导读:本文包含了重组蛋白表达论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,杆菌,碳源,鳖甲,绦虫,质粒,芽孢。
重组蛋白表达论文文献综述
刘蕾,何光志,王文佳[1]（2019）在《银杏抗菌肽蛋白基因原核表达及其重组蛋白的体内外抑菌作用研究》一文中研究指出目的:获取银杏抗菌肽(GBA)重组蛋白,并考察其体内外抗菌活性,为解决病原菌耐药问题、规模化生产植物源性新型抗菌剂提供实验基础。方法:根据Genebank中公布的GBA基因序列(FJ865399),利用基因技术构建重组质粒pET32a(+)-GBA,再以大肠杆菌原核表达获取重组蛋白,并采用凝胶电泳和Western blotting法对所得蛋白进行纯化及鉴定。采用纸片扩散法考察所获重组蛋白对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、绿脓杆菌、鼠伤寒沙门氏菌的药物敏感度;采用肉汤稀释法测定重组蛋白最小抑菌浓度(MIC)和最低杀菌浓度(MBC);考察重组蛋白对金黄色葡萄球菌感染模型小鼠的保护作用。结果:成功表达并纯化获得目标重组蛋白(大小约32 kDa)。该重组蛋白对金黄色葡萄球菌中度敏感,对其他3种细菌低度敏感;对金黄色葡萄球菌的MIC为(50.00±5.00)mg/mL、MBC为(138.33±12.58)mg/mL,MIC显着高于其他3种细菌(P<0.05)。高剂量重组蛋白(8.0 g/kg)能显着降低金黄色葡萄球菌导致的小鼠死亡率(P<0.05),对小鼠的保护效果与阳性药物青霉素接近。结论:所获重组蛋白对金黄色葡萄球菌的抑制效果明显,对大肠杆菌和绿脓杆菌有一定的抑制作用,对鼠伤寒沙门氏菌抑制作用较弱;该蛋白高剂量给药对金黄色葡萄球菌感染小鼠具有明显的保护作用。(本文来源于《中国药房》期刊2019年18期）
孔慧芳,张杰,李玉娇,龚巧巧,周彦霞[2]（2019）在《细粒棘球蚴重组蛋白EgG1Y162-2诱导表达条件的优化及其蛋白结构预测》一文中研究指出目的优化探索重组质粒pET30a-EgG1Y162-2蛋白表达条件并预测其蛋白结构模型。方法将构建的重组质粒pET30a-EgG1Y162-2转化至E.coli BL21 (DE3)菌株中,用不同浓度的IPTG进行不同时间段的蛋白诱导表达,诱导后的菌液超声破碎、离心,分别取上清和沉淀用SDS-PAGE分析重组蛋白EgG1Y162-2的表达情况,Western blot鉴定表达蛋白的反应原性。采用在线SWISS MODEL预测EgG1Y162-2蛋白的叁维结构。结果 EgG1Y162-2蛋白在37℃,IPTG终浓度为0.5 mmol/L,诱导4 h条件下的表达量较高,蛋白相对分子质量约为15×10~3,与预期相符,且能被鼠抗His-Tag抗体识别。在线Swiss-model预测EgG1Y162-2-2蛋白3D结构模型,与4Ixo.1.A结构的相似度为37.71%。结论优化的重组蛋白EgG1Y162-2表达最优条件预测的该蛋白叁维结构,为细粒棘球蚴疫苗EgG1Y162-2抗原的功能研究奠定了基础。(本文来源于《中国病原生物学杂志》期刊2019年09期）
高雄,刘秀霞,孙曼曼,杨艳坤,白仲虎[3]（2019）在《乙醇对谷氨酸棒杆菌重组蛋白表达的影响》一文中研究指出谷氨酸棒杆菌是一种传统的工业微生物。为研究乙醇对谷氨酸棒杆菌表达外源蛋白的影响,将组成型表达增强绿色荧光蛋白(enhanced green fluorescent protein,EGFP)的谷氨酸棒杆菌接入含有不同浓度乙醇的培养基中培养,发现低浓度(1%)乙醇在被利用的过程中可以显着提高菌体的单位荧光强度。将乙醇与常见的几种营养物质进行了对比,发现乙醇在促进菌体生长以及蛋白表达方面表现更好。此外,根据乙醇被利用时异柠檬酸裂合酶(Isocitrate lyase,ICL)被强烈诱导的特性构建了一个表达能力较强、诱导效果较好的自诱导表达载体。(本文来源于《生物学杂志》期刊2019年04期）
