导读:本文包含了生长激素启动子论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:生长激素,基因,子区,激素,蛋白,细胞,苍术。
生长激素启动子论文文献综述
徐敏,黄桂安,孟风艳,李娟,王亚军[1]（2015）在《猪生长激素受体(GHR)基因启动子的克隆及功能分析》一文中研究指出本研究以猪作为研究模型,对GHR基因启动子区开展了克隆、转录因子结合位点分析和启动子活性鉴定.结果表明:家猪GHR基因或由两个启动子(GHR-P1和GHR-P2)控制.GHR-P1的部分核苷酸序列与牛、羊对应核苷酸序列具有较高的同源性,但功能分析显示其启动子活性较低.针对GHR-P2的实验结果表明其具有典型的GHR组成型启动子特征,荧光素酶报告实验表明其具有启动子活性,因此我们推测本次克隆获得的GHR-P2是猪GHR的组成型启动子.(本文来源于《四川大学学报(自然科学版)》期刊2015年06期）
李莉,杨冉,万鹏,姚雅楠,杨国庆[2]（2015）在《β-乳球蛋白启动子控制生长激素基因在293细胞中的表达》一文中研究指出牛β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,BLG)启动子控制人生长激素(h GH)基因的表达载体p BLGH62可以在转基因小鼠的乳腺上皮细胞中高效表达.为了探索利用此表达载体在培养的细胞中生产人生长激素的可能性,将p BLGH62转染非乳腺细胞-人胚肾293细胞用胰岛素、地塞米松和催乳素进行诱导.结果显示,在细胞培养液中检测到人生长激素,说明p BLGH62能在293细胞中表达并能分泌到细胞外.但是,激素诱导对表达量的影响不明显.此外,人生长激素基因存在着可变剪接现象.(本文来源于《河南科学》期刊2015年03期）
田锋,钱海利,林晨,王任直[3]（2013）在《人生长激素启动子调控TNF-α表达载体的构建及体外靶向基因治疗垂体生长激素腺瘤》一文中研究指出目的构建人生长激素启动子(hGHp)调控的基因治疗载体pSNAV2.0-hGHp-TNFα并探索其对体外垂体生长激素腺瘤的抑制作用。方法以pSNAV2.0-hGHp-EGFP和pSNAV2.0-TNFα为基础通过酶切、连接反应构建pSNAV2.0-hGHp-TNFα,用脂质体转染法验证hGHp的靶向转录活性,用ELISA检测治疗基因TNFα的表达并用MTT法检测体外TNFα基因表达对垂体生长激素腺瘤的抑制作用。结果所得质粒pSNAV2.0-hGHp-TNFα的测序结果正确;pSNAV2.0-hGHp-EGFP只在GH3细胞检测到绿色荧光而在对照细胞中未检测到绿色荧光;转染了pSNAV2.0-hGHp-TNFα的实验组中GH3细胞的生长较对照组明显受抑制(P<0.05)。结论首次成功构建了质粒pSNAV2.0-hGHp-TNFα,且其可以明显抑制体外垂体生长激素腺瘤的生长。(本文来源于《基础医学与临床》期刊2013年05期）
阮楠,张明军,鞠辉明,白立景,赵为民[4]（2012）在《猪生长激素启动子的克隆及功能分析(英文)》一文中研究指出[目的]克隆猪生长激素启动子,确定其启动子核心序列和主要的顺式作用元件。[方法]根据NCBI上公布的序列设计引物,PCR扩增了猪生长激素5’端-1821~+61bp的序列,并通过移步缺失的方法,获得9段长短不一的启动子序列,将其分别构建到双荧光素酶表达载体pGL3-basic上。通过重组质粒瞬时转染大鼠垂体瘤细胞(GH3)、猪髋动脉血管内皮细胞(PIEC)和猪肾细胞(PK15)和转染后细胞荧光素酶活性的测定,检测这些5’末端缺失质粒在垂体及非垂体细胞中的相对转录活性。[结果]成功扩增了猪GH基因5’上游启动区1882bp的片段并构建了9个pGL3-mGHpromoter报告基因载体;双荧光素酶报告基因检测系统证实插入报告基因载体中的启动子具有非常强的细胞特异性。[结论]猪生长激素特异性在垂体细胞中表达,其最小启动子位于-110bp以内,启动子区-218~-110bp和-429~-218bp间存在正向调控元件。(本文来源于《Agricultural Science & Technology》期刊2012年04期）
