烟草NtTkr尾部点突变对卷曲螺旋结构及与靶蛋白相互作用的影响

论文摘要

NtTkr是个在烟草分裂旺盛组织中优势表达的驱动家族新成员,尾部有3个卷曲螺旋（Coiled-coil,CC1-3）,已知位于CC3 1084位的T缺失或点突变会影响其分布,推测该改变可能受与其结合的蛋白底物的影响。为确定T1084缺失或点突变对NtTkr与候选蛋白互作的影响,通过重叠延伸PCR在烟草NtTkr尾部引入T1084缺失（T1084d）和T1084A点突变,克隆入pGBKT7获诱饵表达载体,转入AH109并分别与携带pGADT7-H2A/Sulfer/NT3的Y187接合后进行双杂交检测。结果表明T1084A与T相近,但先于T显蓝色,且颜色较T深;T1084d明显不如T;一级结构和Coiled-coil软件分析表明T1084处于CC3的a位,属极性亲水氨基酸,将其替换为非极性疏水的丙氨酸可增强七肽重复序列结构域（HR结构域）的疏水性,并造成七肽重复序列增长,T1084缺失则造成其缩短。表明增加HR结构域的疏水性和七肽重复序列的长度可增强NtKrp与候选蛋白的互作,而缩短卷曲螺旋的长度则造成其相互作用的减弱。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 徐林娜,胡孟可,童文艳,李芬

关键词: 卷曲螺旋,定点突变,蛋白相互作用

来源: 生物技术通报 2019年05期

年度: 2019

分类: 基础科学,农业科技

专业: 生物学

单位: 河南师范大学生命科学学院

基金: 教育部留学回国人员启动基金(5201049130104)

分类号: Q943.2

DOI: 10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2018-0957

页码: 64-69

总页数: 6

文件大小: 1842K

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