导读:本文包含了体外软骨形成论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:软骨,干细胞,细胞,骨髓,基质,庆大霉素,脂肪。
体外软骨形成论文文献综述
蔡震,潘博,林琳,蒋海越,庄洪兴[1]（2013）在《残耳软骨细胞诱导脂肪来源干细胞体外软骨形成实验研究》一文中研究指出目的探讨残耳软骨细胞能否在体外模拟软骨诱导微环境,促进脂肪来源干细胞(adipose derived stemcells,ADSCs)向软骨分化并形成软骨样组织。方法取外耳再造术中废弃的先天性小耳畸形患者残耳软骨组织与皮下脂肪组织分离培养,分别收集第2代残耳软骨细胞与第3代ADSCs,以3∶7比例混合培养作为实验组(A组),单纯残耳软骨细胞和单纯ADSCs作为对照(分别为B组和C组)。取各组细胞1.0×106个离心培养获得细胞球后,体外培养28 d,大体观察各组细胞球取材时的外观变化,测量湿重;阿利辛蓝比色法检测糖胺多糖(glycosaminoglycan,GAG)含量;RT-PCR检测各组标本的Ⅱ型胶原、蛋白聚糖(Aggrecan)mRNA表达;并行HE、甲苯胺蓝、番红O组织学观察及Ⅱ型胶原免疫组织化学检测。结果体外培养28 d后,A、B组标本形成白色半透明圆盘状组织块,表面光滑,弹性可;C组标本组织块有明显收缩,呈黄色球状,无弹性。A、B组标本湿重及GAG含量显着高于C组(P<0.05);A、B组间差异无统计学意义(t=1.820 3,P=0.068 7;t=1.861 4,P=0.062 7)。RT-PCR检测示A、B组标本均可见Ⅱ型胶原与Aggrecan mRNA条带清晰表达,C组未见明显表达;A、B组Ⅱ型胶原与Aggrecan mRNA表达均显着高于C组(P<0.05),A、B组间差异无统计学意义(t=1.457 6,P=0.144 9;t=1.519 5,P=0.128 6)。组织学观察示:A组与B组细胞球标本形成了大量软骨陷窝样结构,细胞外基质均有不同程度染色;C组细胞球标本组织内主要为纤维性成分,未见软骨陷窝,细胞外基质染色阴性。A、B组可见在软骨陷窝周围有不同程度棕黄色沉淀即Ⅱ型胶原表达,C组未见明显表达;A、B组灰度值显着低于C组(P<0.01),A、B组间差异无统计学意义(t=1.661 5,P=0.097 0)。结论残耳软骨细胞可在体外独立模拟软骨诱导微环境,促进ADSCs软骨定向分化并形成软骨组织。(本文来源于《中国修复重建外科杂志》期刊2013年01期）
刘瑾春,康宁,肖苒,刘霞,曹谊林[2]（2012）在《高浓度甲状腺素对软骨细胞聚集体(pellets)体外形成软骨组织的作用》一文中研究指出目的:药物浓度(100nM)甲状腺素对组织工程软骨形成的作用。方法:将软骨细胞聚集体分为常规培养组(DMED+10%FBS)和100nM甲状腺素组(DMED+10%FBS+100nM甲状腺素),体外培养1、2和3周取材进行大体形态、组织学、二型胶原和十型胶原免疫组化染色和软骨特异基因PCR分析。结果:100nM甲状腺素组形成的软骨细胞聚集体的体积和湿重均明显低于常规培养组,甲苯胺兰、二型胶原(ColⅡ)染色较常规培养组弱,软骨细胞特异基因的表达水平与常规培养组相似,软骨细胞肥大相关基因十型胶原(ColⅩ)及基质金属蛋白酶13(MMP13)的表达较对照组减弱,成骨方向分化相关基因(ColⅠ,Runx2)的表达与常规培养组相似。结论:高浓度甲状腺素能够抑制软骨细胞肥大,但同时也抑制了软骨细胞增殖和软骨细胞基质分泌。(本文来源于《中国美容医学》期刊2012年09期）
