导读:本文包含了烟草钙调素结合蛋白激酶论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:激酶,蛋白,烟草,磷酸化,玉米,信号,植物。
烟草钙调素结合蛋白激酶论文文献综述
华玮,李荣俊,梁述平,吕应堂[1](2005)在《烟草幼苗两种钙调素结合蛋白激酶的活性调节及基因表达》一文中研究指出在体外条件下,烟草两种钙调素结合蛋白激酶(NtCBK1与NtCBK2)自磷酸化活性的最适pH分别是7.5和8;Mg2+离子浓度对两种激酶自磷酸化活性影响比Na+离子大。Northern杂交结果显示:两基因在花和叶中都有大量表达,但在根和茎中NtCBK1的表达量明显多于NtCBK2;高盐处理会引起NtCBK1基因表达量升高,而高温、低温和干旱处理对该基因表达没有影响,说明NtCBK1参与植物体内盐诱导的信号转导。(本文来源于《植物生理与分子生物学学报》期刊2005年03期)
华玮,梁述平,吕应堂[2](2004)在《烟草钙调素结合蛋白激酶的生化分析和功能研究》一文中研究指出钙在植物生理活动中起重要作用。各种外界和内在的信号因子所导致的植物反应大多与钙信号转导有关。从植物个体发生看,钙参与了从种子萌发、生长分化、形态发生到开花、花粉萌发及受精等植物生长发育过程;从细胞水平看,钙参与细胞增大、分裂及分化的调控;从具体反应过程看,钙参与植物抗逆反应、激素介导的许多过程、向性生长、叶绿体发育、花粉管定向生长及开花诱导等。钙作为简单的金属离子调控如此众多的细胞活动,主要是通过细胞信号转导系统来实现的。胞质游离钙的瞬间变化,是细胞响应各种刺激信号的初始事件,由此而诱发以后一系列信号转导的下游事件。在植物钙信号系统中,各种蛋白激酶充当着重要的角色,是连接钙信号系统的枢纽。在植物Ca2+信号系统方面,人们对(本文来源于《中国植物生理学会第九次全国会议论文摘要汇编》期刊2004-10-01)
华玮[3](2003)在《烟草钙调素结合蛋白激酶的酶学特性及功能分析》一文中研究指出利用玉米MCK1为分离探针从烟草中分离到两同源基因(NtCBK1/2)。利用原核和真核的表达系统表达这两个蛋白,并研究了其生化性质;结果证明两蛋白均为钙调素结合蛋白激酶。利用转基因方法研究NtCBK1/2生物学功能,发现NtCBK1介导烟草开花调控。主要结果如下: 1.钙调素结合功能的鉴定:利用原核表达系统分别表达两烟草钙调素结合蛋白激酶全长序列。以生物素标记的钙调素为探针,利用Western blot的方法,研究这二个蛋白同钙调素的相互作用。研究结果表明,二者可以在有钙离子存在的情况下结合钙/钙调素,但是在EGTA存在的情况下,不结合钙调素,从而证明了两烟草钙调素结合蛋白激酶均具有钙依赖性的钙调素结合能力;另外,以生物软件分析初步确定了两烟草钙调素结合蛋白激酶的钙调素结合区。在这基础上进一步利用大肠杆菌表达两烟草钙调素结合蛋白激酶基因的不同长度的蛋白缺失体,以生物素标记的钙调素为探针进行Western blot分析,通过实验确定了两个蛋白的钙调素结合区。 2.激酶生化特性分析:利用真核细胞表达系统BAC To BAC表达系统表达两烟草钙调素结合蛋白激酶,并经Ni-NTA和CaM-sepharose两步纯化后,用于激酶活性的分析。结果表明,两钙调素结合蛋白激酶的自磷酸化和底物磷酸化均不依赖于钙调素,其磷酸化的位点为丝氨酸和苏氨酸。说明烟草钙调素结合蛋白激酶是一种钙调素结合的丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。