导读:本文包含了杂交杂交瘤论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:杂交瘤,细胞株,单克隆抗体,绦虫,细胞,血清,亚洲。
杂交杂交瘤论文文献综述
周勇,韩德明,马煜宁,程金平[1]（2019）在《抗萘单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建》一文中研究指出为了构建针对石油运输泄露导致的海洋环境中萘等多环芳烃污染的免疫学快速检测方法,需获得高效稳定的分泌抗萘单克隆抗体的杂交瘤细胞株。本文以2-萘丁酸-KLH为免疫抗原免疫BALb/c小鼠,间接竞争ELISA测定小鼠血清效价,用细胞融合筛选技术筛选抗萘单克隆抗体杂交瘤细胞株,捕获ELISA测定小鼠免疫球蛋白亚型。结果显示,实验小鼠免疫血清效价最高能达到1∶80000,经过HAT筛选、复检和亚克隆后得到5个能分泌抗萘单克隆抗体的细胞株,细胞株上清液效价最高能达到1∶15625,抗萘单克隆抗体免疫球蛋白亚型均为IgG1,Kappa轻链。本方法成功构建的杂交瘤细胞株能稳定高效分泌抗萘单克隆抗体,抗体亚型符合免疫学检测的特性,为萘的ELISA检测方法建立及胶体金免疫层析(GICA)试纸条的研制提供了稳定高效的单克隆抗体源。(本文来源于《海洋环境科学》期刊2019年05期）
吴元元,沈荣,李雄雄,应莲芳,周晖国[2]（2019）在《肺炎链球菌免疫小鼠程序的优化及杂交瘤细胞株的建立》一文中研究指出目的优化肺炎链球菌CSR SCS2 clone1小鼠的免疫程序,同时建立肺炎链球菌C多糖(C polysaccharides,CPs)杂交瘤细胞株。方法制备免疫抗原CSR SCS2 clonel,进行小鼠免疫程序优化:抗原量[(0. 5～2)×10~8个、(1～4)×108个、(2. 4～10)×10~8个)]、免疫间隔时间(3 d、1周、2周)、免疫途径(腹腔、腹股沟及尾静脉),同时确定抗原是否添加佐剂,间接ELISA法检测小鼠血清抗体水平。采用优化程序免疫小鼠,取血清效价最高的小鼠脾细胞,经传统单克隆抗体制备技术建立肺炎链球菌C-Ps杂交瘤细胞株,并检测细胞株的染色体数目及其分泌抗体的稳定性及特异性。结果确定小鼠最适免疫程序为:抗原量为(1～4)×108个,且需添加弗氏佐剂,免疫间隔时间为1周,免疫途径为腹股沟注射。最适程序免疫小鼠血清抗体效价达1∶12 000以上。建立了3株肺炎链球菌C-Ps杂交瘤细胞,命名为A4、G8、H10株,染色体数目分别为98、102和102,分泌的抗体具有良好的稳定性和特异性。结论成功优化了肺炎链球菌小鼠的免疫程序,并建立了肺炎链球菌C-Ps杂交瘤细胞株,为肺炎链球菌荚膜多糖中C-Ps含量检测方法的建立奠定了基础。(本文来源于《中国生物制品学杂志》期刊2019年08期）
宁梦夏[3]（2019）在《用于间接免疫荧光检测的羊口疮病毒单抗杂交瘤细胞的筛选与鉴定》一文中研究指出羊口疮(Orf)是一种急性、高度接触性传染病,对绵羊和山羊等小反刍经济动物健康养殖影响较大,引发该病的病原是羊口疮病毒(Orf virus,ORFV)。常规ORFV检测方法,如间接ELISA、PCR、细胞培养技术等,在Orf的流行病学调研、病原特性和病毒鉴定等方面的研究中发挥了极其重要的作用,但难以满足对感染组织器官和细胞中的ORFV抗原进行定位和直观判断的试验目的。间接免疫荧光(IFA)可特异、直观地检出组织细胞上的病毒抗原,在细胞水平对抗原进行定位,因此获得理化性状均一,结合抗原特异性强的ORFV的单抗,对于病毒的实验室研究和诊断等深入探究具有重要的价值。本研究以羊口疮疑似组织病料为材料,采用PCR、细胞培养技术等,对临床样品进行了检测和ORFV分离鉴定;以接种了ORFV的牛睾丸上皮细胞为检测标本,未经亚克隆化的ORFV杂交瘤细胞为材料,采用有限稀释法、间接免疫荧光试验(IFA),筛选分泌抗ORFV单抗的杂交瘤细胞,并对其进行鉴定。