彭小兵,彭国瑞,李旭妮,董令赢,冯丽芳[4]（2019）在《OEPR法构建mETX-mCPA表达质粒及其重组蛋白的免疫效果评价》一文中研究指出为了确定产气荚膜梭菌ε毒素(ETX)和α毒素(CPA)无毒突变体作为亚单位疫苗同时预防D型和A型产气荚膜梭菌病的免疫效果,试验用点突变结合OEPR法构建重组质粒pET32a-mETX-mCPA。将阳性重组质粒转入E.coli BL21(DE3)中,以预先添加乳糖的自诱导培养基表达目的蛋白。经SDS-PAGE分析,其表达的蛋白相对分子质量约为92 000,与预期值一致。Western blot检测结果表明,重组蛋白可被A型产气荚膜梭菌阳性血清所识别。致死性试验结果表明,重组蛋白不致死小鼠。以铝胶为佐剂将重组蛋白免疫家兔,二免血清0.1 mL可分别中和3个小鼠MLD的A型毒素和100个小鼠MLD的D型毒素。本研究用OEPR法成功构建了无毒突变体pET32a-mETX-mCPA质粒,获得的重组蛋白在家兔上显示出良好的免疫效果,为研发A、D型产气荚膜梭菌二价亚单位疫苗奠定理论基础。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2019年08期）
孜拉吉古丽·西克然木,马纪,库尔班·吐松,刘小宁[5]（2019）在《小胸鳖甲胞外铜锌超氧化物歧化酶重组蛋白的原核表达及多克隆抗体制备》一文中研究指出超氧化物歧化酶(SOD)是清除生物体内超氧阴离子自由基的主要抗氧化酶家族。基于原核表达系统,成功表达了拟步甲科Tenebrionidae小胸鳖甲Micordera punctipennis胞外铜锌SOD的重组蛋白(本文定义为Trx-His-MpecCu/Zn-SOD)。经Ni~(2+)亲和层析法纯化重组蛋白后,研究了重组蛋白的部分酶学性质。通过足垫加皮下注射法3次免疫小鼠后,分别用ELISA和Western blot的方法检测抗体效价和抗体特异性。结果表明,重组蛋白主要以包涵体形式存在,纯化后的重组蛋白浓度为1.33 mg·mL~(-1),酶活力为27.52 U·mg~(-1)。Trx-His-MpecCu/Zn-SOD在25～45℃具有比较稳定的酶活性,在35℃最高,同时表现出比较广泛的酸碱耐受性(pH3～12),最适pH为9.0,表明重组蛋白的酶活性相对比较稳定。蛋白免疫法制备的鼠抗MpecCu/Zn-SOD多克隆抗体滴度高于1∶819 200。Western blot结果显示,该抗体能免疫结合重组蛋白Trx-His-MpecCu/Zn-SOD和小胸鳖甲体内天然MpecCu/Zn-SOD,但不能与黄粉虫Tenebrio molitor的总蛋白结合,说明制备的抗体效价较高且特异性较好。本研究结果为小胸鳖甲ecCu/Zn-SOD功能的深入研究奠定了基础。(本文来源于《四川动物》期刊2019年04期）