为了排除蛋白激酶在表达纯化的过程中可能发生的自磷酸化或者是被其他的蛋白激酶磷酸化的可能性,将表达纯化后的蛋白激酶用蛋白质去磷酸化酶处理后再进行激酶活性的分析,分析的结果同前面的结果一致。同时,利用毛细管电泳的方法研究蛋白激酶的磷酸化位点的时候发现,从昆虫细胞中纯化出来的蛋白激酶并没有被磷酸化。对于NtCBK1,尽管其活性不需要Ca~(2+)/CaM,但是当反应物中加入Ca~(2+)/CaM时,对蛋白激酶的活性的刺激可达到3-4倍,不同的钙调素对NtCBK1酶活的影响差别不大。对于NtCBK2,它的酶活也被Ca~(2+)/CaM激活,但不同的钙调素对它的影响并不相同。其中,NtCaM1对它酶活只激活3倍,而NtCaM3和NtCaM13可激活酶活9-10倍。同时,我们发现不同的钙调素与NtCBK2结合能力不同,NtCaM3和NtCaM13与NtCBK2结合强度大于NtCaM1。综上所述,烟草钙调素结合蛋白激酶是一种新型的钙调素结合的蛋白,即具有结合钙调素的特性,同时是一种钙调素刺激的蛋白激酶,这在植物中的钙调素结合蛋白中是首次发现。 3.价C万人了的表达模式分析:研究表明NtC刀人万的表达具有时空性。在营养器官中,NtCBKI的mRNA多分布于细胞分裂旺盛、代谢活跃的组织和细胞中。尤其在花启动过程中NtC旧大万表达受到特异调控。在花决定时期的顶端分生组织和幼花原基几乎检测不到一价C男大刀的表达,而在此阶段之前的营养生长时期的顶端分生组织和花原基分化而来的花器官原基都有较强的从C万人万表达。此外,还构建了烟草GFP标记的NtCB人万启动子表达载体,转化烟草用于分析NtCBKj在烟草细胞内的分布,检测到花发育时期GFP在叶芽的分布也呈现出一个波动过程。两部分结果均显示开花启动时NtC刀大7表达受到抑制。 4.利用转基因烟草研究NtC刀人7在烟草生长发育过程中的功能:将NtCBKI基因。厅C酬口)和反义(价乙酬口刁)分别构建到pMD一1载体上,通过农杆菌叶盘转化法获得转基因烟草植株,并进行进一步分析。研究结果表明转NtCBKI的植株营养生长的时间延长,其中一部分烟草表现为晚开花,一部分甚至没开花,但转反义的植株和正常植株没有差别。S。uthern杂交显示转基因不同株系从C刀大万在烟草基因组中的插入位点不同,故而转化植株的表型改变不是由于插入位点的基因激活/失活造成的。Northern杂交分析显示转基因植株中价CB大J过量表达程度不同,并且价C万人万的表达水平与转化植株的表型改变程度相关:开花延迟时间长的,NtCB大甘表达量也高。这些证据表明转化植株的表型改变是转入的NtCB人万导致其过量表达的结果,并且发现这种表型在第二代和第叁代稳定遗传。结合NtCBKI在开花启动过程中被抑制表达,说明NtCBKI在烟草的开花调控中起着重要作用。(本文来源于《武汉大学》期刊2003-11-01)
华玮,梁述平,吕应堂[4](2003)在《烟草钙调素结合蛋白激酶的生化及功能研究》一文中研究指出钙在植物生理活动中起重要作用。各种外界和内在的信号因子所导致的植物反应大多与钙信号转导有关。从植物个体发生看,钙参与了从种子萌发、生长分化、形态发生到开花、花粉萌发及受精等植物生长发育过程;从细胞水平看,钙参与细胞增大、分裂及分化的调控;从具体反应过程看,钙参与植物抗逆反应、激素介导的许多过程、向性生长、叶绿体发育、花粉管定向生长及开花诱导等。钙作为简单的金属离子调控如此众多的细胞活动,主要是通过细胞信号(本文来源于《中国植物学会七十周年年会论文摘要汇编(1933—2003)》期刊2003-06-30)