许荣耀[3]（2012）在《不同浓度庆大霉素对兔骨髓间充质干细胞体外软骨形成能力影响的研究》一文中研究指出目的本文研究兔骨髓间充质干细胞(Bone marrow stem cells, BMSCs)在体外分离培养、诱导分化为成软骨的能力,并初步观察不同浓度(0μg/m、10μg/ml、50μg/ml100μg/ml200μg/ml)庆大霉素对其增殖、分化成软骨的影响。方法无菌条件下,从8周龄家兔取下一侧股骨及胫腓骨,通过全血培养法分离骨髓间充质干细胞,接种于含有胎牛血清的DMEM培养液中培养传代。每日以倒置显微镜观察细胞形态及生长情况。取第叁代骨髓间充质干细胞分五组,包含一个对照组(培养液为兔骨髓间充质干细胞完全培养基：DMEM.10%胎牛血清、100U/m1青霉素、100μg/ml链霉素,不含庆大霉素)和四个含庆大霉素浓度组(分别是10μg/ml、50μg/ml、100μg/ml、200μg/ml加兔骨髓间充质干细胞完全培养基)。采用MTT比色法进行增殖活性比较,Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色和细胞甲苯胺蓝染色检测成软骨分化情况。结果1.体外培养的骨髓间充质干细胞呈扁平的梭形成纤维样细胞生长,且细胞形态均一,传代稳定。2.MTT实验显示庆大霉素在100μg/ml、200μg/ml抑制细胞增殖,其余各浓度组对细胞增殖无明显影响3.诱导后细胞甲苯胺蓝染色显示100μg/ml组及200μg/ml组细胞细胞染色较浅,大部分细胞失染,余各组阳性表达：Ⅱ型胶原免疫组织化学染色显示100μg/ml组及200μg/ml组细胞弱阳性表达,余各组阳性表达。结论1兔骨髓间充质干细胞取材简单方便,培养传代后增殖迅速,生长稳定。2兔骨髓间充质干细胞能向软骨细胞诱导分化。3庆大霉素在一定浓度(10μg/ml、50μg/ml)下对骨髓间充质干细胞的增殖和向软骨分化无明显影响,但高于一定浓度(100μg/ml,200μg/ml)则抑制骨髓间充质干细胞的增殖和软骨分化能力。(本文来源于《中南大学》期刊2012-05-01）
杨新,张旭鸣,卢峰[4]（2010）在《体外培养的半月板细胞软骨形成能力区划差异的分析研究》一文中研究指出目的比较经体外培养的半月板红区和白区细胞在软骨化形成能力方面的差异,验证细胞团粒作为半月板组织工程研究模型的可行性。方法分离半月板红区和白区细胞,进行平面扩增,并分别集结成细胞团粒,在形成细胞团粒后的当日,7,14和21 d收集细胞团粒样本,对样本进行DMMB、I型和II型胶原的免疫组化染色,以及DNA定量,sGAG和II型胶原的ELISA分析。结果在细胞团粒培养阶段,II型胶原、I型胶原和sGAG在细胞团粒中稳步累积,且胶原标志物呈现特异的空间分布形态。红区来源的半月板细胞具备比白区来源的细胞更强的sGAG、I型和II型胶原合成能力(P<0.05)。结论细胞团粒可以成为良好的半月板组织工程研究的微模型,在经过单层扩增和立体培养后,红区来源的半月板细胞较白区细胞具备更强的软骨化形成能力。(本文来源于《中国骨与关节损伤杂志》期刊2010年12期）
刘巍,朱新辉,崔道然,崔胜宇[5]（2010）在《骨形成蛋白7重组腺病毒转染培养兔软骨细胞的体外研究》一文中研究指出目的:观察骨形成蛋白7重组腺病毒(Ad-BMP7)转染兔软骨细胞后BMP7的表达。方法:分离培养3周龄兔膝关节软骨细胞,将Ad-BMP7转入,RT-PCR检测BMP7在mRNA水平的表达,Western Blot和免疫组化染色检测其在蛋白水平的表达。另设空白对照组。结果:实验组在mRNA水平和蛋白水平均能有效表达BMP7基因。结论:携带BMP7基因的重组腺病毒体外转染的关节软骨细胞,可以产生BMP7。(本文来源于《南通大学学报(医学版)》期刊2010年03期）