史瑞军[6]（2019）在《鸡β-防御素Gal-4基因的原核表达及重组蛋白抑菌活性检测》一文中研究指出防御素是伴随着人们对抗生素毒副作用的逐渐认识而发展起来的,许多防御素对细菌、真菌、病毒等均具有抑制作用,不易产生耐药性,稳定性良好,可制成新型抗菌药物或用于饲料添加剂和食品防腐剂等。目前对禽类β-防御素的研究比较热门,许多鸡β-防御素已被克隆和表达,并且通常具有抗菌活性,但对鸡β-防御素Gal-4基因的克隆和表达的研究未见报道,笔者利用基因工程技术,获得了Gal-4的重组蛋白,并对其抑菌活性进行鉴定,最后利用这种蛋白进行了细菌感染小鼠的预防及治疗研究。为开发新型的抗菌药物做出了一定贡献,为筛选和鉴定具有良好生物活性的防御素提供了实验基础,为Gal-4在兽医临床中的应用提供了很好的实验依据。主要研究内容与结果如下:从鸡骨髓中提取总RNA,反转录合成cDNA,设计特异性引物扩增鸡β-防御素Gal-4成熟肽区基因,将目的基因克隆到原核表达载体pET-30a的BamHI和HindIII双酶切位点上,构建原核表达载体pET-30a-Gal-4,转化于大肠杆菌BL21感受态细胞中,菌液经IPTG诱导表达后进行SDS-PAGE与Western blotting检测,并对重组蛋白进行Ni柱亲和层析纯化与脱盐浓缩处理。结果表明,成功扩增了大小为148 bp的目的基因,并构建了原核表达载体pET-30a-Gal-4,经诱导表达后可检测到大小在14 kDa左右的目的蛋白。经纯化后得到浓度为0.8 mg/mL的重组蛋白,SDS-PAGE显示在14 kDa左右出现了清晰的目的条带。为了鉴定重组蛋白Gal-4的体外抑菌活性,使用金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌进行了初步研究,试验采用打孔法和细菌生长曲线法鉴定重组蛋白Gal-4对金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌的抑菌活性。结果表明,重组蛋白Gal-4对金黄色葡萄球菌、多杀性巴氏杆菌均出现了良好的抑菌效果。把重组蛋白Gal-4作为一种新型抗菌药物,用于预防和治疗金黄色葡萄球菌感染小鼠模型,结果发现重组蛋白Gal-4在小鼠体内发挥了良好的杀菌作用,起到了一定的预防和治疗动物疾病的效果。(本文来源于《塔里木大学》期刊2019-06-01）
黄浩,王阳,堵国成,康振[7]（2019）在《重组蛋白微生物表达系统的研究进展》一文中研究指出重组蛋白被广泛应用于食品和医药领域,产生了巨大的经济价值与社会效益。目前有多种生产重组蛋白表达系统,其中微生物表达系统由于培养简单、易于操作而受到最为广泛的关注。为了实现重组蛋白的高效表达,对表达系统进行改造优化是当前研究的热点与重点。本文综述了叁种常用微生物蛋白质表达宿主,大肠杆菌、枯草芽孢杆菌和毕赤酵母在表达重组蛋白质方面的近期研究进展,并展望了未来重组蛋白表达系统的研究方向和焦点,优化组合不同的影响因素支架,结合动力学参数、细胞区室测量,各种组学后大数据,有望获得较优的蛋白表达菌株。(本文来源于《生物产业技术》期刊2019年03期）
李慧民[8]（2019）在《日本血吸虫Sjp38MAPK基因编码cDNA的克隆、重组蛋白表达及其功能研究》一文中研究指出血吸虫需要雌雄虫配对和合抱以完成其发育成熟和产卵,并且成熟后血吸虫所产的产卵是造成宿主病理损伤的主要原因。因此,揭示参与血吸虫生殖发育相关的信号调控通路对开发新的防控策略具有重要意义。我们实验室前期通过磷酸化蛋白质组学研究发现Sjp38MAPK在日本血吸虫信号通路网络中是关键节点之一,为了阐明Sjp38MAPK在日本血吸虫的寄生和生殖发育过程中的作用,本研究对日本血吸虫Sjp38MAPK基因编码的cDNA进行了克隆,并对重组蛋白进行了表达及鉴定。另外,还对Sjp38MAPK在日本血吸虫不同发育阶段、雌雄虫的转录水平进行了分析。利用RNA干扰技术,抑制了Sjp38MAPK基因的转录,对Sjp38MAPK在日本血吸虫的生殖和发育中的功能进行了初步研究。