导读:本文包含了剪接因子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:因子,细胞,家蚕,丝氨酸,选择性,蛋白,丙酮酸。
剪接因子论文文献综述
熊焰,汪奇柏[1]（2019）在《丝氨酸和富含精氨酸剪接因子1基因通过调控翻译过程影响神经胶质瘤U87细胞的增殖》一文中研究指出目的:探讨丝氨酸和富含精氨酸剪接因子1(SRSF1)基因对神经胶质瘤U87细胞增殖和细胞周期的影响及其作用机制。方法:采用基因沉默技术抑制SRSF1基因表达,获得2种不同靶点的SRSF1稳定沉默细胞系(shSRSF1-1组和shSRSF1-2组)。用CCK-8法检测SRSF1沉默对神经胶质瘤U87细胞的增殖活性,流式细胞技术检测SRSF1沉默对U87细胞周期的影响,qPCR和WB实验检测SRSF1沉默对细胞分裂相关基因(CEP70和SMC4)m RNA和蛋白表达水平的影响,用WB实验检测SRSF1沉默对翻译起始蛋白4E-BP1磷酸化的影响。结果:shSRSF1-1组和shSRSF1-2组U87细胞中SRSF1蛋白表达均明显低于对照组(P<0.01),shSRSF1-1组和shSRSF1-2组U87细胞增殖能力被显着抑制(P<0.01),并且处在G2期的细胞数量明显高于对照组(P<0.01)。与对照组比较,shSRSF1-1组和shSRSF1-2组细胞中细胞分裂相关基因CEP70和SMC4 mRNA水平无明显差异(P>0.05),但是蛋白表达水平明显降低(P<0.01)。shSRSF1-1组和shSRSF1-2组U87细胞中翻译起始蛋白4E-BP1磷酸化程度要明显低于对照组(P<0.01)。结论:沉默SRSF1基因通过降低翻译起始蛋白4E-BP1磷酸化水平抑制细胞分裂相关基因CEP70和SMC4的翻译过程,最终使细胞阻滞在G2期,进而减弱神经胶质瘤U87细胞的增殖能力。(本文来源于《中国肿瘤生物治疗杂志》期刊2019年09期）
张倩婧[2]（2019）在《选择性剪接因子SF3b1在人宫颈癌HeLa细胞辐射敏感性中的作用与机制研究》一文中研究指出宫颈癌是女性最常见的生殖系统恶性肿瘤,其发病率和病死率在女性生殖系统恶性肿瘤中排第二位。放射治疗是宫颈癌治疗的主要手段之一,宫颈癌细胞对放疗射线的辐射抗性是宫颈癌治疗的一个重要问题,提高宫颈癌细胞对放疗射线的敏感性是许多研究人员致力的重点。最近,越来越多的证据表明,Pre-mRNA选择性剪接模式的变化在癌症和其他疾病中起着至关重要的作用。近年来,随着针对剪接体的一类新型药物的批准应用,选择性剪接在肿瘤中的应用受到了广泛关注,剪接体已成为癌症治疗的的一个有吸引力的靶点,其中剪接体的亚单位SF3b1主要参予细胞内基因转录、mRNA稳定、选择性剪接等功能。通过文献调研,我们选择靶向剪接体SF3b1的小分子物质pladienolide B作为下调SF3b1的抑制剂,来探究宫颈癌HeLa细胞下调SF3b1后,转录因子p73基因的不同剪接体调控情况、与细胞凋亡通路相关的关键蛋白表达及细胞凋亡和周期阻滞的诱导情况,并探究了pladienolide B下调SF3b1后对HeLa细胞辐射敏感性的影响。我们的实验结果显示:(1)在0-2 nM pladienolide B浓度范围内,SF3b1以剂量和时间依赖性的方式抑制HeLa细胞的增殖,并诱导G2/M期周期阻滞和细胞凋亡,用pladienolide B下调SF3b1可诱导促凋亡的p73剪接体Tap73增加,从而上调Bax/Bcl-2比率,细胞色素c释放和caspase-3的表达。