阮楠[5]（2012）在《猪和小鼠生长激素核心启动子的鉴定及调控差异的研究》一文中研究指出生长激素（Growth hormone，GH）是生长轴中调控生长发育的核心因子，对动物的组织细胞生长与物质代谢具有极其广泛的调节作用，能明显促进软骨、骨及其他组织的生长，刺激胶原与蛋白质的合成，促进组织细胞对循环氨基酸的摄取与利用。生长激素的这些功能使其成为转基因动物中应用最早的基因，目前已生产出转GH基因家禽、啮齿类、鱼类、昆虫、猪等。转GH猪与正常猪相比生长速度快、饲料利用率及胴体瘦肉率大幅度提高。但同时也留下一些后遗症，如在G0代转基因猪中，死胎和畸形率较高。研究GH表达调控的机制，探索其体内的作用方式，避免表达外源生长激素引起的副作用，对于克服以上所述问题，促进畜牧业发展及GH临床应用均有重要的意义。上个世纪80年代对于人和大鼠生长激素转录调控方面的研究较多，但关于小鼠和猪生长激素表达调控机制的研究还未见报道。本研究从猪和小鼠GH基因启动子结构入手，采用生物信息学方法，对猪和小鼠GH5’侧翼序列进行比对分析，并构建一系列启动子缺失载体，通过检测双荧光素酶报告基因活性，分析GH基因启动区不同长度片段在垂体细胞及非垂体细胞中的活性，比较了猪和小鼠GH启动区结构的区别，研究两个物种GH基因转录水平调控的差异。利用TESS网站对GH启动区进行反式作用因子分析，并通过添加Sp1抑制剂MithramycinA，证实了Sp1对GH转录的调控作用。有研究证实，大鼠生长激素细胞特异性表达是由Pit-1、TR和一种识别-161bp~-146bp位点的未知蛋白与辅阻遏物如N-CoR共同决定的。但人生长激素启动区-500bp（包括Pit-1、Sp1和锌指蛋白结合位点）单独不能介导GH基因在转基因小鼠中的表达，还需要-32kb~-14.5kb的基因座控制区共同作用。为了研究猪和小鼠生长激素细胞特异性表达的机制，我们构建了Pit-1过表达载体和定点缺失载体。实验结果表明Pit-1是控制猪GH细胞特异性表达的主要因素，但对于小鼠生长激素启动子活性影响并不大。另外，近年来有研究证实，淋巴细胞分泌的细胞因子可以增强人生长激素的转录活性，因此，本研究还通过细胞培养实验证明细胞因子IL-6和IL-11对猪和小鼠生长激素的转录均有明显的正调控作用。(本文来源于《吉林大学》期刊2012-04-01）
阮楠,张明军,鞠辉明,白立景,赵为民[6]（2012）在《猪生长激素启动子的克隆及功能分析》一文中研究指出[目的]克隆猪生长激素启动子,确定其启动子核心序列和主要的顺式作用元件。[方法]根据NCBI上公布的序列设计引物,PCR扩增了猪生长激素5’端-1 821～+61 bp的序列,并通过移步缺失的方法,获得9段长短不一的启动子序列,将其分别构建到双荧光素酶表达载体pGL3-basic上。通过重组质粒瞬时转染大鼠垂体瘤细胞(GH3)、猪髋动脉血管内皮细胞(PIEC)和猪肾细胞(PK15)和转染后细胞荧光素酶活性的测定,检测这些5’末端缺失质粒在垂体及非垂体细胞中的相对转录活性。[结果]成功扩增了猪GH基因5’上游启动区1 882 bp的片段,并构建了9个pGL3-mGH promoter报告基因载体;双荧光素酶报告基因检测系统证实插入报告基因载体中的启动子具有非常强的细胞特异性。[结论]猪生长激素特异性在垂体细胞中表达,其最小启动子位于-110 bp以内,启动子区-218～-110 bp和-429～-218 bp间存在正向调控元件。(本文来源于《安徽农业科学》期刊2012年06期）
龚凤英,邓洁英,朱惠娟,潘慧[7]（2010）在《活化素抑制大鼠垂体GH_3细胞中人生长激素基因启动子的活性》一文中研究指出本研究旨在探讨活化素(activin)对大鼠垂体GH3细胞中人生长激素(hGH)基因启动子活性的影响及其可能的调节机制。采用荧光素酶报告基因方法。首先建立含hGH基因启动子(-484～+30bp)和荧光素酶融合基因的稳定转染GH3细胞株,然后加入活化素或同时加入活化素与相关信号转导途径的激动剂,通过检测细胞培养液和细胞裂解液中GH的含量,以及GH3细胞内荧光素酶的变化,反映活化素对GH分泌、合成和hGH基因启动子活性的影响。将含不同长度hGH基因启动子序列的荧光素酶表达质粒分别转染GH3细胞,观察它们对活化素的反应,寻找活化素影响hGH基因启动子活性的关键DNA序列。结果表明,活化素(5,50nmol/L)能抑制大鼠垂体GH3细胞中GH的分泌和合成,活化素(5,50nmol/L)还能够抑制GH3细胞中hGH基因启动子的活性,使之仅达对照组的77%和69%;在胞内信号转导激动剂中,丝裂原活化蛋白激酶激酶(MAPKK/MEK)特异性激动剂C6ceramide(1μmol/L)完全取消了活化素对hGH基因启动子活性的抑制作用;活化素发挥抑制作用所需要的hGH基因启动子关键序列位于-132～-66bp之间。上述研究表明,活化素能抑制大鼠垂体GH3中hGH基因启动子的活性,它可能是通过抑制细胞内依赖MAPK的信号转导途径来完成的,同时hGH启动子上-132～-66bp的序列在其中发挥重要的作用。(本文来源于《生理学报》期刊2010年01期）
