论文摘要
目的:探讨沉默厚体1(DKK1)基因对胃癌AGS细胞增殖、周期和凋亡的影响及其作用机制。方法:构建DickkopfsiRNA(DKK1-siRNA)稳定转染细胞株,提取稳定转染细胞的RNA及总蛋白,qPCR和WB实验分别检测DKK1 mRNA及蛋白的表达水平。实验分为空白对照(Control)组、阴性对照(shNC)组及沉默DKK1(DKK1-shRNA)组,CCK-8实验检测各组培养0、24、48、72、96、120、144 h后AGS细胞的增殖情况,流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡水平。检索HPA数据库,分析DKK1与胃癌临床病理的关系。结果:成功建立了稳定沉默DKK1基因的胃癌细胞株AGS,证实DKK1-shRNA组细胞中DKK1 mRNA及蛋白表达水平分别比Control组和shNC组降低到72%和47%(均P<0.05)。细胞增殖曲线显示,与Control和shNC组比较,DKK1-shRNA组细胞培养72h后其增殖显著降低(P<0.05)。与shNC组比较,DKK1-shRNA组S期细胞从32.06%降低到25.87%,G2/M期细胞由8.49%上升到21.26%,细胞凋亡率从10.34%上升到20.65%,差异均有统计学意义(均P<0.05)。HPA数据库的分析显示,胃癌组织中DKK1 mRNA水平显著高于胃正常组织,DKK1 mRNA的高表达与胃癌患者生存率呈负相关(均P<0.05)。结论:沉默DKK1基因可抑制胃癌AGS细胞的增殖,阻滞细胞于G2/M期并促进细胞凋亡;DKK1在胃癌中发挥促癌作用。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 骆梅,周建奖,王琴容,杨丽萍,陈学书,龙妮娅,谢渊,赵艳
关键词: 厚体基因,胃癌,细胞,增殖,细胞周期,凋亡
来源: 中国肿瘤生物治疗杂志 2019年12期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技
专业: 肿瘤学
单位: 贵州医科大学地方病与少数民族疾病教育部重点实验室,贵州医科大学分子生物学重点实验室,贵州医科大学附属医院临检科
基金: 国家自然科学基金资助(No.31560326,No.31760328,No.31660031),贵州省科技计划资助项目(No.[2017]5652),贵阳市科技计划资助项目(No.[2017]5-16,[2017]30-4)~~
分类号: R735.2
页码: 1324-1330
总页数: 7
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