导读:本文包含了核表达论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:支原体,磷酸,质粒,细胞,食管癌,内皮,黏液。
核表达论文文献综述
包玲,胡晓华,王宗琴,高作慧,冯映映[1]（2019）在《Rac1在慢性应激抑郁大鼠脑内伏隔核表达及功能研究》一文中研究指出目的:探讨Rac1在慢性应激抑郁模型大鼠脑内伏隔核中表达变化及其功能。方法:通过建立慢性应激(CUMS)大鼠抑郁模型,观察伏隔核中Rac1 mRNA表达变化,以及经过慢性抗抑郁药治疗,与未经治疗的模型组相比Rac1 mRNA表达的差异。探讨Rac1与慢性应激抑郁症相关关系,在大鼠伏隔核中过表达Rac1并进行CUMS造模,分析Rac1在慢性应激抑郁中的功能。结果:Rac1在CUMS大鼠伏隔核中表达降低,并且与CUMS诱导的抑郁行为具有相关性;丙米嗪抗抑郁治疗后,CUMS大鼠伏隔核中Rac1降低现象显着改善;过表达Rac1可以改善CUMS诱导的大鼠抑郁样行为。结论:Rac1在慢性应激抑郁大鼠脑内伏隔核中表达降低,挽救Rac1的降低可以改善慢性应激诱导的大鼠抑郁样行为。(本文来源于《海南医学院学报》期刊2019年20期）
华利忠,王世杰,马丹夫,刘茂军,冯志新[2]（2019）在《猪肺炎支原体醛缩酶原核表达及致猪气管上皮细胞凋亡的研究》一文中研究指出为了研究Ⅱ类果糖二磷酸醛缩酶(FBA)是否为猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)的毒力因子,并参与其致病作用,根据已发表的猪肺炎支原体醛缩酶全基因序列设计特异性的引物,以猪肺炎支原体168株基因组为模板,通过Overlap PCR点突变扩增醛缩酶基因。将FBA克隆至pET-28a(+)载体后进行序列测定和分析,结果表明,FBA基因全长864 bp。将构建的重组表达质粒pET-28a(+)/FBA转化至大肠埃希菌BL21(DE3),通过筛选获得阳性克隆,重组工程菌在IPTG诱导下成功获得表达融合蛋白猪肺炎支原体Ⅱ类果糖二磷酸醛缩酶(Mhp FBA),大小约为35 ku。纯化蛋白并接种于猪气管上皮细胞至FBA终浓度分别为0、10、50、100、150、200μg/mL,孵育24 h后进行上清中丙酮酸浓度的检测和细胞凋亡检测。结果上清中丙酮酸浓度随着FBA浓度的上升,出现先极显着上升(P<0.01)、后急剧下降的现象;细胞平均凋亡率依次分别为3.54%、10.91%、13.99%、27.19%、32.84%和40.71%,并随着FBA浓度的升高而升高,且相比阴性对照组差异均显着(P<0.05)或极显着(P<0.01)。成功构建了Mhp FBA重组菌,表达获得了Mhp重组蛋白FBA,该蛋白可能为猪肺炎支原体的毒力因子,参与猪肺炎支原体的致病作用,从而为进一步开展Mhp致病机理和药物研究奠定基础。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年06期）
王文强[3]（2019）在《人食管鳞癌核表达p75~(NTR)细胞特性的研究》一文中研究指出目的:研究人食管癌组织中细胞核表达p75~(NTR)细胞的干细胞特性。方法:1采用免疫组织化学技术检测p75~(NTR)在食管鳞癌组织标本中的表达情况并分析其与各种预后因子的相关性。2采用无血清成球培养法培养人食管癌Eca109细胞,富集到第1代肿瘤干细胞球样细胞,并进行传代培养,得到第3代、第5代、第7代和第9代细胞球细胞。3采用免疫荧光法检测不同代次细胞球细胞中p75~(NTR)的表达情况。4采用流式细胞术检测不同代次细胞球细胞的细胞周期。5采用Real time-PCR技术检测细胞球细胞ABCG2和ERCC1的表达情况。6采用CCK8法检测细胞球细胞的化疗药物抵抗能力。7采用动物体内成瘤实验检测不同代次细胞球细胞的成瘤情况。