结果显示SF3b1在人宫颈癌细胞的周期阻滞,凋亡诱导和p73剪接中起关键作用,提示SF3b1可以用作宫颈癌治疗的潜在靶点。(2)利用pladienolide B下调SF3b1协同X射线及~(12)C~(6+)离子束辐照HeLa细胞,2 Gy X射线和~(12)C~(6+)离子束辐照迭加0.025 nM pladienolide B的处理组的细胞增殖和细胞克隆形成率显着低于单纯照射组,并且诱导细胞凋亡和周期阻滞,2 Gy~(12)C~(6+)离子束则有更明显的凋亡诱导作用。说明pladienolide B下调SF3b1协同X射线及~(12)C~(6+)离子束都增强了HeLa细胞的辐射敏感性,提示pladienolide B或可在临床上作为协同放射进行治疗的药物。(本文来源于《中国科学院大学(中国科学院近代物理研究所)》期刊2019-06-01）
刘志勇[3]（2019）在《可变剪接因子SF3B4在肝细胞肝癌中的功能及其机制研究》一文中研究指出研究目的肝癌是全球第二大肿瘤致死性疾病,近20年来,肝癌发生率和死亡率逐年增长。在我国,每年约有40万例患者确诊肝癌,同时有超过34万例肝癌患者死亡,占全球肝癌总发病率和总死亡率50%以上。肝癌发病隐匿,前期症状不明显,患者确诊时大多处于肿瘤中晚期阶段,治疗难度高,患者预后较差,已经成为严重威胁国民健康的疾病之一。因此,探寻肝癌发生机制是现阶段我国肝癌研究领域实现肝癌早期诊断及治疗的关键。肿瘤的发生发展是一个复杂的过程,可涉及到众多肿瘤基因的突变及表观遗传修饰。可变剪接是真核生物中普遍存在的一种基因调控方式,对基因表达的多样性及物种的生物学发展具有十分重要的作用。有研究发现可变剪接在相关疾病及肿瘤中也发挥作用,并对患者的诊断治疗产生重要影响。SF3B4属于可变剪接分子,前期有研究发现其在肝癌患者中表达水平显着升高,提示其可能对肝癌的发生具有一定的作用,但是SF3B4在肝癌中的功能及其相关分子机制仍不清楚。本研究的主要目的是阐明验证SF3B4在肝癌中的表达情况,探寻其分子功能,阐明SF3B4在肝癌中的调控机制。研究方法针对本课题的研究目的采用以下研究方法:1.利用公共数据库及临床组织样本验证SF3B4及miRNA-133b在肝癌组织和正常肝组织中表达水平,并分析二者与肝癌患者的预后关系。2.通过TargetScan数据库预测SF3B4与miRNA-133b的相关性,并通过双荧光素酶报告基因、qPCR及Western-blot实验确定二者关系。3.构建SF3B4过表达载体、SF3B4小干扰RNA及干扰慢病毒来过表达及敲低SF3B4。通过miRNA-133b mimic和抑制剂来过表达和抑制miRNA-133b。4.通过CCK8、EdU、transwell及划痕实验,在体外验证SF3B4和miRNA-133b对肝癌细胞表型及功能的影响。构建小鼠荷瘤模型及肿瘤尾静脉注射肿瘤转移模型,体内验证SF3B4功能。研究结果SF3B4在肝癌组织和肝癌细胞系中表达升高,肝癌患者SF3B4表达水平增高提示预后较差。在肝癌细胞系中,SF3B4高表达起到癌基因作用,敲除SF3B4能够有效抑制肝癌细胞增殖和侵袭。通过生物信息学分析,我们发现SF3B4与miRNA-133b存在稳定的结合位点,后续通过双荧光素酶报告基因,证实了SF3B4能够与miRNA-133b结合。miRNA-133b在肝癌组织中表达降低,与SF3B4表达水平呈负相关。miRNA-133b抑制剂可有效抑制miRNA-133b表达,并可促进肝癌细胞进展。