ORFV阳性山羊口唇部组织,制备冰冻组织切片,用经过鉴定的ORFV单抗进行IFA试验检测。本研究获得如下结果:1.从临床羊口疮疑似病料中分离出了一株羊口疮病毒地方毒株,该毒株可在牛睾丸上皮细胞大量增殖,F7细胞毒在牛睾丸上皮细胞的TCID50为10~(-6.39)/100μL;2.优化IFA检测羊口疮病毒抗体的条件为10~(3.70) TCID50 ORFV接种牛睾丸上皮细胞培养42 h,荧光素标记的二抗1:400稀释;3.利用IFA方法筛选获得了2株单克隆杂交瘤细胞株,分别命名为C8和E8;4.C8分泌的单抗类型为IgG1,识别表位大小为100-130Ku;E8分泌的单抗类型为Ig2b,识别蛋白约为100ku;5.C8和E8杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体,均对ORFV感染的培养细胞的IFA呈现特异性阳性结果,其中C8的单克隆抗体对确诊Orf患羊的口唇部组织切片的IFA呈现特异性阳性结果。结论:1.成功分离了一株羊口疮病毒地方毒株;2.优化了IFA检测羊口疮病毒抗体的条件;3.获得了2株分泌抗ORFV单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其中1株细胞分泌的单克隆抗体可用于病料组织中ORFV的IFA检测。(本文来源于《西北农林科技大学》期刊2019-06-01）
刘素生[4]（2019）在《抗铁蛋白杂交瘤细胞无血清培养技术研究》一文中研究指出杂交瘤细胞具有无限繁殖和抗体分泌的双重优势,其规模化培养工艺是当前生产抗体产品的重要技术。规模化无血清培养杂交瘤细胞具有简化工艺、降低生产成本、提高抗体产量等优点。本文研究了血清对骨髓瘤及杂交瘤细胞生长的影响,在此基础上研发了适合杂交瘤细胞生长的无血清培养基,并进一步研究了杂交瘤细胞无血清培养基的转瓶扩大培养,主要内容包括以下几个部分:第一,配制含不同血清浓度(10%、7.5%、5%)的DMEM培养基,将生长状态良好、处于对数期的5H2、Sp2/0-Ab、Sp2/0叁种细胞分别以叁种不同的接种密度接种到含上述培养基的12孔细胞培养板中,考查了不同血清浓度、不同接种密度对细胞生长与增殖的影响。通过细胞计数仪测量的数据表明血清浓度对叁种细胞都有较大影响,叁种细胞在10%血清浓度培养基中正常生长而在低血清浓度中不能正常生长,在相同的血清浓度下,具有高细胞接种密度的细胞增殖较快并且倍增时间短。第二,将DMEM培养基、Ham's F-12培养基和RPMI1640培养基按照一定比例配制成基础培养基,在此基础上加入不同量的胰岛素、水解蛋白、转铁蛋白、胆固醇和乙醇胺等成分配制成无血清低蛋白培养基。通过细胞的无血清驯化培养考查了细胞在配制的无血清培养基和市售的无血清培养基中的生长情况,结果表明,配制的Z4培养基与市售培养基有相同的效果,细胞可以正常生长。第叁,用Z4和H-SFM培养基分别进行5H2细胞转瓶批培养,测量培养基中葡萄糖、谷氨酰胺、乳酸、氨及抗体浓度的变化情况。结果表明,H-SFM培养基细胞数量在第5天达到最高点14.57×10~5个/mL,抗体生成速率明显提高,到第7天时抗体浓度为39μg/mL。Z4培养基细胞数量在第6天达到最高点19.87×10~5个/mL,第7天时抗体浓度为56μg/mL。Z4培养基和H-SFM培养基中葡萄糖和谷氨酰胺浓度都呈现下降趋势,乳酸和氨浓度都呈上升趋势,适当提高葡萄糖和谷氨酰胺的起始浓度细胞生长也会有所提升。(本文来源于《河北大学》期刊2019-05-01）