李强[6]（2010）在《TGF-β1对大鼠脂肪干细胞体外软骨形成能力影响的研究》一文中研究指出目的本文研究大鼠脂肪干细胞(adipose-derived stem cells ADSCs)在体外分离培养、诱导分化成软骨细胞的能力,初步观察不同浓度的TGF-β1对其增殖、分化成软骨细胞的影响,为软骨组织工程及临床应用提供科学依据。方法从3周龄SD大鼠腹股沟脂肪垫分离出脂肪组织,通过Ⅰ型胶原酶消化法分离干细胞,接种于含有胎牛血清的DMEM培养液中分离传代。每日以倒置显微镜观察细胞形态及生长情况。取第叁代脂肪干细胞分成5组,包含1个对照组(培养液为人脂肪干细胞完全培养基：高糖DMEM、10%胎牛血清、50nmol/L抗坏血酸、6.25mg/L胰岛素、100U/ml青霉素、100μg/ml链霉素、100nmol/L地塞米松,不含TGF-β1)和4个TGF-β1浓度组(浓度分别是1、10、40、80μg/L加人脂肪干细胞完全培养基)。采用MTT比色法进行分化和增殖活性比较,Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色和细胞甲苯胺蓝染色检测成软骨细胞分化情况。结果原代细胞接种4-6小时后即可见沉降贴壁,7-8天左右可见大量增殖,按一定方向性排列呈漩涡状或束状,传代后细胞增殖迅速,生长稳定。成软骨诱导后行细胞甲苯胺蓝染色示：10μg/LTGF-β1浓度组阳性,40μg/LTGF-β1浓度组和80μg/LTGF-β1浓度染色较淡,染色细胞少,0μg/LTGF-β1浓度组和1μg/LTGF-β1浓度组为阴性。Ⅱ型胶原免疫组织化学染色显示：10μg/L TGF-β1浓度组阳性；40μg/LTGF-β1浓度组和80μg/LTGF-β1浓度组为弱阳性；0μg/LTGF-β1浓度组和1μg/LTGF-β1浓度组为阴性。MTT实验显示10μg/L的TGF-β1可以促进细胞增殖(P<0.05)。结论1.大鼠脂肪干细胞能向成软骨细胞诱导分化；2.10μg/L的TGF-β1是脂肪干细胞增殖、分化成软骨细胞的最佳浓度；3.0、1、40、80μg/L的TGF-β1均不利脂肪干细胞增殖及软骨细胞形成。(本文来源于《中南大学》期刊2010-05-01）
陈晓辉[7]（2010）在《不同浓度庆大霉素对大鼠脂肪干细胞体外软骨形成能力影响的研究》一文中研究指出目的本文研究大鼠脂肪干细胞(adipose-derived stem cells ADSCs)在体外分离培养、诱导分化为成软骨的能力,并初步观察不同浓度(0μg／m、10μg／ml、50μg／ml、100μg／ml、200μg／ml)庆大霉素对其增殖、分化成软骨的影响。方法从3周龄SD大鼠腹股沟脂肪垫分离出脂肪组织,通过Ⅰ型胶原酶消化法分离干细胞,型胶原酶消化法分离干细胞,接种于含有胎牛血清的DMEM培养液中分离传代。每日以倒置显微镜观察细胞形态及生长情况。取第叁代脂肪干细胞分五组,包含一个对照组(培养液为人脂肪干细胞完全培养基：高糖DMEM、10%胎牛血清、50nmol／L抗坏血酸、6.25mg／L胰岛素、100U／ml青霉素、100μg／ml链霉素、100nmol／L地塞米松,10μg／L转化生长因子β1,不含庆大霉素)和四个含庆大霉素浓度组(分别是10μg／ml、50μg／ml、100μg／ml、200μg／ml加人脂肪干细胞完全培养基)。采用MTT比色法进行增殖活性比较,Ⅱ型胶原免疫细胞化学染色和细胞甲苯胺蓝染色检测成软骨分化情况。结果1.体外培养的脂肪间充质干细胞呈扁平的梭形成纤维样细胞生长,且细胞形态均一,传代稳定。