何莲（四川省射洪中医院629200）
【中图分类号】R392.6【文献标识码】A【文章编号】1672-5085（2013）15-0148-02
【摘要】粪便隐血试验是诊断消化道出血性疾病的一个重要指标，对早期发现和诊断消化道出血性疾病有重要意义。本文对化学法隐血试验和免疫法隐血试验进行了比较。化学法隐血试验受饮食、铁剂和还原性物质等干扰，易形成假阳性或假阴性结果。免疫法隐血试验有较高的敏感性和特异性。
【关键词】隐血化学法隐血试验免疫法隐血试验
大便检测是体液检测中一个比较简单的项目，虽然简单但意义却重大。人体的大便主要由消化后未被吸收的食物残渣，消化道分泌物，大量细菌和无机盐及水分等组成。通过大便检测可以了解消化道有无炎症，出血，寄生虫，恶性肿瘤等。而其中粪便隐血检测对消化道出血的诊断有重要价值。消化道溃疡粪便隐血阳性率可达40%-70%，呈间断性阳性，胃癌，结肠癌等消化道肿瘤粪便隐血阳性率可达95%呈持续性阳性。药物性胃粘膜损伤，肠结核，溃疡性结肠炎，结肠息肉，钩虫病等引起的消化道出血可以用粪便隐血实验检测。目前临床上各种原因消化道出血的病人比较多，临床要求做大便隐血检测的病人也比较多，检验科是否准确的出报告将影响临床医生的诊断。在工作的过程中经常听到医生说我的病人明明有出血为什么检验科出的隐血报告却是阴性，或着明明病人没有出血有时隐血报告又是阳性，到底是怎么回事？现在我把检测大便隐血方法的原理及优缺点比较一下。便于大家更好的了解。
大便隐血检测的方法我们一般采用化学法隐血试验和免疫法隐血试验。化学法隐血试验常用方法有：邻联甲苯胺法、还原酚酞法、联苯胺法、匹拉米洞法、无色孔雀绿法、愈创木脂法等。各种化学方法原理基本相同，均是利用血红蛋白中的含铁血红素部分有催化过氧化物分解的作用，催化试剂中的过氧化氢，分解，释放新生态的氧，氧化各种色原物质而呈色，呈色的深浅反映了血红蛋白的多少，亦即出血量的大小。从原理可以看出化学法隐血试不仅对人体自身的上下消化道出血可以检测的到，外源性动物食品中的血红蛋白，肌红蛋白和其它含有过氧化物酶的食物也可使实验呈阳性。所以化学法隐血试验检测大便隐血受食物影响比较大，方法特异性和准确性较低。灵敏度有的方法高如邻联甲苯胺法，还原酚酞法，邻甲苯胺法灵敏度可测到0.8UG/ML血红蛋白的含量。愈创木酯法灵敏度较低。我们实验室最初用的邻联甲苯胺法，试验受食物影响假阳性较多，后来选用四甲基联苯胺和愈创木酯为显色基质的隐血拭带。相对假阳性较少。化学法隐血试验也可出现假阴性，如血液在肠道停留过久，血红蛋白被细菌降解，不再有过氧化物酶的作用，无法催化试剂中的过氧化氢释放新生太氧，出现假阴性。还有服用大量的维生素C或其它具有还原作用的药物，将释放的氧消耗了，而使实验出现假阴性。免疫法隐血试验我们用的是胶体金快速免疫分析法。采用单克隆和多克隆抗人血红蛋白抗体于大便中的人血红蛋白抗原发生特异反应。该方法灵敏度和特异性均很高，最低检出量为0.2UG/ML的血红蛋白，各种动物血，辣根过氧化物酶和还原性物质都不会干扰试验，不需控制饮食。但缺点是灵敏度太高正常人有生理性性失血（0.6MG/24小时），可造成假阳性。但日常工作中这种假阳性较少。该方法对检测下消化道出血灵敏度较高，上消化道出血有40%-50%不能检出。原因：是上消化道出血血红蛋白或红细胞经过消化酶降解变性或消化殆尽，已不具备原来的免疫原性。