶(LPL)活性极显着升高(p<0.01)。本试验结果表明,添加4.0%ALA可降低蛋鸡的脂质合成和分泌,加速外周组织对脂质的利用,从而降低蛋黄胆固醇含量。试验五α-亚麻酸对产蛋鸡脂质代谢的调节机理研究本试验在试验二和试验四基础上,深入考察了日粮中添加ALA对罗曼粉壳蛋鸡内分泌激素、apoB、相关酶活和基因表达的影响,以探讨ALA调节脂质代谢和鸡蛋胆固醇含量的可能机制。结果表明:①与对照组相比,添加4.0%ALA组第2周血清雌二醇浓度增加4.29%(p<0.05),胰岛素浓度降低62.06%(p<0.01);②添加4.0%ALA组血清apoB下降7.31%,肝脏中apoB升高80.52%(p<0.01):③日粮添加ALA组肝脏中AMPK酶活增加,添加1.0%组最高;ACC和HMGR活力下降,分别在2.0%和3.0%组最低(p<0.05或p<0.01):④日粮添加4.0%ALA组ACC和HMGR基因表达下降,其中ACC基因表达下降33.99%(p<0.01)。本试验结果表明,添加ALA可通过改变内分泌激素、影响相关酶的基因表达和酶活、改变血清和肝脏中apoB含量来调节蛋鸡的脂质代谢,从而降低蛋黄胆固醇含量。通过上述试验结果表明:在日粮中添加ALA可提高蛋鸡产蛋性能,抑制肝脏脂质合成与分泌,降低血液脂质含量,提高鸡蛋n-3PUFA含量,降低胆固醇含量;ALA的作用机制与蛋鸡内分泌激素调节、相关酶基因的表达和酶活改变有关。

杜超[9]2016年在《日粮中添加二甲双胍对育肥猪生产性能、血液指标、肉质以及AMPK基因表达量的影响》文中研究说明本次试验用辽宁省铁岭市昌图县国美牧业公司猪场120头80kg左右的“长大”二元杂交猪为研究对象,在其基础日粮中加入不同剂量的二甲双胍,试验育肥猪随机分为5个处理组,每组3个重复,每个重复8头猪。第一组为对照组:基础日粮;第二组是基础日粮+100mg/kg二甲双胍;第叁组为基础日粮+200mg/kg二甲双胍;第四组为基础日粮+300mg/kg二甲双胍;第五组为基础日粮+400mg/kg二甲双胍;各试验组饲养管理条件一致。通过饲养试验、屠宰试验、肉品质指标检测及血液指标检测,初步探究二甲双胍对育肥猪生长性能、血液指标及肉品质调控的作用机理,明确其对腺苷一磷酸激活蛋白激酶(AMPK)基因表达量的影响。结果表明:1.日粮中添加二甲双胍育肥猪的生产性能有一定程度降低,二甲双胍能显着降低育肥猪平均日增重(P<0.05)和提高料肉比(F/G)(P<0.05),对日采食量没有影响。2.日粮中添加二甲双胍能够提高育肥猪血清中肌酸激酶(P>0.05)和乳酸脱氢酶(P<0.05)的水平,降低胆固醇(CHO)(P<0.05)、甘油叁酯(TG3)(P<0.05)糖原(P>0.05)和乳酸的水平(P<0.05)3.日粮中添加二甲双胍对猪肉胴体性状具有一定的改善作用。二甲双胍显着提高了育肥猪眼肌面积(P<0.05),并显着降低背膘厚(P<0.05)。二甲双胍对胴体瘦肉率、屠宰率和脂肪率有一定的改善效果,但未达到显着水平(P>0.05)。其中,400mg/kg剂量对胴体性状改善效果最好。4.日粮中添加二甲双胍显着降低了育肥猪的滴水损失(P<0.05)。二甲双胍对猪肉的剪切力、pH、大理石纹和肉色等肉质指标有一定改善作用,但未达到显着水平(P>0.05)。5.日粮中添加二甲双胍显着提高猪背最长肌中AMPK基因表达量(P<0.05),其中400mg/kg的二甲双胍组的AMPK表达量高于其他添加量各试验组,与对照组相比,达到显着水平(P<0.05)。综上所述,二甲双胍够调节糖类、脂类代谢有关血液指标,改善育肥猪的猪肉品质,并提高AMPK基因的表达量。但高剂量的二甲双胍可以降低育肥猪的生产性能。从本试验结果可知,日粮中添加200mg/kg二甲双胍可以保证育肥猪的生产性能,并可以改善育肥猪的肉质性能。单从肉质改善效果来看,添加400mg/kg二甲双胍对育肥猪的肉质改善效果最好