2.MTT实验显示庆大霉素在100μg／ml、200μg／ml抑制细胞增殖,其余各浓度组对细胞增殖无明显影响3.诱导后细胞甲苯胺蓝染色显示100μg／ml组及200μg／ml组细胞细胞染色较浅,大部分细胞失染,余各组阳性表达：Ⅱ型胶原免疫组织化学染色显示100μg／ml组及200μg／ml组细胞弱阳性表达,余各组阳性表达。结论1大鼠脂肪干细胞易取材,培养传代后增殖迅速,生长稳定。2大鼠脂肪干细胞能向软骨细胞诱导分化。3庆大霉素在一定浓度(10μg／ml、50μg／ml)下对脂肪干细胞的增殖和软骨分化没有影响,但高于此浓度(100μg／ml,200μg／ml)则抑制脂肪干细胞的增殖和软骨分化能力。(本文来源于《中南大学》期刊2010-05-01）
李斌,张伟,王健,孙水,吴帅[8]（2009）在《体外微团培养兔骨髓间充质干细胞形成软骨细胞》一文中研究指出[目的]探讨兔骨髓间充质干细胞(bone mesenchymal stem cells,BMSCs)体外诱导形成软骨细胞的方法,以及转化生长因子-β1(transforming growth factorβ1,TGF-β1)、胰岛素样生长因子-Ⅰ(insulin-like growth factor-Ⅰ,IGF-Ⅰ)和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)之间的相互作用。[方法]对兔骨髓间充质干细胞体外进行原代和传代培养,按加入诱导条件不同分为四组:A组:TGF-β1+bFGF;B组:TGF-β1+IGF-Ⅰ;C组:TGF-β1;D组:空白对照组。3周后分别做四唑盐(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)比色试验、糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)检测和免疫组织化学染色。[结果]A、B、C叁组Ⅱ型胶原免疫组织化学检测阳性;MTT吸光度值和GAG含量检测结果均为:A组>C组>D组,B组>C组>D组,统计学有显着差异。[结论]兔BMSCs在一定条件下可以诱导成软骨细胞,TGF-β1和IGF-Ⅰ、bFGF在BMSCs向软骨细胞分化和增殖时起协同作用。(本文来源于《中国矫形外科杂志》期刊2009年23期）
宋世锋,肖海涛,武伟,袁素,谢瑶云[9]（2009）在《骨髓干细胞体外组织工程软骨形成的实验研究》一文中研究指出[目的]探讨骨髓干细胞(BMSCs)在体外不同载体中软骨形成的能力和可行性。[方法]分离培养猪BMSCs,将第3代BMSCs以载体内多点注射和表面点滴法植于A组:Ⅱ型纤维胶原蛋白海绵(fibrin collagen sponge),B组:生物蛋白海绵(fibrin collagen sponge and bFGF);C组:明胶海绵(gelatin sponge)3种载体上,于4周取材进行组织学分析。[结果]纤维胶原蛋白海绵和生物蛋白海绵组均有软骨细胞形成,明胶海绵无细胞生长。利用SPSS10.0软件统计学处理,显示B组软骨细胞阳性数量(92.75±10.57)多于A组(36.45±8.34),有统计学差异(P<0.01),两组都明显多于C组(0),有统计学差异(P<0.01)。[结论]MSCs经分离扩增后种植于叁维立体结构的纤维蛋白海绵载体上,在含有TGF-β1培养液中形成软骨;在TGF-β1和FGF的双重因子培养中,其软骨的形成能力明显增加。(本文来源于《中国矫形外科杂志》期刊2009年06期）