龚凤英,邓洁英,朱惠娟,潘慧,张殿喜[8]（2010）在《细胞因子调节垂体MtT/S细胞中人生长激素基因启动子的活性》一文中研究指出目的:探讨细胞因子白介素-11(IL-11)、睫状神经营养因子(CNTF)和转化生长因子(TGF-β)对大鼠垂体MtT/S细胞中人生长激素(hGH)基因启动子活性的影响及其与垂体特异性转录因子Pit-1蛋白的关系。方法:采用荧光素酶报告基因的方法。首先建立含hGH基因启动子(-484～30 bp)和荧光素酶融合基因的稳定转化MtT/S细胞系,然后用细胞因子刺激,检测细胞培养液和细胞裂解液中GH的含量,反映它们对GH分泌和合成的影响;检测MtT/S细胞内荧光素酶的变化,说明细胞因子对hGH基因启动子活性的作用。将Pit-1蛋白表达质粒(pcDNA-pit-1-cDNA)单独转染或与Pit-1反义寡核苷酸(Pit-1OND)共转染于稳定转化的MtT/S细胞中,观察加入细胞因子后荧光素酶的变化,探讨细胞因子的作用与Pit-1蛋白的关系。结果:IL-11(20 nmol/L)、CNTF(10 nmol/L)能刺激大鼠垂体MtT/S细胞中GH的分泌和合成,增强MtT/S细胞中荧光素酶的表达,分别增加到对照组的134%、122%。TGF-β(5 nmol/L)能减少GH的分泌和合成,抑制荧光素酶的表达到对照组的72%。Pit-1蛋白过表达和表达被抑制对细胞因子的调节作用没有影响。结论:IL-11、CNTF和TGF-β通过调节大鼠垂体MtT/S细胞中hGH基因启动子活性影响GH的合成,Pit-1蛋白可能不参与这一调节作用。(本文来源于《中国免疫学杂志》期刊2010年02期）
王茂元[9]（2009）在《罗非鱼肌动蛋白基因启动子与生长激素基因的克隆及在真核细胞中的活性表达》一文中研究指出罗非鱼是世界性主要养殖鱼类,养殖范围已遍布105个国家和地区,是联合国粮农组织(FAO)向全世界推广养殖的优良品种。由于它具有味美、无脊间刺、易加工的优点,在许多国家正被作为海洋捕捞鱼类的替代品。随着世界海洋渔业资源量的减少,罗非鱼在国际水产品贸易中的地位越来越重要,交易量(额)逐年上升。通过转基因技术可以培育出生长快速、抗逆罗非鱼,为此我们通过分子生物学手段获得了两个构成转基因表达载体的重要元件：肌动蛋白基因启动子和生长激素基因。所以本研究内容包括两部分：以尼罗罗非鱼基因组DNA为模板,使用高保真PCR方法分离得到1675bp的β-actin基因启动子,且已知的典型调控序列并未发生变化。通过序列测定并与其他鱼类及人类β-actin基因启动子相比较,发现尼罗罗非鱼β-actin基因启动子调控区具有典型的启动子特征,含有TATA Box、CArG和CCAAT Box 3个重要的顺势作用元件。同时成功构建了CMV启动子缺失的含有p-actin基因启动子及EGFP基因的重组表达载体pEGFP-β-actin,并通过脂质体转染将重组表达载体pEGFP-β-actin转到NIH293T细胞中。荧光显微镜观察到NIH293T细胞中发出绿色荧光,结果表明尼罗罗非鱼β-actin基因启动子能够驱动EGFP的表达,证实在真核细胞水平尼罗罗非鱼β-actin基因启动子具有较好的表达活性。从尼罗罗非鱼(Oreochromis niloticus)脑垂体中分离其总RNA,经反转录合成为第一条cDNA链,再以第一条cDNA为模板,经过RT-PCR,克隆得到全长785bp的生长激素基因,序列分析表明：GH开放阅读框为615bp,共编码204个氨基酸；其中含有17个氨基酸的信号肽和187个氨基酸的成熟GH序列。同时我们将其插入到载体启动子下游,与增强型绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein, EGFP)报告基因融合,重组质粒经菌液PCR、限制性内切酶酶切和测序进行鉴定。