结果:1在71例食管癌组织标本中,有42例标本中的食管癌细胞表达p75~(NTR),p75~(NTR)阳性表达的细胞中少数细胞p75~(NTR)在细胞核表达且细胞核表达p75~(NTR)的细胞成群分布;经统计学分析,发现细胞表达p75~(NTR)的病例数与年龄、肿瘤直径和病理分级有关,而与性别(男性31/42,女性11/42)、Ki67的表达(25/42)和远处转移(12/42)没有相关性;细胞核表达p75~(NTR)的病例与患者的年龄、肿瘤直径和病理分级有关,而与其他相关因素,例如:性别(男性25/31,女性10/11)、淋巴结转移(1/7)等,无显着相关性。2第1代(69.6%)、3代(74.8%)、5代(80.1%)、7代(79.5%)、9代(79.2%)细胞球细胞处于G0/G1期细胞随细胞球细胞代数的增长依次递增,而第5代以后细胞球细胞处于G0/G1期细胞比例没有明显变化。3第1代、3代、5代细胞球细胞ABCG2和ERCC1的表达量依次递增,而第5代以后细胞球细胞这两种基因的表达量没有明显变化。4第1代、3代、5代细胞球细胞对甲氨蝶呤、顺铂和紫杉醇的耐受能力依次增强,而第5代以后细胞球细胞对这叁种化疗药物的耐受能力没有明显的变化。5第1代(5.32%)、3代(38.69%)、5代(100%)细胞球细胞中p75~(NTR)核阳性表达细胞的比例随细胞球细胞代数的增长依次递增,而第5代以后细胞球细胞p75~(NTR)的表达均为核阳性;第1代(0.092g)、3代(0.13g)、5代(0.22g)细胞球细胞的裸鼠成瘤能力依次增强,而第5代以后细胞球细胞的裸鼠成瘤能力无明显变化。结论:食管癌p75~(NTR)核阳性细胞更具有干细胞的特性,通过多次细胞球培养可以纯化p75~(NTR)核阳性的食管癌干细胞。(本文来源于《石河子大学》期刊2019-06-01）
陈冉,冯思豫,蔡春尔,何培民[4]（2018）在《石莼多糖裂解酶原核表达方法比较》一文中研究指出比较不同原核表达载体和受体重组转化表达石莼多糖裂解酶基因的效果。将人工合成的石莼多糖裂解酶基因片段分别酶切接入原核表达载体pColdⅠ质粒和pET-28a(+)质粒,得到重组质粒pColdⅠ-859和pET-28a(+)-859(859代表石莼多糖裂解酶基因),经双酶切测序鉴定后,分别将质粒pColdⅠ-859转入大肠杆菌RP(DE3)感受态细胞,质粒pET-28a(+)-859转入大肠杆菌BL21(DE3)LysS中表达。试验结果显示,前者没有明显表达目的蛋白,后者表达的蛋白经分离纯化、电泳鉴定和Western Blot分析证明目的蛋白表达量较高。本试验经对比研究获得了能充分表达石莼多糖裂解酶的原核表达系统,为批量制备低成本高纯度的石莼多糖裂解酶蛋白提供了参考。(本文来源于《水产科学》期刊2018年06期）
赵宇,陈忠敏[5]（2018）在《重组核酸酶原核表达载体的构建》一文中研究指出目的构建重组核酸酶原核表达载体,并检测其表达情况。方法根据Gen Bank公布的黏质沙雷菌胞外核酸酶(Serratia marcescens nuclease,SM nuclease)基因序列(M19495.1),去除其N-端信号肽序列,使用大肠埃希菌偏爱性密码子,设计并合成带有核酸酶基因的Ben-p GH。以核酸酶基因全长为模板,PCR法扩增该基因,将其与经NcoⅠ和XhoⅠ双酶切的A10-p ET-32a-c(+)载体连接,连接产物转入E.coli Top10中,经菌液PCR筛选阳性克隆,并进行DNA测序。将Ben-p ET-32a-c(+)转入E.coli BL21(DE3)中,经IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE鉴定。结果 Ben-p ET-32a-c(+)中核酸酶基因与Gen Bank公布的SM nuclease基因的同源性为82%。表达的重组核酸酶以包涵体形式存在,相对分子质量为30 000,表达量约占菌体总蛋白的84.45%。结论成功构建了重组核酸酶原核表达载体,并获得稳定表达。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2018年05期）