而过表达miRNA-133b能够抑制SF3B4表达,同时能够削弱肝癌中SF3B4的癌基因效果。miRNA-133b还可影响SF3B4相关信号通路,过表达miRNA-133b能够促进SF3B4下游KLF4和KIP1表达,抑制SNAI2。结论在本研究中,我们发现SF3B4在肝癌组织中表达水平升高,而miRNA-133b在肝癌组织中表达降低,二者呈负相关性。SF3B4和miRNA-133b在肝癌发生中均具有重要作用,同时miRNA-133b还可调控SF3B4剪接效果,影响其下游信号通路,进而影响肝癌细胞进程。这些结果提示miRNA-133b/SF3B4调控通路可作为肝癌治疗的潜在目标靶点。(本文来源于《中国人民解放军海军军医大学》期刊2019-05-17）
张娇娇[4]（2019）在《剪接因子PQBP1促进卵巢癌发生发展的作用机制》一文中研究指出卵巢癌是女性生殖器官常见的恶性肿瘤,病死率一直位居妇科恶性肿瘤之首。高级别浆液性卵巢癌(High-grade Serous Ovarian Cancer,HGSOC)是恶性程度最高的亚型,占卵巢癌的70%～8 0%,且具有发病隐匿、侵袭能力强、预后差等特点。大多数卵巢癌患者由于缺乏特异性症状和早期筛查方法,发现时多已确诊为晚期,常死于肿瘤复发和耐药,晚期患者的5年生存率仅为20%～30%。因此,阐明卵巢癌发生发展的分子机制,筛选有效的分子靶点,对于卵巢癌的早期诊断和治疗具有重要意义。异常的选择性剪接在恶性肿瘤发生发展中起到重要作用,肿瘤细胞通过异常的选择性剪接产生有利于肿瘤增殖、凋亡、缺氧、血管生成、免疫逃逸和转移等行为的剪接异构体,进而促进肿瘤的发生发展。卵巢癌中异常剪接的分子机制与癌症进展密切相关。课题组通过转录组及蛋白质组学分析发现。与卵巢癌发生发展相关的信号通路中,剪接体通路排在首位,进一步分析134个主控剪接因子,发现有33个在卵巢癌中上调,提示异常的选择性剪接在卵巢癌中发挥关键作用。卵巢癌中存在许多基因转录本的差异剪接,在卵巢癌细胞中CD44s高表达,CD44v低表达,CD44s通过下调剪接因子ESRP1介导TGFβ1诱导的EMT通路,从而诱导卵巢癌细胞侵袭迁移,随后获得干细胞样特征和耐药;骨桥蛋白(OPN)转录本OPNc在卵巢癌中特异性表达,而不是OPNa或OPNb,促进卵巢癌细胞增殖、迁移、侵袭、体内肿瘤形成等恶性行为;Bcl-x是凋亡基因bcl-2家族的一员,Bcl-x基因的pre-mRNA选择性剪接产生Bcl-xS和Bcl-xL,这两种亚型分别与促进和抑制凋亡有关,Bcl-xL的过表达抑制肿瘤细胞凋亡、促进转移和化疗耐药并与不良临床预后有关,而Bcl-xS可诱导细胞凋亡,使细胞对化疗药物敏感。多聚谷氨酰胺结合蛋白 1,即PQBP1(polyglutamine binding protein 1,PQBP1)是课题组发现的在卵巢癌中表达上调的剪接因子之一,是一个进化上高度保守的智力发育相关蛋白,其突变会导致X染色体相关的“Renpenning综合征”。PQBP1与RNA聚合酶Ⅱ等转录因子相互作用参与转录调控。除此之外,PQBP1与多个剪接因子相互作用,参与人类细胞中许多基因mRNA的选择性剪接。功能缺失的PQBP1降低了 SF3B1与底物mRNA的关联,导致选择性剪接模式发生显着变化。PQBP1在卵巢癌中表达水平上调,但是在卵巢癌发生发展中发挥怎样的作用,具体参与了哪些异常剪接事件,还有待进一步研究。