通过脂质体转染分别将pEGFP-GH重组表达载体、pEGFP-N1转到293T细胞中,以检测尼罗罗非鱼GH基因表达的活性。结果显示,阳性对照组pEGFP-N1,有荧光表达的细胞占90%以上;pEGFP-GH可见绿色荧光,但是有荧光表达的细胞较少,强度较弱。上述实验现象表明,所获得的尼罗罗非鱼GH基因具有较好的表达活性,能够在真核细胞中表达。本研究成功获得了尼罗罗非鱼β-actin基因启动子和GH基因,同时通过细胞转染首次在真核细胞中有力的证实了其具有一定的生物活性；为进一步验证尼罗罗非鱼β-actin基因启动子和GH基因的生物活性,本试验还尝试将其转染到不同的真核细胞中,如Vero细胞(非洲绿猴肾细胞),仍然能够观察到有荧光发出,但强度要比在293T细胞中弱,这可能与细胞的特性有关。总之,本试验成功获得了有生物活性的尼罗罗非鱼β-actin基因启动子和GH基因,为将来进行转基因尼罗罗非鱼研究提供了两个重要的元件。此外,本人还对太湖鲢鱼mtDNAD-loop区遗传多样性进行了研究,结果表明,太湖鲢鱼的mtDNAD-loop个体序列变异程度较大,遗传多样性较为丰富。(本文来源于《南京农业大学》期刊2009-06-01）
郑茂恩,潘登科,冯书堂,刘晓,叶绍辉[10]（2009）在《小型猪生长激素基因启动子区SNPs分析》一文中研究指出利用PCR-SSCP方法检测4种小型猪(五指山猪、巴马猪、香猪和藏猪)和2种中大型猪(达兰猪和长白猪)生长激素(GH)基因的单核苷酸多态性。发现小型猪中有3处碱基突变发生在5′-调控区,对基因型和等位基因频率进行分析,4种小型猪生长激素5′-侧翼区基因位点中,等位基因A和D为优势等位基因,与达兰猪和长白猪中的分布差异显着(P<0.05)。以上结果表明猪品种间的体型差异可能与GH基因5′-调控区的基因突变和前导肽中的氨基酸变异有关。(本文来源于《畜牧兽医学报》期刊2009年05期）
生长激素启动子论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
牛β-乳球蛋白(β-lactoglobulin,BLG)启动子控制人生长激素(h GH)基因的表达载体p BLGH62可以在转基因小鼠的乳腺上皮细胞中高效表达.为了探索利用此表达载体在培养的细胞中生产人生长激素的可能性,将p BLGH62转染非乳腺细胞-人胚肾293细胞用胰岛素、地塞米松和催乳素进行诱导.结果显示,在细胞培养液中检测到人生长激素,说明p BLGH62能在293细胞中表达并能分泌到细胞外.但是,激素诱导对表达量的影响不明显.此外,人生长激素基因存在着可变剪接现象.
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
生长激素启动子论文参考文献
[1].徐敏,黄桂安,孟风艳,李娟,王亚军.猪生长激素受体(GHR)基因启动子的克隆及功能分析[J].四川大学学报(自然科学版).2015
[2].李莉,杨冉,万鹏,姚雅楠,杨国庆.β-乳球蛋白启动子控制生长激素基因在293细胞中的表达[J].河南科学.2015
[3].田锋,钱海利,林晨,王任直.人生长激素启动子调控TNF-α表达载体的构建及体外靶向基因治疗垂体生长激素腺瘤[J].基础医学与临床.2013
[4].阮楠,张明军,鞠辉明,白立景,赵为民.猪生长激素启动子的克隆及功能分析(英文)[J].AgriculturalScience&Technology.2012
[5].阮楠.猪和小鼠生长激素核心启动子的鉴定及调控差异的研究[D].吉林大学.2012
[6].阮楠,张明军,鞠辉明,白立景,赵为民.猪生长激素启动子的克隆及功能分析[J].安徽农业科学.2012
[7].龚凤英,邓洁英,朱惠娟,潘慧.活化素抑制大鼠垂体GH_3细胞中人生长激素基因启动子的活性[J].生理学报.2010
[8].龚凤英,邓洁英,朱惠娟,潘慧,张殿喜.细胞因子调节垂体MtT/S细胞中人生长激素基因启动子的活性[J].中国免疫学杂志.2010
[9].王茂元.罗非鱼肌动蛋白基因启动子与生长激素基因的克隆及在真核细胞中的活性表达[D].南京农业大学.2009
[10].郑茂恩,潘登科,冯书堂,刘晓,叶绍辉.小型猪生长激素基因启动子区SNPs分析[J].畜牧兽医学报.2009
论文知识图