车明月,穆贤,李学一,张齐,丛丽娜[6]（2018）在《海参铜锌超氧化物歧化酶原核表达载体的构建、表达及活性鉴定》一文中研究指出采用原核宿主大肠杆菌BL21(DE3)成功表达了具有活性的仿刺参铜锌超氧化物歧化酶(Apostichopus japonicus Cu/Zn-superoxide dismutase,Aj-SOD1)蛋白。利用Trizol法从海参肠组织中提取总RNA,通过反转录PCR扩增获得Aj-SOD1基因的编码序列(GenBank:JX097096.1,459bp),构建克隆载体pMD18-Aj-SOD1;在目的基因两端引入(XhoⅠ/NdeⅠ)酶切位点,构建克隆载体pMD18-AjSOD1(XhoⅠ/NdeⅠ)。将此载体与表达质粒pET30a(+)分别双酶切后连接,构建重组表达载体pET30a-Aj-SOD1。转化至大肠杆菌BL21(DE3),Kan+抗性筛选阳性转化子,获得基因工程菌BL21(DE3)-pET30a-Aj-SOD1。SDS-PAGE和邻苯叁酚自氧化法检测发现,经0.1 mmol/L IPTG诱导8h后,成功获得具有抗氧化活性的Aj-SOD1蛋白。(本文来源于《大连工业大学学报》期刊2018年01期）
沈双,殷旭仁,宋丽君,王玠,柯雪丹[7]（2017）在《弓形虫磷酸丙糖异构酶原核表达及免疫保护的初步研究》一文中研究指出目的克隆刚地弓形虫磷酸丙糖异构酶(Triosephosphate isomerase,TPI)基因,原核表达和纯化蛋白,研究其对弓形虫感染小鼠的免疫保护作用。方法抽提弓形虫速殖子总RNA,利用PCR技术扩增刚地弓形虫TPI基因,构建重组原核表达载体TPI/p ET-28a(+),转化大肠杆菌BL21,IPTG诱导目的蛋白表达,镍亲和层析法纯化目的蛋白。将与佐剂乳化后的TPI蛋白对小鼠颈背部多点皮内免疫,间隔2周,连续免疫4次,最后一次为加强免疫,同时设置佐剂对照组与正常对照组。尾静脉采血检测小鼠血清抗体效价。以400个弓形虫速殖子/只接种小鼠腹腔,观察记录各组小鼠的生存率。结果成功扩增到弓形虫TPI基因,构建原核表达载体TPI/p ET-28a(+),获得纯化的TPI蛋白,TPI免疫4次后的小鼠血清抗体效价可达1:100 000以上,且生存期显着高于佐剂对照组与正常对照组。结论弓形虫TPI蛋白对弓形虫感染小鼠具有一定的免疫保护作用,为研究弓形虫疫苗奠定了理论基础。(本文来源于《中国血吸虫病防治杂志》期刊2017年06期）
石泽宇[8]（2017）在《猪嗜血支原体无机焦磷酸酶原核表达和纯化》一文中研究指出猪嗜血支原体(Mycoplasma suis,M.suis),是引起猪附红细胞体病(Porcine Eperythrozoonosis,PE)的病原微生物,自发现以来已给养猪业造成了巨大的经济损失。无机焦磷酸酶(Inorganic Pyrophosphatases,PPases)是一种能够催化无机焦磷酸酯(PPi)水解成无机焦磷酸盐(Pi)的重要水解酶,是存在于M.suis中的一种功能性蛋白酶。PPase表现较好的免疫原性,可作为M.suis的一种抗原运用于抗体制备和病原检测试验中。本实验运用原核表达技术体外制备猪嗜血支原体无机焦磷酸酶蛋白(M.suis ppa)并对其进行纯化和鉴定。