田洪涛,杨述华,付德浩,张宇坤,徐亮[10]（2008）在《软骨分化形成蛋白-2体外诱导小鼠骨髓基质干细胞向软骨分化》一文中研究指出目的研究软骨分化形成蛋白-2(CDMP-2)对小鼠骨髓基质干细胞软骨分化的作用。方法体外培养小鼠骨髓基质干细胞(MSCs),贴壁细胞传代,取第3代细胞,以不同浓度(0、10、20、50、100ng/ml)CDMP-2因子干预培养14d后,倒置相差显微镜观察细胞形态,RT-PCR、Westernblot和免疫细胞化学法检测不同浓度CDMP-2对Ⅱ型胶原表达的影响,阿尔辛蓝(Alcian)染色蛋白多糖。结果RT-PCR、Westernblot和免疫细胞化学显示经CDMP-2因子干预后,MSCs有Ⅱ型胶原mRNA和蛋白的表达,呈剂量依赖性;Alcian染色结果显示CDMP-2诱导细胞分泌蛋白多糖基质,高浓度组可见细胞小结区域呈明显的异染性。结论CDMP-2能够在体外定向诱导小鼠骨髓基质干细胞向软骨方向分化,50～100ng/ml为最佳剂量,为进一步探讨其在软骨发育机制中的作用提供了实验基础。(本文来源于《华中科技大学学报(医学版)》期刊2008年01期）
体外软骨形成论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的:药物浓度(100nM)甲状腺素对组织工程软骨形成的作用。方法:将软骨细胞聚集体分为常规培养组(DMED+10%FBS)和100nM甲状腺素组(DMED+10%FBS+100nM甲状腺素),体外培养1、2和3周取材进行大体形态、组织学、二型胶原和十型胶原免疫组化染色和软骨特异基因PCR分析。结果:100nM甲状腺素组形成的软骨细胞聚集体的体积和湿重均明显低于常规培养组,甲苯胺兰、二型胶原(ColⅡ)染色较常规培养组弱,软骨细胞特异基因的表达水平与常规培养组相似,软骨细胞肥大相关基因十型胶原(ColⅩ)及基质金属蛋白酶13(MMP13)的表达较对照组减弱,成骨方向分化相关基因(ColⅠ,Runx2)的表达与常规培养组相似。结论:高浓度甲状腺素能够抑制软骨细胞肥大,但同时也抑制了软骨细胞增殖和软骨细胞基质分泌。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
体外软骨形成论文参考文献
[1].蔡震,潘博,林琳,蒋海越,庄洪兴.残耳软骨细胞诱导脂肪来源干细胞体外软骨形成实验研究[J].中国修复重建外科杂志.2013
[2].刘瑾春,康宁,肖苒,刘霞,曹谊林.高浓度甲状腺素对软骨细胞聚集体(pellets)体外形成软骨组织的作用[J].中国美容医学.2012
[3].许荣耀.不同浓度庆大霉素对兔骨髓间充质干细胞体外软骨形成能力影响的研究[D].中南大学.2012
[4].杨新,张旭鸣,卢峰.体外培养的半月板细胞软骨形成能力区划差异的分析研究[J].中国骨与关节损伤杂志.2010
[5].刘巍,朱新辉,崔道然,崔胜宇.骨形成蛋白7重组腺病毒转染培养兔软骨细胞的体外研究[J].南通大学学报(医学版).2010
[6].李强.TGF-β1对大鼠脂肪干细胞体外软骨形成能力影响的研究[D].中南大学.2010
[7].陈晓辉.不同浓度庆大霉素对大鼠脂肪干细胞体外软骨形成能力影响的研究[D].中南大学.2010
[8].李斌,张伟,王健,孙水,吴帅.体外微团培养兔骨髓间充质干细胞形成软骨细胞[J].中国矫形外科杂志.2009
[9].宋世锋,肖海涛,武伟,袁素,谢瑶云.骨髓干细胞体外组织工程软骨形成的实验研究[J].中国矫形外科杂志.2009
[10].田洪涛,杨述华,付德浩,张宇坤,徐亮.软骨分化形成蛋白-2体外诱导小鼠骨髓基质干细胞向软骨分化[J].华中科技大学学报(医学版).2008
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