导读:本文包含了抗原保守区段论文开题报告文献综述及选题提纲参考文献，主要关键词:莱姆病螺旋体,VlsE蛋白,克隆表达,抗原性分析
抗原保守区段论文文献综述
刘炜,张琳,侯学霞,刘慧鑫,郝琴[1]（2016）在《中国B.afzelii基因型莱姆病螺旋体GDsh1表面蛋白VlsE保守区段的克隆表达及抗原性分析》一文中研究指出目的克隆表达中国莱姆病螺旋体B.afzelii基因型菌株GDsh1的表面蛋白VlsE保守区段,并对其抗原性进行分析,为制备中国莱姆病重组抗原ELISA检测试剂盒提供依据。方法结合文献,下载并比对PubMed上所有莱姆病螺旋体B.a型菌株的VlsE基因序列,确定保守区段,设计引物,扩增GDsh1的VlsE基因片段。将扩增产物与载体PET-32a连接,转入大肠杆菌BL21(DE3)中表达。对重组载体进行序列测定,表达产物用SDS-PAGE和Western blot分析。利用重组VlsE蛋白制备ELISA试剂盒,检测83份莱姆病阳性血清,90份阴性血清以及90份梅毒血清,计算重组试剂盒的灵敏度和特异性。并与科室已有的全菌蛋白ELISA试剂盒检测结果进行比较。结果成功克隆表达了B.afzelii型VlsE保守区蛋白,Western blot结果显示VlsE保守区蛋白与免疫兔血清有较强的抗原抗体反应。ELISA结果表明:重组VlsE蛋白的灵敏度60.2%低于全菌蛋白的灵敏度92.8%(P<0.001);特异性分别为73.3%、68.9%,差异无统计学意义(P=0.511)。在检测梅毒血清上特异性分别为83.3%、18.9%,重组蛋白的特异性远远高于全菌蛋白(P<0.001)。结论重组VlsE基因保守区段蛋白在莱姆病的检测中具有一定的灵敏度和特异性,且在区分梅毒血清与莱姆病血清上,其特异性远远高于全菌蛋白,在莱姆病血清学检测中具有不容忽视的重要意义。(本文来源于《中国人兽共患病学报》期刊2016年01期）
张彦丽[2]（2006）在《解脲脲原体MB抗原保守区段的表达与抗体制备及初步应用》一文中研究指出目的：构建含解脲脲原体(Ureaplsama urealyticum，Uu)膜蛋白MB抗原保守区段(20～130aa)基因的重组表达载体，在大肠杆菌中进行诱导表达，纯化产物免疫新西兰兔获得特异性的多克隆抗体(PcAb)，检测Uu感染的临床标本，分析其敏感性与特异性，为制备Uu临床检测试剂盒奠定实验基础。 方法：通过生物信息学分析，筛选MB抗原保守区基因片段优势抗原表位，以Uu1型血清型标准株基因组DNA为模板，通过聚合酶链反应(PCR)扩增目的片段，将其克隆至原核表达载体pQE30，构建MB抗原基因保守区段重组表达质粒pQE30／partMBA，然后转化至表达宿主菌M15中进行诱导表达，利用SDS-PAGE和Western-Blot对表达产物进行分析和鉴定；镍琼脂糖凝胶F．F．亲和层析柱纯化重组蛋白，BCA法测定纯化蛋白浓度。用纯化的含MB抗原保守区段的重组蛋白免疫新西兰兔，间接ELISA方法检测免疫兔血清中抗MB抗原保守区段PcAb的效价，对表达的MB抗原保守区段重组蛋白的免疫原性进行分析。然后用制备的特异性PcAb为一抗，将收集的临床尿液标本处理后包被微孔板，建立间接ELISA方法检测临床标本中Uu，同时与培养法进行比较。根据PcAb检测临床样本中Uu的敏感性与特异性，评价重组蛋白制备的特异PcAb在临床标本检测中的应用价值。 结果：软件分析MB抗原的抗原性、疏水性和跨膜区，选取了MB抗原保守区段基因的第208～540bp位碱基序列为目的基因(片段长度为333bp，编码111(本文来源于《南华大学》期刊2006-05-01）
抗原保守区段论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的：构建含解脲脲原体(Ureaplsama urealyticum，Uu)膜蛋白MB抗原保守区段(20～130aa)基因的重组表达载体，在大肠杆菌中进行诱导表达，纯化产物免疫新西兰兔获得特异性的多克隆抗体(PcAb)，检测Uu感染的临床标本，分析其敏感性与特异性，为制备Uu临床检测试剂盒奠定实验基础。 方法：通过生物信息学分析，筛选MB抗原保守区基因片段优势抗原表位，以Uu1型血清型标准株基因组DNA为模板，通过聚合酶链反应(PCR)扩增目的片段，将其克隆至原核表达载体pQE30，构建MB抗原基因保守区段重组表达质粒pQE30／partMBA，然后转化至表达宿主菌M15中进行诱导表达，利用SDS-PAGE和Western-Blot对表达产物进行分析和鉴定；镍琼脂糖凝胶F．F．亲和层析柱纯化重组蛋白，BCA法测定纯化蛋白浓度。用纯化的含MB抗原保守区段的重组蛋白免疫新西兰兔，间接ELISA方法检测免疫兔血清中抗MB抗原保守区段PcAb的效价，对表达的MB抗原保守区段重组蛋白的免疫原性进行分析。然后用制备的特异性PcAb为一抗，将收集的临床尿液标本处理后包被微孔板，建立间接ELISA方法检测临床标本中Uu，同时与培养法进行比较。根据PcAb检测临床样本中Uu的敏感性与特异性，评价重组蛋白制备的特异PcAb在临床标本检测中的应用价值。 结果：软件分析MB抗原的抗原性、疏水性和跨膜区，选取了MB抗原保守区段基因的第208～540bp位碱基序列为目的基因(片段长度为333bp，编码111
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
抗原保守区段论文参考文献
[1].刘炜,张琳,侯学霞,刘慧鑫,郝琴.中国B.afzelii基因型莱姆病螺旋体GDsh1表面蛋白VlsE保守区段的克隆表达及抗原性分析[J].中国人兽共患病学报.2016
[2].张彦丽.解脲脲原体MB抗原保守区段的表达与抗体制备及初步应用[D].南华大学.2006