杨家昶[10]2016年在《应激对肉鸡胆汁酸代谢影响机制的研究》文中认为为探索应激对肉鸡胆汁酸代谢通路的具体影响,及其对脂肪代谢和AMPK(腺苷酸活化蛋白激酶)通路的影响及联系,本课题进行了以下研究。本研究通过糖皮质激素处理离体肝细胞,探索胆汁酸代谢通路和脂肪代谢相关基因的变化情况。用200nmol/L、500nmol/L、1000nmol/L的糖皮质激素磷酸钠和Williams’E培养基分别处理原代培养的肝细胞。试验结果显示,糖皮质激素处理的肝细胞LXR(肝脏X受体)、NTCP(钠离子牛磺胆盐共转运体)、FATP-1(脂肪酸转运蛋白1)、SREBP-1C(固醇调节元件结合蛋白1)、APOB100(载脂蛋白B)的mRNA表达量显着降低(P<0.05),BSEP(胆盐输出泵)的mRNA表达量显着升高(P<0.05)。说明糖皮质激素处理降低了肝细胞中的脂肪代谢,增加了胆汁酸的分泌。本研究通过热应激、糖皮质激素和能量水平处理,研究不同应激源对胆汁酸代谢通路和脂肪代谢的影响。热应激试验:选取28日龄体重相近的肉鸡48只,随机分为四个处理组,分别为72小时热应激处理组(31±1℃)、72小时对照组(25±1℃)、24小时热应激处理组(31±1℃)和24小时对照组(25±1℃)。糖皮质激素试验:选取28日龄体重相近的肉鸡48只,随机分为四个处理组,分别为72小时糖皮质激素处理组(DEX,2.0mg/kg体重)、72小时对照组(生理盐水,2.0mg/kg体重)、24小时糖皮质激素处理组(DEX,2.0mg/kg体重)和24小时对照组(生理盐水,2.0mg/kg体重)。不同能量水平试验:选取1日龄体重相近的雄性AA肉仔鸡216只,随机分为3个组:低能量组,高能量组,对照组。每个处理组有6个重复,每个重复有12只鸡,低能量组饲粮能量水平为2900kcal/kg,高能量组饲粮能量水平为3500 kcal/kg,对照组饲粮能量水平为3200kcal/kg。试验结果显示,热应激显着增加了FATP-1、SREBP-1C、APOB100mRNA表达量(P<0.05),糖皮质激素显着降低了FXR(类法尼醇X受体)、LXR、CYP7A1(胆固醇7-羟化酶)、FATP-1、SREBP-1C、APOB100的mRNA表达量(P<0.05),高能日粮显着增加了SREBP-1C的mRNA表达量(P<0.05)。说明,热应激和高能日粮都促进了脂肪代谢,糖皮质激素则降低了脂肪代谢和胆汁酸的合成。本研究通过在日粮中添加胆汁酸,研究体外添加胆汁酸对胆汁酸代谢通路和脂肪代谢的影响。选取1日龄体重相近的雄性AA肉仔鸡200只,随机分为5个组:其中4个试验组日粮中添加胆汁酸的剂量分别为100g/t、200g/t、300g/t、400g/t,1个对照组。每个处理组有4个重复,每个重复有10只鸡。试验结果显示,添加400g/t的胆汁酸能显着提高肉鸡的生产性能,血液中LDL(低密度脂蛋白)含量显着降低(P<0.05),肝脏中FXR的mRNA表达量显着降低(P<0.05),SREBP-1C、BSEP和NTCP的mRNA表达量显着升高(P<0.05)。说明,日粮添加胆汁酸降低了体内胆汁酸的合成,增加了胆汁酸的肝肠循环。本研究通过不同能量水平的日粮饲喂应激的肉仔鸡,研究不同能量水平对应激影响的胆汁酸代谢通路是否有缓解作用。选取1日龄体重相近的雄性AA肉仔鸡432只,随机分为6个组:低能量应激对照组,高能量应激对照组,标准能量应激对照组,低能量应激组,高能量应激组,标准能量应激组。每个处理组有6个重复,每个重复有12只鸡。研究结果发现,改变日粮的能量水平加强了应激对肉鸡脂肪代谢的影响。本研究表明,热应激和高能日粮增加了肉鸡肝脏中的脂肪代谢。而糖皮质激素则降低了肉鸡肝脏中胆汁酸的合成,同时减少脂肪的代谢。日粮中添加胆汁酸提高了肉鸡的生产性能,减少了胆汁酸的合成,促进了胆汁酸的分泌。肉鸡应激时,糖皮质激素能减少脂肪的代谢,改变日粮的能量水平会增强应激对肉鸡的影响。

参考文献:

[1]. 蛋鸡体内AMPK酶活分布及应激对AMPK酶活影响研究[D]. 秦玉辉. 四川农业大学. 2003

[2]. 蛋鸡体内AMPK酶活分布及应激对AMPK酶活的影响[C]. 秦玉辉, 张克英, 陈代文, 余冰. 中国畜牧兽医学会动物营养学分会——第九届学术研讨会论文集. 2004

[3]. 饥饿应激对藏羊AMPK及相关酶活性、糖酵解及肉品品质的影响[D]. 商振达. 青海大学. 2014

[4]. AMPK对产蛋鸡胆固醇代谢的调节作用[D]. 陈晓春. 四川农业大学. 2006

[5]. 能量负平衡对小尾寒羊体内AMPK表达调控的影响[D]. 徐晶. 吉林农业大学. 2012

[6]. Metformin对蛋鸡AMPK活性及脂质代谢的短期效应研究[D]. 甘玲. 四川农业大学. 2005

[7]. AMPK活性对宰后羊肉能量代谢和肉质的影响及其机理研究[D]. 李泽. 内蒙古农业大学. 2010

[8]. α-亚麻酸对产蛋鸡脂质代谢及蛋黄胆固醇沉积的影响及其机理[D]. 李志琼. 四川农业大学. 2007

[9]. 日粮中添加二甲双胍对育肥猪生产性能、血液指标、肉质以及AMPK基因表达量的影响[D]. 杜超. 沈阳农业大学. 2016

[10]. 应激对肉鸡胆汁酸代谢影响机制的研究[D]. 杨家昶. 山东农业大学. 2016

标签:;  ;  ;  ;  ;  ;  ;  

蛋鸡体内AMPK酶活分布及应激对AMPK酶活影响研究
下载Doc文档

猜你喜欢