研究目的本课题拟明确PQBP1在HGSOC中的表达;探究PQBP1在卵巢癌细胞的增殖、侵袭迁移、凋亡等恶性生物学行为中发挥怎样的作用;最后明确剪接因子PQBP1调控的下游靶基因和选择性剪接事件。研究方法qPCR、Western blotting及免疫组化检测卵巢癌中PQBP1的表达情况;TCGA数据库分析表达情况及临床预后;分子生物学方法构建PQBP1慢病毒过表达质粒、慢病毒敲低质粒,建立PQBP1过表达、敲低稳转细胞系;平板克隆、MTT、EdU实验证明PQBP1对卵巢癌细胞增殖的影响,Western blotting检测周期相关蛋白的表达;Transwe11实验探究PQBP1对卵巢癌细胞侵袭迁移的影响,Western blotting实验检测EMT通路蛋白的表达情况;流式细胞术检测PQBP1对卵巢癌细胞凋亡的影响,Western blotting检测凋亡蛋白的表达;RT-PCR、qPCR检测PQBP1对内源性Bcl-x基因选择性剪接的影响;构建Bcl-x minigene质粒,RT-PCR方法检测PQBP1对外源性Bcl-x基因选择性剪接的影响。研究结果1.PQBP1在卵巢癌中显着高表达并与患者预后相关课题组前期转录组及蛋白质组学分析发现剪接因子PQBP1在卵巢癌中高表达。收集正常输卵管伞组织16例,高级别浆液性卵巢癌组织29例进行验证,qPCR结果显示PQBP1在高级别浆液性卵巢癌中普遍高表达(*P<0.05),TCGA数据分析发现,卵巢癌中PQBP1存在基因扩增及mRNA高等变异(1 1%),并且PQBP1的高表达与卵巢癌患者预后差正相关(p=0.025)。2.PQBP1促进卵巢癌细胞增殖、侵袭迁移、体内成瘤等恶性行为利用慢病毒系统构建PQBP1高表达和低表达稳转细胞系,用于功能实验研究。平板克隆实验显示过表达PQBP1能够明显增强卵巢癌细胞克隆形成能力,敲低PQBP1能够明显降低卵巢癌细胞克隆形成能力;MTT实验显示过表达PQBP1能够促进卵巢癌细胞增殖,敲低PQBP1能够降低卵巢癌细胞增殖;检测周期相关蛋白的表达,发现敲低PQBP1的细胞p53和p21表达升高,CyclinD1、CyclinE表达下调。以上实验结果说明PQBP1在体外能够显着促进卵巢癌细胞的增殖。为进一步研究PQBP1在卵巢癌中的生物学功能,课题组利用Transwe1l实验检测PQBP1对卵巢癌细胞侵袭力的影响,发现过表达PQBP1增强卵巢癌细胞侵袭力,而敲低PQBP1则降低卵巢癌细胞侵袭迁移能力,证明PQBP1促进卵巢癌细胞的侵袭转移,增加癌细胞的恶性程度。Western blotting检测了 EMT通路相关蛋白的表达,发现过表达PQBP1促进间质表达相关标记物Vimentin、P-Catenin、N-Cadherin、Claudin-1、Snail、Slug等蛋白的表达,降低上皮表达相关标记物E-Cadherin、ZO-1等蛋白的表达,敲低PQBP1反之。以上结果显示PQBP1促进卵巢癌细胞的侵袭及EMT进程。体内成瘤实验显示:相比于对照组,过表达PQBP1(HEY细胞系)明显增强裸鼠皮下成瘤能力,肿瘤生长速率、成瘤重量均明显高于对照组。综上所述,剪接因子PQBP1促进卵巢癌细胞的增殖、侵袭及体内成瘤能力,发挥癌基因的作用。3.PQBP1通过调控Bcl-x基因的选择性剪接抑制卵巢癌细胞凋亡Annexin/PI双染检测细胞凋亡发现,过表达PQBP1显着抑制卵巢癌细胞凋亡,敲低PQBP1促进卵巢癌细胞凋亡。Western blotting检测凋亡相关蛋白的表达,发现PQBP1促进Bcl-2的表达,抑制Bax的表达。