具体包括以下叁个内容:(一)日本血吸虫Sjp38MAPK基因编码cDNA的克隆表达及生物信息学分析根据实验室前期蛋白质组学鉴定的Sjp38MAPK,设计引物,进行PCR扩增,序列分析表明该基因序列包含一个1038bp的开放阅读框,编码Sjp38MAPK蛋白,预测分子量为39.58kD。生物信息学分析表明Sjp38MAPK序列与曼氏血吸虫的同源性为93.48%,与埃及血吸虫的同源性为90.70%,与人和小家鼠的同源性均为57.10%。另外,还构建了原核重组质粒pET-32a(+)-Sjp38MAPK,成功诱导表达,并获得重组蛋白rSjp38MAPK,并用MALDI-TOF-TOF对重组蛋白进行了鉴定。(二)Sjp38MAPK在日本血吸虫不同发育时期和性别中的转录分析通过RT-qPCR方法检测Sjp38MAPK在日本血吸虫不同发育时期(虫卵、尾蚴和感染后第14d、21d、28d和35d)和雌雄虫(感染后14d、21d、28d和35d)中Sjp38MAPK的转录水平。结果显示,Sjp38MAPK在日本血吸虫尾蚴、虫卵、童虫和成虫时期均有表达,并且在成虫(21d、28d、35d)中的表达量显着高于虫卵、尾蚴和童虫时期。另外,在28d和35d时,Sjp38MAPK在雄虫中的表达显着高于雌性,表明Sjp38MAPK的转录具有发育时期和性别的差异性。(叁)日本血吸虫Sjp38MAPK的体外干扰利用电转的方法对日本血吸虫的Sjp38MAPK基因进行体外干扰,在转录水平上对干扰效果进行了分析,筛选出具有最佳干扰效果的小RNA分子(siRNA-977)。用Hoechst 33258荧光染料对干扰Sjp38MAPK后的血吸虫进行染色,观察并统计虫体活性。还用CellTiter-Lumi~(TM)法测定虫体细胞活性。此外,还利用RT-qPCR分析了干扰Sjp38MAPK后,日本血吸虫4种卵壳蛋白基因的mRNA表达水平。结果表明Sjp38MAPK干扰后,日本血吸虫虫体活性下降,死亡率增加;卵壳蛋白基因AY222895.1,M59318.1和D32205.1的转录水平显着降低,提示Sjp38MAPK可能在血吸虫生存和生长发育中发挥着重要的调控作用。(本文来源于《中国农业科学院》期刊2019-05-01）
赵伟欣,刘松,刘立明,陈坚,堵国成[9]（2019）在《一种可促进重组蛋白表达量和稳定性的多功能纯化标签的开发与利用》一文中研究指出自组装双亲短肽(Self-assembling amphipathic peptides,SAPs)是一类亲疏水氨基酸按一定规律分布、具有自聚合效应的短肽,融合在酶蛋白N端时,具有促进表达和稳定化的功能。根据前期研究结论,设计一条全新的基于SAPs (S1vw,HNANARARHNANARARHNANARARHNARARAR)的可促进融合蛋白表达和稳定性,并可用于镍柱亲和层析的多功能短肽标签,在大肠杆菌表达系统中,将S1vw以PT-linker(PTPPTTPTPPTTPTP)融合在碱性果胶酶(Alkaline polygalacturonate lyase,PGL)、脂肪氧合酶(Lipoxygenase,LOX)及绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein,GFP)的N末端时,与对应的野生型相比,PGL及LOX的粗酶活分别提高了3.1倍和1.89倍,GFP的荧光强度提高了16.22倍。S1vw的3种融合酶均可用镍柱进行亲和纯化,并具有较高的回收率。PGL及LOX在对应的热处理条件下,与野生型相比,半衰期分别提高了2.16倍和3.2倍。将GFP-S1vw在枯草芽孢杆菌及毕赤酵母表达系统中表达,发现在枯草芽孢杆菌中融合蛋白表达量提高明显,但在毕赤酵母中表达量几乎没有改变。说明在原核表达体系中,S1vw可作为一种新型的促表达、稳定化及可纯化的多功能标签。(本文来源于《生物工程学报》期刊2019年04期）