胶体金免疫法隐血试验检测上限一般为2000UG/ML血红蛋白，如果过量的大出血而致反应体系中抗原过剩会出现后带现象出现假阴性。还有有的患者血红蛋白抗原与单克隆抗体不配合而出现假阴性。从以上分析我们知道了化学法隐血试验受食物影响大，特异性、准确性、灵敏度均较免疫法隐血试验低，所以就出现了病人没有出血而我们检测出隐血阳性的报告。但该方法对上消化道出血的检出阳性率高于免疫法隐血试验。免疫法隐血试验不受食物影响，特异性、灵敏度、准确度高，但对上消化道出血阳性率不高。所以就出现明明病人上消化道在出血我们检测出隐血阴性。
化学法隐血试验和免疫法隐血试验各有优缺点，日常工作中我们可以两种方法结合起来进行检测，以提高检测的准确度。日常工作中血便标本大致有三种；柏油样便、暗红色或鲜红色便、出血量少肉眼看不出颜色变化的大便.柏油样便多为上消化道出血和高位小肠出血和右半结肠出血在体内停留时间太长,血红蛋白与硫化物结合形成硫化亚铁而呈黑色.柏油样便隐血检测首选化学法检测.如果化学法为隐血阳性应加做免疫法隐血试验,两种方法均为阳性可以判断消化道有出血.如果免疫法隐血试验为阴性,则考虑血红蛋白在体内存留时间太长，可能被胃酸或肠道内细菌分泌的酶所降解破坏使其免疫原性减弱或丧失从而失去和抗体结合的能力，可能导致免疫法隐血试验阳性减弱和假阴性的结果。此时应增加样本浓度检测或着再连续检测2-3次，如果免疫法为阳性，结果可判断为隐血阳性。对于那些血红蛋白超过2000UG/ML的大便标本，化学法检测明显阳性，而免疫法检测为阴性的，可能为血红蛋白含量过高导致抗原过剩，建议将样本倍数稀释后再用免疫法检测。如果免疫法始终为阴性则可能是病人吃了含有猪血,猪肝，铁剂等食物而影响化学法隐血试验结果，建议病人3日内禁食肉类，动物内张类食物或禁食含有铁剂的食物和蔬菜,3日后再检测隐血。对于颜色为鲜红色或暗红色大便.化学法隐血试验和免疫法隐血试验均为阴性,这种大便可以考虑病人是否吃了西瓜、西红柿、中药、巧克力、咖啡等含色素的食物。出血量少肉眼看不出颜色变化的标本首选免疫法隐血试验.当免疫法隐血试验呈现阳性结果，但是化学法隐血试验呈现阴性结果时，可以判定样品中血红蛋白含量较低，化学法隐血试验的灵敏度不够检测不出样本中的隐血，结果仍然判断为隐血阳性。大便的颜色，外观各种各样，每个病人的情况不同，我们检验工作者要根据病人的具体情况选择适合的检测方式，尽量提高大便隐血的检出率。（在检验报告单上注明方法，便于医生分析）
大便隐血检测影响因素较多,取材也十分关键.取材不正确即使有出血也可能会被漏诊。通常采用自然排出的粪便，用一次性竹签选取含有粘液、脓血等病变成分的新鲜粪便，外观无异常的粪便须从表面、深处及粪端多处取材，其量约5g(约指头大小)，盛放于洁净有盖一次性大便盒中。不提倡用纸盒送检，因纸盒送检大便标本会导致水分被吸收，大便干结，影响检验结果。标本力求新鲜，采取标本后及时送检（2小时内送到），以免标本久置，因pH及消化酶等影响，而使粪便中细胞成分破坏分解；避免降低隐血反应的敏感度。在粪便形成的过程中，少量的消化道出血不一定与之混合均匀，而且消化道出血具有间断性，所以需要连续检测三次以获得更准确的结果。检验人员在检测时也要多点采集粪便，以提高检测的阳性率。
参考文献
[1]临床检验操作规程2009叛.