qPCR检测发现卵巢癌细胞系中敲低PQBP1影响一系列凋亡因子的表达,其中包括Bcl-x。RT-PCR检测PQBP1影响内源性Bcl-x基因的选择性剪接,促进抑凋亡转录本Bcl-xL的表达,抑制促凋亡转录本Bcl-xS的表达。为了进一步验证PQBP1对Bcl-x基因的调控,我们构建了Bcl-x minigene质粒检测PQBP1对外源性Bcl-x基因选择性剪接的影响,发现PQBP1促进Bcl-xL的表达,抑制Bcl-xS的表达。结论1.PQBP1在卵巢癌中显着高表达并与卵巢癌患者预后差相关2.PQBP1促进卵巢癌细胞增殖、侵袭迁移、体内成瘤等恶性行为3.PQBP1调控Bcl-x基因的选择性剪接,促进抑凋亡转录本Bcl-xL的表达,抑制促凋亡转录本Bcl-xS的表达,进而抑制卵巢癌细胞凋亡(本文来源于《山东大学》期刊2019-05-12）
茅缪伟,胡缪,杨弋,Yajie,Qian,Huanhuan,Wei[5]（2019）在《利用机器学习构建反式剪接因子活性的预测模型》一文中研究指出文章简介90%以上的人类基因进行选择性RNA剪接,从而极大增加了蛋白组的多样性,这是基因表达最重要的调控方式之一。这一过程通常由前体mRNA中的顺式元件特异性招募反式剪接因子来调控。人类基因组编码超过1500(本文来源于《科学新闻》期刊2019年02期）
张志林[6]（2019）在《家蚕微孢子虫丙酮酸激酶基因的克隆分析与剪接因子的功能初探》一文中研究指出微孢子虫(Microsporidia)是寄生范围广的单细胞真核生物,家蚕微孢子虫(Nosema bombycis)是家蚕主要的传染性疾病微粒子病的病原体,给蚕业造成巨大的经济损失。家蚕微孢子虫体内没有叁羧酸循环,但具有糖酵解(Glycolysis)途径。糖酵解过程中有叁个关键反应,分别是葡萄糖在己糖激酶的作用下转化为6-磷酸葡萄糖、6-磷酸果糖在磷酸果糖激酶的作用下转化为1,6-二磷酸果糖以及磷酸烯醇式丙酮酸在丙酮酸激酶(Pyruvate kinase)的作用下转化为丙酮酸,这叁步均是不可逆反应。剪接因子(Splicing factor)是真核生物中RNA编辑的重要元件,经过剪接因子剪接可以产生许多具有功能的、带有编码信息的mRNA,对于生物体最基本的生命活动至关重要,同时对于真核生物基因正确表达相应蛋白也是不可或缺的一步。本课题对家蚕微孢子虫丙酮酸激酶基因和剪接因子基因及二者所编码的蛋白质做了研究,得到如下结果:(1)通过检索发现家蚕微孢子虫的丙酮酸激酶共有两个亚型,每个亚型各有3个拷贝。系统发育树和多序列比对结果的表明,家蚕微孢子虫丙酮酸激酶M2亚型的其中两个拷贝(EOB11679.1和EOB11685.1)相似性较高,可能具有相似的功能;选取家蚕微孢子虫丙酮酸激酶基因的其中一个拷贝(NbPK-2,GenBank accession number:KB909845.1)及其氨基酸序列(NbPK-2,GenBank accession number:EOB11679.1)进行研究。其生物信息学分析结果显示:二级结构预测结果显示NbPK-2含有38%的螺旋,21%的延伸片段,40%无规则卷曲;NbPK-2中无序化区域约占5%,其余均是有序化片段;信号肽预测结果表明序列无信号肽。成功克隆出NbPK-2(KB909845.1)基因,该基因序列长度为1 359 bp,是一个完整的开放阅读框,编码452个氨基酸。