试验采用PCR方法扩增M.suis的ppa基因,将扩增产物连接至pEasy克隆载体,并将重组载体转入大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)DH5a中进行克隆,并对克隆产物进行PCR产物鉴定和基因序列测定,将测序正确的ppa基因连接至 pET-48b(+)表达载体,并转入E.coli BL21(DE3),IPTG 诱导E.coliBL21(DE3)表达出可溶性ppa融合蛋白;应用镍(Ni2+)柱亲和层析法纯化ppa融合蛋白,并对其进行SDS-PAGE、Western Blot鉴定。结果表明:(1)实验成功构建了重组克隆质粒pEasy-ppa,测序结果与NCBI数据库一致,目的基因ppa全长495 bp,编码165个氨基酸;(2)实验成功构建了重组表达质粒pET-48b-ppa,并转化入E.coli BL21(DE3)进行诱导表达,最佳诱导表达条件为:IPTG终浓度1.0mmol/L、最佳诱导温度30℃、最佳诱导时间18h;(3)经SDS-PAGE、WesternBlot鉴定,采用Ni2+柱亲和层析法在40 mmol/L咪唑洗杂液和500 mmol/L咪唑洗脱液中检测到纯度较高的ppa融合蛋白,其大小为25 kDa。全文结论:实验成功获得高纯度的可溶性ppa融合蛋白,为后续建立有效的猪嗜血支原体快速检测ELISA方法提供了条件。(本文来源于《山西农业大学》期刊2017-06-01）
Doyle,L,A,Fletcher,C,D,Hornick,J,L,魏建国,许春伟[9]（2016）在《核表达CAMTA1可用于鉴别上皮样血管内皮细胞瘤与其组织学类似的肿瘤》一文中研究指出上皮样血管内皮细胞瘤(EHE)是一种血管内皮细胞起源的恶性肿瘤,其特点是染色体1p36.3和3q25区域多次易位,导致约90%的病例中出现WWTR1-CAMTA1基因融合;少数病例(<5%)出现YAP1-TFE3基因融合。WWTR1-CAMTA1融合基因导致这两种蛋白过表达。WWTR1蛋白在多种细胞中表达,而CAMTA1通常仅限于脑组织中表达。(本文来源于《临床与实验病理学杂志》期刊2016年06期）
余丹[10]（2016）在《DJ-1/Park7的核表达在浸润性乳腺癌中的作用及其预后意义》一文中研究指出目的:DJ-1/park7是近年来发现的一种新的癌基因,其有抗氧化、抗凋亡等多种功能。近年来许多研究报道DJ-1/park7蛋白在多种肿瘤中异常表达,与肿瘤的发生、发展、转移、预后密切相关,可作为癌症发生的预警标记物以及潜在的抗癌治疗靶点。本文旨在探索在中国人群中DJ-1/park7的核表达与浸润性乳腺癌的临床指标之间的关系。方法:收集258例浸润性乳腺癌及其癌旁组织,其中包括153例浸润性导管癌(invasive ductal carcinoma,IDC)、41例乳腺黏液癌、33例浸润性小叶癌(invasive lobular carcinoma,ILC)、31例浸润性微乳头状癌(invasive micropapillary carcinomas,IMPCa)。为了研究DJ-1/park7蛋白在其它组织来源的黏液腺癌中的表达情况及DJ-1/park7蛋白与黏液分泌的关系,进一步纳入了其他标本:17例胃黏液腺癌、18例结直肠黏液腺癌、13例肺黏液腺癌、29例印戒细胞癌(组织来源:14例胃;13例结直肠;2例肺)。采用免疫组织化学染色方法检测其中DJ-1/Park7蛋白的核表达水平,并统计分析DJ-1/Park7蛋白核表达与组织分级、淋巴结转移、ER、PR、HER-2等临床病理特征之间的关系。结果:DJ-1/park7在浸润性乳腺癌肿瘤细胞的胞浆及胞核中都有表达。除了黏液癌外,在其它类型的浸润性乳腺癌中,胞核中的DJ-1/park7表达水平要明显低于其在周围正常乳腺腺体上皮中的表达水平。DJ-1/park7的核表达水平ER、PR呈正相关,与Ki-67、P53、组织学分级呈负相关,且DJ-1/park7蛋白在不同分子亚型中的表达也有显着性差异(P<0.05)。此外,我们在对于在其它来源的黏液腺癌中DJ-1/park7核表达情况的研究中发现,其肿瘤中的核表达水平都高于对应的周围正常腺上皮。在印戒细胞癌中,DJ-1/park7蛋白核表达水平介于其在正常腺上皮与黏液腺癌中的表达水平之间。结论:核DJ-1/park7在浸润性乳腺癌中低表达,且其核表达水平与肿瘤的ER、PR、HER-2、Ki-67、P53及组织学分级都相关,提示DJ-1/park7的核表达可能作为良好的预后生物学行为指标应用于临床。并且DJ-1/park7核表达可能与黏液分泌相关。(本文来源于《华中科技大学》期刊2016-05-01）