王立群,梁盼红,张少华,侯俊玲,王莉杰[5]（2019）在《亚洲带绦虫45 kDa雌激素调节蛋白的表达及其杂交瘤细胞株的筛选与鉴定》一文中研究指出目的筛选并制备亚洲带绦虫45 kDa雌激素调节蛋白(Ta EP45)的杂交瘤细胞株。方法设计带有酶切位点的特异性引物,以亚洲带绦虫成虫总RNA为模板, RT-PCR扩增Ta EP45完整的开放阅读框(ORF),克隆至原核表达载体pET-30a (+),转化至大肠埃希菌BL21 (DE3),用1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达带组氨酸(His)标签的TaEP4蛋白,用亚洲带绦虫囊尾蚴阳性猪血清蛋白质印迹(Western blotting)分析Ta EP45的反应原性。以纯化的Ta EP45免疫BALB/c小鼠(100μg/鼠,首次免疫用等量弗氏完全佐剂,第2、第3次免疫用等量弗氏不完全佐剂),选择血清抗体效价高的小鼠,取脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞融合,用纯化的Ta EP45和His标签蛋白ELISA筛选阳性杂交瘤细胞株,用亚洲带绦虫全虫抗原Western blotting鉴定杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体。结果 RT-PCR扩增获得的Ta EP45基因ORF长1 362 bp,编码453个氨基酸。重组融合蛋白的相对分子质量(Mr)约为60 000,可被亚洲带绦虫囊尾蚴阳性猪血清识别。筛选获得5株稳定分泌Ta EP45抗体的杂交瘤细胞株,其抗体效价均≥1∶2 430,亚型分别为IgG2b或IgG1。Western blotting分析结果显示, 5株杂交瘤细胞株分泌的单克隆抗体均能与亚洲带绦虫全虫抗原发生反应。结论表达纯化了Ta EP45,筛选出5株能稳定分泌高滴度Ta EP45单克隆抗体的杂交瘤细胞株,其分泌的单克隆抗体能与亚洲带绦虫全虫抗原发生反应。(本文来源于《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》期刊2019年01期）
周勇,张佳琪,廖浩祥,马煜宁,程金平[6]（2019）在《抗DEP单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建》一文中研究指出为构建针对水环境中邻苯二甲酸二乙酯(Diethyl phthalate,DEP)等邻苯二甲酸酯类(Phthalates,PAEs)化合物的免疫学快速检测方法,需获得高效稳定的分泌抗DEP单克隆抗体的杂交瘤细胞株.以邻苯二甲酸单乙酯(Monoethylphthalate,MEP)-BSA为免疫抗原免疫BALb/c小鼠,间接竞争ELISA测定小鼠血清效价,用细胞融合筛选技术筛选抗DEP单克隆抗体杂交瘤细胞株.结果显示,实验小鼠免疫血清效价最高能达到1:5 000,经过HAT筛选、复检和亚克隆后得到9个能分泌抗DEP单克隆抗体的细胞株,细胞株上清液效价最高能达到1:10 000,对DEP的抑制率最高能达到86.5%,且其对11种结构类似物的交叉反应率均低于0.1%,特异性较好.本研究成功构建的杂交瘤细胞株能稳定高效分泌抗DEP单克隆抗体,可为DEP的ELISA检测方法建立及胶体金免疫层析(Colloidal gold immunochromatography assay,GICA)试纸条的研制提供稳定高效的单克隆抗体源.(图8表2参23)(本文来源于《应用与环境生物学报》期刊2019年03期）
孙静静,周伟伟,周雷鸣,赵巧辉,李桂林[7]（2018）在《杂交瘤细胞体外大规模培养研究进展》一文中研究指出单克隆抗体在生物学和医学研究领域中显示了极大的应用价值,是免疫检验中的新型试剂,是生物治疗的导向武器。作为医学检验试剂,单克隆抗体可以充分发挥其优势,如特异性好,灵敏度高,更便于质量控制,利于标准化和规范化。传统的方法是利用小鼠腹水制备单克隆抗体,但是近几十年杂交瘤细胞体外大规模培养制备单克隆抗体技术也在不断发展。特别是单克隆抗体在疾病诊断和治疗方面的需求,更进一步促进了杂交瘤细胞体外培养生产技术的发展,体外培养杂交瘤细胞生产的单克隆抗体已应用到许多方面。由于杂交瘤细胞的半贴壁性质,无论是悬浮培养还是贴壁培养,均可进行杂交瘤细胞的体外大规模培养。针对应用于体外诊断试剂的杂交瘤细胞体外培养制备单克隆抗体进行综述,主要包括中空纤维细胞培养和生物反应器细胞培养方法,以及不同培养方法优化的进展。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2018年10期）