实时荧光定量PCR(q-PCR)结果显示在接种微孢子虫后的第2 h,NbPK-2的相对表达量最高;此后一直到第24 h,NbPK-2的表达量都处于相对较高的水平;从第48 h开始,相对表达量出现了下降趋势,到第144 h到达最低值;在第168 h时,NbPK-2的相对表达量有所增加,高于第144 h。(2)经过检索发现家蚕微孢子虫剪接因子有两个拷贝,分别是EOB15199.1和EOB11739.1。选取家蚕微孢子虫剪接因子基因的其中一个拷贝(NbSF-1,GenBank accession number:KB908915.1)及其氨基酸序列(NbSF-1,GenBank accession number:EOB15199.1)进行研究。其生物信息学分析结果显示:NbSF-1与其他物种的剪接因子蛋白序列的相似性均较低,最高不超过60%;NbSF-1序列二级结构构成相对简单,其只有约6%的螺旋和6%的延伸片段,其余均是无规则卷曲结构,无信号肽;NbSF-1约有83%的氨基酸序列是无序化结构;包含磷酸化位点71个,N-糖基化位点22个,O-糖基化位点20个;亚细胞定位预测结果显示其可能定位在细胞质和细胞核。成功克隆出NbSF-1(KB908915.1)基因,该基因序列长度为1 449 bp,是一个完整的开放阅读框,编码482个氨基酸。q-PCR结果显示,在接种微孢子虫后的第2 h到第24 h,NbSF-1的相对表达量一直在上升;第24 h后开始降低,但在感染第48 h以后均处于相对平稳的表达水平,说明NbSF-1可能参与了微孢子虫的整个生活史。(3)通过构建重组表达载体,成功表达出NbSF-1蛋白;优化诱导表达条件后,当IPTG终浓度为0.5 mM的时候,在37℃条件下诱导4小时即可得到表达量相对较多的目的蛋白;纯化后的目的蛋白溶液的纯度明显高于未纯化的蛋白溶液,纯化成功;使用纯化后的NbSF-1蛋白多次免疫家兔,成功制备多克隆抗体。(4)间接免疫荧光结果显示,NbSF-1存在于休眠的家蚕微孢子虫内,随着微孢子虫的发芽而弹射至孢外,发芽后在孢外的细胞质中观察到荧光,但家蚕微孢子空壳中无荧光残留。证明NbSF-1位于家蚕微孢子虫的细胞质中,孢子壁、细胞核和极管上没有NbSF-1蛋白。(本文来源于《江苏科技大学》期刊2019-04-22）
付育,何天柳,王英泽,仇燕,杜朝[7]（2019）在《剪接因子SRSF7表达对肺癌细胞增殖及转化影响》一文中研究指出目的丝氨酸/精氨酸富集(serine/arginine-rich,SR)蛋白是重要的剪接因子家族,在剪接、mRNA出核、稳定性和翻译等RNA代谢过程中发挥调控作用。已有研究发现,SR蛋白家族中很多成员在不同肿瘤类型中存在异常表达。前期研究发现SRSF7蛋白在肺癌组织中表达上调,本研究旨在探究SRSF7表达对肺癌细胞增殖及转化的影响及机制。方法免疫组织化学方法检测SRSF7蛋白在肺癌组织中的表达。采用高表达SRSF7慢病毒感染肺上皮细胞BEAS-2B,建立稳定过表达SRSF7的细胞系;SRSF7shRNA慢病毒感染肺癌细胞A549,建立敲低表达SRSF7细胞系。MTS实验检测稳定细胞系增殖变化,软琼脂集落形成实验检测其细胞转化能力,蛋白免疫印迹技术检测与细胞增殖及转化密切相关的mTOR信号通路中p-S6K蛋白表达变化。结果 SRSF7蛋白在肺癌组织中表达(7.18±2.84)高于癌旁正常组织(3.77±1.80),t=6.333,P<0.001。BEAS-2B细胞稳定过表达SRSF7后,SRSF7蛋白表达升高、细胞增殖能力升高(n=3,P<0.05),克隆形成数显着增加,t=12.85,P=0.006。