龙胆苦苷对过氧化氢诱导HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用研究

论文摘要

目的对龙胆苦苷对过氧化氢（H2O2）所致HepG2细胞氧化损伤的作用及其机制进行研究。方法以800μmol/L H2O2损伤细胞6 h建立模型; CCK8法检测细胞存活率选取龙胆苦苷10、20、40μmol/L作为干预剂量;实验分为5组,即正常组、模型组和龙胆苦苷低、中、高剂量组,诱导成功后用微量法检测细胞内MDA含量变化,荧光共聚焦检测细胞内ROS水平,运用Westem blot法检测各组细胞Nrf2蛋白的表达,以及对细胞中Nrf2激活的分子机制进行硏究。结果与正常组比较,模型组MDA含量、ROS水平增加（P <0. 05）,Nrf2蛋白表达量明显下调（P <0. 05）。与模型组比较,龙胆苦苷高剂量组MDA含量显著降低（P <0. 05）,Nrf2蛋白表达量明显上调（P <0. 05）。结论龙胆苦苷预处理可提高细胞存活率,促进Nrf2核转移,Nrf2的表达变化与P13K/AKT通路有关,可增强体内抗氧化性应激系统、清除氧自由基、降低细胞凋亡。

论文目录

1 材料与方法

1.1 材料与仪器

1.2 方法

1.2.1 细胞培养和传代

1.2.2 CCK8法测定龙胆苦苷对HepG2增殖活力的影响

1.2.3 HepG2肝癌细胞氧化应激模型的建立

1.2.4 CCK8法检测龙胆苦苷对细胞的保护作用

1.2.5 实验分组

1.2.6 生物试剂盒检测细胞内MDA含量

1.2.7 荧光共聚焦检测细胞内ROS水平

1.2.8 Westem blot法检测细胞Nrf2蛋白表达水平

1.2.9 龙胆苦苷对HepG2细胞中Nrf2激活的分子机制硏究

1.3 统计学方法

2 结果

2.1 CCK8法检测龙胆苦苷对HepG2细胞增殖的影响

2.2 氧化应激模型的建立

2.3 CCK8法检测龙胆苦苷对细胞的保护作用

2.4 MDA测定

2.5 荧光共聚焦检测细胞内ROS情况

2.6 龙胆苦苷对细胞内Nrf2的激活

2.7 龙胆苦苷对细胞内Nrf2激活的分子机制研究

3 讨论

文章来源

类型: 期刊论文

作者: 肖琨珉,孔晨帆,姚树坤

关键词: 龙胆苦苷,细胞,氧化应激

来源: 世界中西医结合杂志 2019年11期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技

专业: 中药学

单位: 北京中医药大学,中日友好医院

基金: 北京市科委G20工程创新研究十病十药研发项目(Z171100001717008)

分类号: R285.5

DOI: 10.13935/j.cnki.sjzx.191112

页码: 1530-1534

总页数: 5

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龙胆苦苷对过氧化氢诱导HepG2细胞氧化应激损伤的保护作用研究

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