王立群,梁盼红,张少华,侯俊玲,李艳萍[8]（2018）在《亚洲带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂EP45的表达及其杂交瘤细胞株的筛选与鉴定》一文中研究指出目的制备亚洲带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂EP45(Taserpin EP45)蛋白的单克隆抗体。方法设计带有酶切位点的特异性引物,以亚洲带绦虫成虫RNA为模板,经RT-PCR扩增获得Taserpin EP45的完整ORF。克隆至原核表达载体p ET-30a(+),转化大肠杆菌DH5α感受态细胞进行表达,应用Western-blot对重组蛋白反应原性进行分析。以纯化的重组蛋白作为免疫原免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞和SP2/0骨髓瘤细胞融合,ELISA筛选阳性杂交瘤细胞株。结果 RT-PCR扩增获得的基因序列大小为1 362bp,编码453个氨基酸,重组融合蛋白的分子质量约60 ku,可被亚洲带绦虫囊尾蚴阳性血清识别。筛选获得了5株稳定分泌Taserpin EP45抗体的杂交瘤细胞株,其抗体效价均在1:2 430或以上,亚型分别为Ig G2b和Ig G1,且与虫体天然抗原发生反应。结论成功构建了能稳定分泌EP45的杂交瘤细胞株,为进一步研究Taserpin EP45的生物学功能和建立有效的亚洲带绦虫血清学检测方法奠定了基础。(本文来源于《第十一届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会摘要集》期刊2018-08-10）
张亚骏,徐升敏,吴涛,陈少鹏,许安[9]（2018）在《构建基于叁维人鼠杂交瘤AL细胞的污染物遗传毒性评估体系》一文中研究指出近年来,污染物在环境中扩散、富集以及对生态安全和健康的影响,越来越受到人们的关注。已有大量的研究从细胞水平检测并研究了多种环境污染物的毒性效应。但由于与组织和个体的差异,细胞实验的结果往往与体内实验结果存在较大差异~([1])。叁维(3D)细胞培养技术,通过在体外让细胞形成体内组织样结构,为研究提供更真实的细胞信息提供了重要的手段。本研究中,我们构建了一个基于人与中国仓鼠杂交瘤细胞AL细胞的叁维遗传毒性检测体系,并探讨了其用于环境污染物遗传毒性检测的可能性。我们的研究结果显示,我们构建的AL细胞叁维遗传毒性检测体系在细胞形态、干性基因以及连接基因表达等方面具备了叁维组织的特性~([2,3])。利用该系统,我们进一步研究和比对了砷和纳米银的遗传毒性,结果表明10μM砷10μg/mL纳米银导致的遗传突变率远低于在二维细胞中获得的结果,与动物实验结果相类似~([4])。通过ICP-MS检测发现,由于组织多层结构减少外界刺激与内部细胞的接触,叁维系统表现出类似于组织的对外界环境的抵抗作用。本研究工作拓展了人与仓鼠杂交瘤细胞AL细胞的突变检测范围,为深入研究环境污染物的真实毒性和模拟污染物组织及体内作用过程提供了重要的技术手段。(本文来源于《第十次全国分析毒理学大会暨第六届分析毒理专业委员会会议论文集》期刊2018-06-24）
