鸡传染性支气管炎病毒M41株的致病性及排毒规律

鸡传染性支气管炎病毒M41株的致病性及排毒规律

论文摘要

本试验针对鸡传染性支气管炎病毒(IBV)呼吸型M41标准株的S1基因设计并合成引物,构建了阳性质粒标准品;经过不断优化建立了检测IBV-M41 SYBR GreenⅠReal-Time PCR标准曲线。通过对8日龄SPF鸡人工感染IBV-M41发病,采用Real-Time PCR方法跟踪检测其泄殖腔排毒情况;剖检并采集试验鸡的相关器官制作病理切片;在临床观察的基础上记录试验鸡的体质量、体温等指标。结果显示,所建立的检测方法重复性好,特异性高,最低可检测到28.3拷贝/μL的病毒核酸。人工感染病毒3~15 d后在鸡的排泄物中均检测到了病毒;攻毒组鸡临床症状明显,相关组织器官均呈现不同程度的病变。该病毒致病性试验、排毒规律和real-time PCR检测方法的建立,为IBV感染鸡作为实验动物模型进行相关药物的临床药效评价提供方法与依据。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 病毒株
  •   1.2 实验动物
  •   1.3 试验试剂与主要试验仪器
  •   1.4 SYBR GreenⅠReal-Time PCR引物的设计与阳性质粒标准品的制备
  •   1.5 IBV-M41 SYBR GreenⅠReal-Time PCR标准曲线建立
  •   1.6 敏感性试验
  •   1.7 特异性试验
  •   1.8 重复性试验
  •   1.9 人工感染试验与病理切片制作
  •   1.10 病料核酸提取与荧光定量检测
  • 2 结果
  •   2.1 普通PCR鉴定重组质粒结果
  •   2.2 质粒浓度计算与标准曲线建立
  •   2.3 real-time荧光定量PCR的敏感性
  •   2.4 real-time荧光定量PCR的重复性与特异性
  •   2.5 人工感染IBV-M41的试验鸡临床表现与组织器官病理变化
  •   2.6 两组试验鸡体质量差别比较
  •   2.7 两组试验鸡体温比较
  •   2.8 攻毒组试验鸡泄殖腔排毒检测
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 潘力,林树乾,于可响,李桂明,杨世发,宋玲玲,董雯雯,李颖,逯月,王林,王振勇

    关键词: 鸡传染性支气管炎病毒,病理变化,排毒规律

    来源: 中国兽医学报 2019年05期

    年度: 2019

    分类: 农业科技,基础科学

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 山东农业大学动物科技学院,山东省农业科学院家禽研究所

    基金: 山东省重点研发计划“防治禽流感中药口服液的研制与推广”资助项目(2016GNC113007),山东省农业重大应用技术创新“安全,高效,优质禽肉产品生产关键技术集成与示范”资助项目(鲁财农指[2016]36号),济南市金种子企业关键产品提升计划“防治家禽病毒性呼吸道疾病中兽药的开发与应用”资助项目(201602258)

    分类号: S852.65

    DOI: 10.16303/j.cnki.1005-4545.2019.05.06

    页码: 842-847

    总页数: 6

    文件大小: 1449K

    下载量: 194

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