A549细胞稳定敲低表达SRSF7后,SRSF7蛋白表达下降、细胞增殖能力明显降低(n=3,P<0.01),克隆形成数显着减少,F=13.58,P=0.005 9。SRSF7能够增强mTOR信号通路下游靶点S6K的磷酸化水平。结论 SRSF7在肺癌组织中高表达,上调表达SRSF7能够促进正常肺上皮细胞增殖和转化,下调表达SRSF7能够抑制肺癌细胞增殖和转化,同时过表达SRSF7能够激活mTOR信号通路。剪接因子SRSF7与肺正常细胞和肺癌细胞增殖及转化密切相关,为肺癌治疗提供潜在靶点和研究依据。(本文来源于《中华肿瘤防治杂志》期刊2019年07期）
李丽,安立才,初晓霞[8]（2018）在《剪接因子突变与MDS关系研究的新进展》一文中研究指出骨髓增生异常综合征(myelodyssolastic syndrome,MDS)是一组起源于骨髓造血干细胞的高度异质性的恶性克隆性疾病。MDS患者因髓系无效造血而导致外周血细胞减少,并且许多患者随着时间的推移骨髓中的恶性细胞逐渐增多,有30%～40%的MDS患者会转化为急性髓系白血病(acute myeloid leukemia,AML)。而目前应用于治疗MDS的去甲基化药物只有阿扎胞苷和地西他滨。(本文来源于《临床血液学杂志》期刊2018年06期）
董丰铭,王文瑞,刘屹立[9]（2018）在《丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1和Livin在膀胱移行细胞癌中的表达及临床意义》一文中研究指出目的探讨膀胱移行细胞癌组织中丝氨酸/精氨酸富集剪接因子1(serine/arginine-rich splicing factor 1,SRSF1)和凋亡蛋白抑制因子Livin表达及临床意义。方法膀胱移行细胞癌患者46例,取手术切除癌组织46份为膀胱移行细胞癌组,癌旁正常组织10份为对照组,采用免疫组织化学法检测2组SRSF1和Livin阳性表达情况,分析SRSF1和Livin阳性表达与膀胱移行细胞癌临床病理特征的关系,Spearman秩相关分析膀胱移行细胞癌患者SRSF1和Livin阳性表达的相关性。结果膀胱移行细胞癌组SRSF1、Livin阳性表达率(80.4%、82.6%)均高于对照组(10.0%、30.0%)(P<0.05);膀胱移行细胞癌组肿瘤复发者SRSF1、Livin阳性表达率(92.6%、96.3%)高于未复发者(63.2%、63.2%)(P<0.05),SRSF1、Livin阳性表达率在肿瘤是否单发、分化程度、TNM分期上比较差异无统计学意义(P>0.05);Spearman秩相关分析结果显示,膀胱移行细胞癌组SRSF1和Livin阳性表达呈正相关(r=0.662,P<0.001)。结论膀胱移行细胞癌组织中Livin、SRSF1呈高表达,且与患者复发有关。(本文来源于《中华实用诊断与治疗杂志》期刊2018年09期）
李文萃,黄俊逸,徐永镇,孙霞[10]（2018）在《酵母和人剪接因子Prp5在家蚕中部丝腺的表达》一文中研究指出剪接因子Prp5是一种叁磷酸腺苷(ATP)水解酶/RNA解旋酶,在内含子的识别和预剪接体的组装过程中具有重要的调控作用。分别克隆了酵母(Saccharomyces cerevisiae)与人(Homo sapiens)Prp5蛋白的核心编码序列Sc Prp5-M和h Prp5-M,然后在序列上游分别添加8×His标签序列,再与转基因质粒p Bac-Seri1-IE1ds Red(含seri1基因启动子和信号肽序列)进行重组,得到p Bac-Sc Prp5-M和p Bac-h Prp5-M转基因质粒。