核表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
为了研究Ⅱ类果糖二磷酸醛缩酶(FBA)是否为猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,Mhp)的毒力因子,并参与其致病作用,根据已发表的猪肺炎支原体醛缩酶全基因序列设计特异性的引物,以猪肺炎支原体168株基因组为模板,通过Overlap PCR点突变扩增醛缩酶基因。将FBA克隆至pET-28a(+)载体后进行序列测定和分析,结果表明,FBA基因全长864 bp。将构建的重组表达质粒pET-28a(+)/FBA转化至大肠埃希菌BL21(DE3),通过筛选获得阳性克隆,重组工程菌在IPTG诱导下成功获得表达融合蛋白猪肺炎支原体Ⅱ类果糖二磷酸醛缩酶(Mhp FBA),大小约为35 ku。纯化蛋白并接种于猪气管上皮细胞至FBA终浓度分别为0、10、50、100、150、200μg/mL,孵育24 h后进行上清中丙酮酸浓度的检测和细胞凋亡检测。结果上清中丙酮酸浓度随着FBA浓度的上升,出现先极显着上升(P<0.01)、后急剧下降的现象;细胞平均凋亡率依次分别为3.54%、10.91%、13.99%、27.19%、32.84%和40.71%,并随着FBA浓度的升高而升高,且相比阴性对照组差异均显着(P<0.05)或极显着(P<0.01)。成功构建了Mhp FBA重组菌,表达获得了Mhp重组蛋白FBA,该蛋白可能为猪肺炎支原体的毒力因子,参与猪肺炎支原体的致病作用,从而为进一步开展Mhp致病机理和药物研究奠定基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
核表达论文参考文献
[1].包玲,胡晓华,王宗琴,高作慧,冯映映.Rac1在慢性应激抑郁大鼠脑内伏隔核表达及功能研究[J].海南医学院学报.2019
[2].华利忠,王世杰,马丹夫,刘茂军,冯志新.猪肺炎支原体醛缩酶原核表达及致猪气管上皮细胞凋亡的研究[J].动物医学进展.2019
[3].王文强.人食管鳞癌核表达p75~(NTR)细胞特性的研究[D].石河子大学.2019
[4].陈冉,冯思豫,蔡春尔,何培民.石莼多糖裂解酶原核表达方法比较[J].水产科学.2018
[5].赵宇,陈忠敏.重组核酸酶原核表达载体的构建[J].中国生物制品学杂志.2018
[6].车明月,穆贤,李学一,张齐,丛丽娜.海参铜锌超氧化物歧化酶原核表达载体的构建、表达及活性鉴定[J].大连工业大学学报.2018
[7].沈双,殷旭仁,宋丽君,王玠,柯雪丹.弓形虫磷酸丙糖异构酶原核表达及免疫保护的初步研究[J].中国血吸虫病防治杂志.2017
[8].石泽宇.猪嗜血支原体无机焦磷酸酶原核表达和纯化[D].山西农业大学.2017
[9].Doyle,L,A,Fletcher,C,D,Hornick,J,L,魏建国,许春伟.核表达CAMTA1可用于鉴别上皮样血管内皮细胞瘤与其组织学类似的肿瘤[J].临床与实验病理学杂志.2016
[10].余丹.DJ-1/Park7的核表达在浸润性乳腺癌中的作用及其预后意义[D].华中科技大学.2016
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