李延芳,赵晴晴[10]（2018）在《分泌猪PD-L1杂交瘤细胞株的稳定性研究概述》一文中研究指出杂交瘤细胞分泌单克隆抗体,在制备单克隆抗体的过程中,尤为重要的环节是筛选分泌特异性单克隆抗体的杂交瘤细胞株。脾细胞和骨髓瘤细胞2个细胞融合而成的细胞是杂交瘤细胞,基因表达不稳定,培养传代或冻存过程中,轻易会缺失或大幅度使分泌单克隆抗体的能力下降,所以在筛选出特异性杂交瘤细胞株后的一段时间内,要多次检测其分泌抗体的能力。一般实验室研究通过杂交瘤细胞技术,前期筛选出一株能分泌猪PD-L1蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株3B5,利用酶联免疫吸附实验(enzyme linked immunodeficient assay,ELISA)来测定杂交瘤细胞3B5分泌单克隆抗体的上清效价,来研究杂交瘤细胞的稳定性,杂交瘤细胞株3B5在冻存后30天、60天和90天复苏,ELISA检测细胞培养上清的抗体效价。(本文来源于《饮食科学》期刊2018年02期）
杂交杂交瘤论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的优化肺炎链球菌CSR SCS2 clone1小鼠的免疫程序,同时建立肺炎链球菌C多糖(C polysaccharides,CPs)杂交瘤细胞株。方法制备免疫抗原CSR SCS2 clonel,进行小鼠免疫程序优化:抗原量[(0. 5～2)×10~8个、(1～4)×108个、(2. 4～10)×10~8个)]、免疫间隔时间(3 d、1周、2周)、免疫途径(腹腔、腹股沟及尾静脉),同时确定抗原是否添加佐剂,间接ELISA法检测小鼠血清抗体水平。采用优化程序免疫小鼠,取血清效价最高的小鼠脾细胞,经传统单克隆抗体制备技术建立肺炎链球菌C-Ps杂交瘤细胞株,并检测细胞株的染色体数目及其分泌抗体的稳定性及特异性。结果确定小鼠最适免疫程序为:抗原量为(1～4)×108个,且需添加弗氏佐剂,免疫间隔时间为1周,免疫途径为腹股沟注射。最适程序免疫小鼠血清抗体效价达1∶12 000以上。建立了3株肺炎链球菌C-Ps杂交瘤细胞,命名为A4、G8、H10株,染色体数目分别为98、102和102,分泌的抗体具有良好的稳定性和特异性。结论成功优化了肺炎链球菌小鼠的免疫程序,并建立了肺炎链球菌C-Ps杂交瘤细胞株,为肺炎链球菌荚膜多糖中C-Ps含量检测方法的建立奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
杂交杂交瘤论文参考文献
[1].周勇,韩德明,马煜宁,程金平.抗萘单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建[J].海洋环境科学.2019
[2].吴元元,沈荣,李雄雄,应莲芳,周晖国.肺炎链球菌免疫小鼠程序的优化及杂交瘤细胞株的建立[J].中国生物制品学杂志.2019
[3].宁梦夏.用于间接免疫荧光检测的羊口疮病毒单抗杂交瘤细胞的筛选与鉴定[D].西北农林科技大学.2019
[4].刘素生.抗铁蛋白杂交瘤细胞无血清培养技术研究[D].河北大学.2019
[5].王立群,梁盼红,张少华,侯俊玲,王莉杰.亚洲带绦虫45kDa雌激素调节蛋白的表达及其杂交瘤细胞株的筛选与鉴定[J].中国寄生虫学与寄生虫病杂志.2019
[6].周勇,张佳琪,廖浩祥,马煜宁,程金平.抗DEP单克隆抗体杂交瘤细胞株的构建[J].应用与环境生物学报.2019
[7].孙静静,周伟伟,周雷鸣,赵巧辉,李桂林.杂交瘤细胞体外大规模培养研究进展[J].中国生物工程杂志.2018
[8].王立群,梁盼红,张少华,侯俊玲,李艳萍.亚洲带绦虫丝氨酸蛋白酶抑制剂EP45的表达及其杂交瘤细胞株的筛选与鉴定[C].第十一届全国寄生虫学青年工作者学术研讨会摘要集.2018
[9].张亚骏,徐升敏,吴涛,陈少鹏,许安.构建基于叁维人鼠杂交瘤AL细胞的污染物遗传毒性评估体系[C].第十次全国分析毒理学大会暨第六届分析毒理专业委员会会议论文集.2018
[10].李延芳,赵晴晴.分泌猪PD-L1杂交瘤细胞株的稳定性研究概述[J].饮食科学.2018
论文知识图