崔国贤[10]（2019）在《一种乳酸乳球菌MG1363介导的pBpp重组蛋白表达菌株的实验分析》一文中研究指出研究背景概述本文通过实验研制乳酸乳球菌MG1363介导的pBpp重组蛋白表达菌株,期望可以有效的治愈我国糖尿病患者。根据针对糖尿病中的免疫功能紊乱以及自由基毒素等致病因子对人体进行作用,从而降低人体机能中的胰岛素抵抗力以及胰岛功能,最终形成蛋白质、电解质以及脂肪等系列性代谢紊乱症状的分析。提出了(本文来源于《食品界》期刊2019年04期）
重组蛋白表达论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
目的优化探索重组质粒pET30a-EgG1Y162-2蛋白表达条件并预测其蛋白结构模型。方法将构建的重组质粒pET30a-EgG1Y162-2转化至E.coli BL21 (DE3)菌株中,用不同浓度的IPTG进行不同时间段的蛋白诱导表达,诱导后的菌液超声破碎、离心,分别取上清和沉淀用SDS-PAGE分析重组蛋白EgG1Y162-2的表达情况,Western blot鉴定表达蛋白的反应原性。采用在线SWISS MODEL预测EgG1Y162-2蛋白的叁维结构。结果 EgG1Y162-2蛋白在37℃,IPTG终浓度为0.5 mmol/L,诱导4 h条件下的表达量较高,蛋白相对分子质量约为15×10~3,与预期相符,且能被鼠抗His-Tag抗体识别。在线Swiss-model预测EgG1Y162-2-2蛋白3D结构模型,与4Ixo.1.A结构的相似度为37.71%。结论优化的重组蛋白EgG1Y162-2表达最优条件预测的该蛋白叁维结构,为细粒棘球蚴疫苗EgG1Y162-2抗原的功能研究奠定了基础。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
重组蛋白表达论文参考文献
[1].刘蕾,何光志,王文佳.银杏抗菌肽蛋白基因原核表达及其重组蛋白的体内外抑菌作用研究[J].中国药房.2019
[2].孔慧芳,张杰,李玉娇,龚巧巧,周彦霞.细粒棘球蚴重组蛋白EgG1Y162-2诱导表达条件的优化及其蛋白结构预测[J].中国病原生物学杂志.2019
[3].高雄,刘秀霞,孙曼曼,杨艳坤,白仲虎.乙醇对谷氨酸棒杆菌重组蛋白表达的影响[J].生物学杂志.2019
[4].彭小兵,彭国瑞,李旭妮,董令赢,冯丽芳.OEPR法构建mETX-mCPA表达质粒及其重组蛋白的免疫效果评价[J].中国兽医学报.2019
[5].孜拉吉古丽·西克然木,马纪,库尔班·吐松,刘小宁.小胸鳖甲胞外铜锌超氧化物歧化酶重组蛋白的原核表达及多克隆抗体制备[J].四川动物.2019
[6].史瑞军.鸡β-防御素Gal-4基因的原核表达及重组蛋白抑菌活性检测[D].塔里木大学.2019
[7].黄浩,王阳,堵国成,康振.重组蛋白微生物表达系统的研究进展[J].生物产业技术.2019
[8].李慧民.日本血吸虫Sjp38MAPK基因编码cDNA的克隆、重组蛋白表达及其功能研究[D].中国农业科学院.2019
[9].赵伟欣,刘松,刘立明,陈坚,堵国成.一种可促进重组蛋白表达量和稳定性的多功能纯化标签的开发与利用[J].生物工程学报.2019
[10].崔国贤.一种乳酸乳球菌MG1363介导的pBpp重组蛋白表达菌株的实验分析[J].食品界.2019
论文知识图
