猿猴空泡病毒论文_刘瑞熙,李晓雨,杨硕,李小姣,杨志荣

导读:本文包含了猿猴空泡病毒论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:猿猴,病毒,空泡,杆状,颗粒,基因,蛋白。

猿猴空泡病毒论文文献综述

刘瑞熙,李晓雨,杨硕,李小姣,杨志荣[1](2016)在《猿猴空泡病毒40病毒样颗粒的制备及纯化》一文中研究指出本研究将猿猴空泡病毒40(Simian virus 40,SV40)的主要衣壳蛋白VP1通过Bac-toBac杆状病毒表达系统在昆虫细胞中大量表达,并自我装配成形态结构及免疫原性均与天然病毒粒子相同或相似的SV40病毒样颗粒(SV40virus-like particles,SV40VLPs),经表达条件优化及分子筛纯化,成功制备出高纯度的VLPs.聚丙烯酰胺凝胶电泳结果可见大小约为46kDa的VP1特异性条带.间接免疫荧光试验(IFA)证实VP1蛋白能够与异硫氰酸荧光素标记的羊抗鼠抗体发生反应,出现明显的特异性绿色荧光,具有良好的抗原性.纯化产物在透射电镜下可见直径约45nm的病毒样颗粒,显示出成功组装了SV40VLPs,免疫印迹试验证明VLPs能够与人抗SV40阳性血清发生反应,具有良好的抗原性.(本文来源于《四川大学学报(自然科学版)》期刊2016年02期)

孙海燕[2](2004)在《猿猴空泡病毒40(SV40)T基因的克隆与表达及其多抗在转基因小鼠中的应用》一文中研究指出猿猴空泡病毒40(SV40)是60年代初发现分离的猴肾细胞病毒,它是一种DNA病毒,其在体外可使人及动物多种组织类型正常细胞发生恶性转化,在转基因小鼠体内可诱发多种肿瘤形成,并且人类许多肿瘤的发生也与之有关。近年来,人们对SV40与人类肿瘤的关系进行了大量的研究。本实验室建立的SV40转基因小鼠肿瘤模型多发胰腺癌,为进一步研究SV40与肿瘤发生的关系,为人们研究癌症的病因、发病机理以及治疗提供有力的工具打下坚实的基础。 本文通过抽提COS-1细胞总RNA作为模板,根据GenBank中SV40 T基因序列设计一对引物,用RT-PCR技术扩增出921bp的SV40 T基因片段,克隆到pGEM-T easy载体中,经测序后,再亚克隆到pGEX-6p-1谷光甘肽-S-转移酶(GST)基因的下游,获得的重组质粒转化大肠杆菌BL_(21),用IPTG诱导SV40T基因片段的表达,经SDS-PAGE电泳及western-blotting分析,GST-S融合蛋白的分子质量为53kDa。用该表达产物免疫新西兰大白兔,所制备的抗血清经间接免疫荧光实验(IFA)显示可与COS-1细胞发生特异性反应,表明采用大肠杆菌原核表达系统所表达的融合蛋白具有SV40 T抗原的免疫原性。 用所制备的兔多抗血清(多克隆抗体IgG)为一抗,对本实验室的不同发育时期的SV40转基因小鼠的各重要器官和肿瘤组织进行SABC法免疫组织化学检测,发现只有发瘤小鼠的肿瘤组织细胞有特异性的棕黄色颗粒,呈阳性反应,表明由于SV40T抗原的表达使得正常的胰腺细胞发生恶性变化,从而导致肿瘤组织的形成,并且所表达的SV40T抗原大多数在细胞核内,进一步验证了SV40T抗原大部分定位于细胞核内,表明大T抗原为细胞转化启动所必需的,对转化起决定作用。与文献报道相符。其它脏器均为阴性反应。因此自制高免兔抗血清可用于SV40转基因小鼠的免疫学检测,这为从蛋白质水平检测转基因小鼠提供了切实可行的方法。(本文来源于《扬州大学》期刊2004-05-01)

猿猴空泡病毒论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

猿猴空泡病毒40(SV40)是60年代初发现分离的猴肾细胞病毒,它是一种DNA病毒,其在体外可使人及动物多种组织类型正常细胞发生恶性转化,在转基因小鼠体内可诱发多种肿瘤形成,并且人类许多肿瘤的发生也与之有关。近年来,人们对SV40与人类肿瘤的关系进行了大量的研究。本实验室建立的SV40转基因小鼠肿瘤模型多发胰腺癌,为进一步研究SV40与肿瘤发生的关系,为人们研究癌症的病因、发病机理以及治疗提供有力的工具打下坚实的基础。 本文通过抽提COS-1细胞总RNA作为模板,根据GenBank中SV40 T基因序列设计一对引物,用RT-PCR技术扩增出921bp的SV40 T基因片段,克隆到pGEM-T easy载体中,经测序后,再亚克隆到pGEX-6p-1谷光甘肽-S-转移酶(GST)基因的下游,获得的重组质粒转化大肠杆菌BL_(21),用IPTG诱导SV40T基因片段的表达,经SDS-PAGE电泳及western-blotting分析,GST-S融合蛋白的分子质量为53kDa。用该表达产物免疫新西兰大白兔,所制备的抗血清经间接免疫荧光实验(IFA)显示可与COS-1细胞发生特异性反应,表明采用大肠杆菌原核表达系统所表达的融合蛋白具有SV40 T抗原的免疫原性。 用所制备的兔多抗血清(多克隆抗体IgG)为一抗,对本实验室的不同发育时期的SV40转基因小鼠的各重要器官和肿瘤组织进行SABC法免疫组织化学检测,发现只有发瘤小鼠的肿瘤组织细胞有特异性的棕黄色颗粒,呈阳性反应,表明由于SV40T抗原的表达使得正常的胰腺细胞发生恶性变化,从而导致肿瘤组织的形成,并且所表达的SV40T抗原大多数在细胞核内,进一步验证了SV40T抗原大部分定位于细胞核内,表明大T抗原为细胞转化启动所必需的,对转化起决定作用。与文献报道相符。其它脏器均为阴性反应。因此自制高免兔抗血清可用于SV40转基因小鼠的免疫学检测,这为从蛋白质水平检测转基因小鼠提供了切实可行的方法。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

猿猴空泡病毒论文参考文献

[1].刘瑞熙,李晓雨,杨硕,李小姣,杨志荣.猿猴空泡病毒40病毒样颗粒的制备及纯化[J].四川大学学报(自然科学版).2016

[2].孙海燕.猿猴空泡病毒40(SV40)T基因的克隆与表达及其多抗在转基因小鼠中的应用[D].扬州大学.2004

论文知识图

、肝脏的HE染色结果(400x)、肾脏的HE染色结果(400x)、肿瘤组织的HE染色结果(200x)、SV4OT抗原简单的结构域图及其与Rb、p...SV4O病毒颗粒及基因组DNA示意图SV4O病毒的...经典NLS和NES介导的跨NPC核转运(引自...

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