利用家蚕转基因技术将转基因质粒分别注射到蚕卵中,通过串联红色荧光标记筛选阳性转基因家蚕,在基因组水平检测到有Sc Prp5-M和h Prp5-M插入的家蚕个体,进一步的RNA和蛋白质检测也证明2种外源蛋白在家蚕中部丝腺中特异性表达,并且在5龄第4天和第5天的表达量较高。此外,在家蚕中部丝腺表达的2种重组蛋白均能随丝蛋白分泌到体外存在于茧层中,经裂解和纯化后,每1 g鲜茧茧层可分别获得6.25μg重组Sc Prp5-M蛋白和12.5μg重组h Prp5-M蛋白。利用家蚕丝腺生物反应器表达外源Prp5蛋白,为进一步研究Prp5蛋白的功能奠定了一定的实验基础。(本文来源于《蚕业科学》期刊2018年04期）
剪接因子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
宫颈癌是女性最常见的生殖系统恶性肿瘤,其发病率和病死率在女性生殖系统恶性肿瘤中排第二位。放射治疗是宫颈癌治疗的主要手段之一,宫颈癌细胞对放疗射线的辐射抗性是宫颈癌治疗的一个重要问题,提高宫颈癌细胞对放疗射线的敏感性是许多研究人员致力的重点。最近,越来越多的证据表明,Pre-mRNA选择性剪接模式的变化在癌症和其他疾病中起着至关重要的作用。近年来,随着针对剪接体的一类新型药物的批准应用,选择性剪接在肿瘤中的应用受到了广泛关注,剪接体已成为癌症治疗的的一个有吸引力的靶点,其中剪接体的亚单位SF3b1主要参予细胞内基因转录、mRNA稳定、选择性剪接等功能。通过文献调研,我们选择靶向剪接体SF3b1的小分子物质pladienolide B作为下调SF3b1的抑制剂,来探究宫颈癌HeLa细胞下调SF3b1后,转录因子p73基因的不同剪接体调控情况、与细胞凋亡通路相关的关键蛋白表达及细胞凋亡和周期阻滞的诱导情况,并探究了pladienolide B下调SF3b1后对HeLa细胞辐射敏感性的影响。我们的实验结果显示:(1)在0-2 nM pladienolide B浓度范围内,SF3b1以剂量和时间依赖性的方式抑制HeLa细胞的增殖,并诱导G2/M期周期阻滞和细胞凋亡,用pladienolide B下调SF3b1可诱导促凋亡的p73剪接体Tap73增加,从而上调Bax/Bcl-2比率,细胞色素c释放和caspase-3的表达。结果显示SF3b1在人宫颈癌细胞的周期阻滞,凋亡诱导和p73剪接中起关键作用,提示SF3b1可以用作宫颈癌治疗的潜在靶点。(2)利用pladienolide B下调SF3b1协同X射线及~(12)C~(6+)离子束辐照HeLa细胞,2 Gy X射线和~(12)C~(6+)离子束辐照迭加0.025 nM pladienolide B的处理组的细胞增殖和细胞克隆形成率显着低于单纯照射组,并且诱导细胞凋亡和周期阻滞,2 Gy~(12)C~(6+)离子束则有更明显的凋亡诱导作用。说明pladienolide B下调SF3b1协同X射线及~(12)C~(6+)离子束都增强了HeLa细胞的辐射敏感性,提示pladienolide B或可在临床上作为协同放射进行治疗的药物。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
剪接因子论文参考文献
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