流行性出血病病毒抗原捕获ELISA方法的建立

论文摘要

为建立流行性出血病病毒（EHDV）病原学检测方法,本试验用纯化处理的4种血清型病毒（EHDV-2、5、6和8）混合免疫兔和豚鼠,制备高免血清。以兔抗EHDV为捕获抗体,豚鼠抗EHDV为检测抗体,羊抗豚鼠IgG-HRP为酶标抗体,建立了EHDV抗原捕获ELISA（antigen capture ELISA,AC-ELISA）方法。通过反应条件优化,获得最佳工作条件:5%马血清为稀释液,包被抗体1∶15 000稀释,检测抗体1∶20 000稀释,酶标抗体1∶15 000稀释。通过检测60份阴性样品确定临界值,P/N值≥2为阳性、P/N值<1.5为阴性;特异性试验表明该方法仅能检测出各血清型EHDV、蓝舌病病毒（BTV）、赤羽病病毒（AKAV）及中山病毒（CHUV）无交叉反应;敏感性试验表明该方法可以检出102.47±0.07 TCID50的病毒;批内和批间变异系数均<10%;用RT-PCR与该方法同时对70份参考样品进行检测,符合率为92.86%。表明本试验建立的AC-ELISA方法为EHDV抗原检测提供了一种可靠实用的技术手段。

论文目录

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 杨振兴,朱建波,肖雷,高林,苗海生,何于雯,孟锦昕,杨恒,李华春

关键词: 流行性出血病病毒,抗原捕获,多克隆抗体

来源: 中国兽医学报 2019年01期

年度: 2019

分类: 农业科技,基础科学

专业: 生物学,畜牧与动物医学

单位: 云南省畜牧兽医科学院云南省热带亚热带动物病毒病重点实验室

基金: 国家重点研发计划资助项目(2016YFD0500908),国家公益性行业(农业)科研专项资助项目(201303035)

分类号: S852.65

DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.01.01

页码: 1-7

总页数: 7

文件大小: 487K

下载量: 89

相关论文文献

• [1].云南省边境地区牛流行性出血病病毒血清学调查[J]. 云南畜牧兽医 2016(05)
• [2].广东一株牛源流行性出血病病毒的分离鉴定[J]. 中国预防兽医学报 2017(01)
• [3].2013～2016年中国流行性出血病病毒血清型5型的分离与遗传特征分析[J]. 病毒学报 2020(03)
• [4].我国牛羊流行性出血病血清抗体调查[J]. 中国预防兽医学报 2019(01)
• [5].血清6型流行性出血病病毒在我国云南的首次分离与鉴定[J]. 中国预防兽医学报 2019(11)
• [6].流行性出血病病毒一步法RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 中国兽医科学 2019(03)
• [7].鹿流行性出血病病毒高通量液相芯片检测方法的建立[J]. 动物医学进展 2010(02)
• [8].流行性出血病病毒血清分型RT-PCR方法的建立及应用[J]. 华中农业大学学报 2020(04)
• [9].流行性出血病病毒(EHDV)血清7型毒株在中国的首次分离与鉴定[J]. 畜牧兽医学报 2019(03)
• [10].流行性出血病多克隆抗体C-ELISA检测方法的建立[J]. 畜牧兽医学报 2018(07)
• [11].蓝舌病病毒和流行性出血病病毒双重荧光定量RT-PCR检测方法的建立及应用[J]. 中国兽医科学 2019(09)
• [12].流行性出血病病毒(EHDV)血清型特异性荧光定量RT-PCR方法的建立及初步应用[J]. 病毒学报 2020(05)
• [13].云南和广东省流行性出血病病毒血清6型毒株(EHDV-6)的分离与遗传特性[J]. 华南农业大学学报 2020(04)
• [14].夏季鱼病预防措施[J]. 渔业致富指南 2011(17)
• [15].野生动物反刍动物出血病的诊断[J]. 畜牧兽医科技信息 2015(04)

标签：流行性出血病病毒论文;  抗原捕获论文;  多克隆抗体论文;