华玮,梁述平,吕应堂[5](2003)在《烟草钙调素结合蛋白激酶的生化分析和功能研究》一文中研究指出钙在植物生理活动中起重要作用。各种外界和内在的信号因子所导致的植物反应大多与钙信号转导有关。从植物个体发生看,钙参与了从种子萌发、生长分化、形态发生到开花、花粉萌发及受精等植物生长发育过程;从细胞水平看,钙参与细胞增大、分裂及分化的调控;从具体反应过程看,钙参与植物抗逆反应、激素介导的许多过程、向性生长、叶绿体发育、花粉管定向生长及开花诱导等。钙作为简单的金属离子调控如此众多的细胞活动,主要是通过细胞信号转导系统来实现的。胞质游离钙的瞬间变化,是细胞响应各种刺激信号的初始事件,由此而诱发以后一系列信号转导的下游事件。在植物钙信号系统中,各种蛋白激酶充当着重要的角色,是连接钙信号系统的枢纽。在植物Ca~(2+)信号系统方面,人们对CDPK作了比较深入的研究。由于其只在植物体内广泛存在,故过去有人认为它是介导植物Ca~(2+)信号系统的主导因子。但有些研究表明,类似于CaMKⅡ的蛋白激酶可能广泛存在于植物体内。Watillon等克降了苹果中类似于CaMKⅡ的蛋白激酶的cDNA。Lu等研究了类CaMKⅡ的蛋白激酶在玉米根光依赖性的向地性反应中的作用,发现类CaMKⅡ的蛋白激酶的特异性抑制剂KN—93能抑制玉米根的向地性反应。进而从玉米中分离和鉴定了动物CaMKⅡ的(本文来源于《中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编》期刊2003-04-01)
烟草钙调素结合蛋白激酶论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
钙在植物生理活动中起重要作用。各种外界和内在的信号因子所导致的植物反应大多与钙信号转导有关。从植物个体发生看,钙参与了从种子萌发、生长分化、形态发生到开花、花粉萌发及受精等植物生长发育过程;从细胞水平看,钙参与细胞增大、分裂及分化的调控;从具体反应过程看,钙参与植物抗逆反应、激素介导的许多过程、向性生长、叶绿体发育、花粉管定向生长及开花诱导等。钙作为简单的金属离子调控如此众多的细胞活动,主要是通过细胞信号转导系统来实现的。胞质游离钙的瞬间变化,是细胞响应各种刺激信号的初始事件,由此而诱发以后一系列信号转导的下游事件。在植物钙信号系统中,各种蛋白激酶充当着重要的角色,是连接钙信号系统的枢纽。在植物Ca2+信号系统方面,人们对
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
烟草钙调素结合蛋白激酶论文参考文献
[1].华玮,李荣俊,梁述平,吕应堂.烟草幼苗两种钙调素结合蛋白激酶的活性调节及基因表达[J].植物生理与分子生物学学报.2005
[2].华玮,梁述平,吕应堂.烟草钙调素结合蛋白激酶的生化分析和功能研究[C].中国植物生理学会第九次全国会议论文摘要汇编.2004
[3].华玮.烟草钙调素结合蛋白激酶的酶学特性及功能分析[D].武汉大学.2003
[4].华玮,梁述平,吕应堂.烟草钙调素结合蛋白激酶的生化及功能研究[C].中国植物学会七十周年年会论文摘要汇编(1933—2003).2003
[5].华玮,梁述平,吕应堂.烟草钙调素结合蛋白激酶的生化分析和功能研究[C].中国植物生理学会全国学术年会暨成立40周年庆祝大会学术论文摘要汇编.2003