新生大鼠大脑皮质星形胶质细胞纯化及培养方法的改进

论文摘要

目的快速纯化大鼠大脑皮质原代星形胶质细胞并进行传代培养。方法取新生2日龄SD大鼠大脑皮层,每2只为一组,将剥除软脑膜的大脑皮层剪碎,添加0. 25%胰蛋白酶-EDTA溶液500μL,37℃消化15 min,将细胞悬液接种于未用多聚赖氨酸处理过的培养瓶中,37℃、5%CO2细胞培养箱中孵育15 min后,将细胞以5×106个/m L接种于L-多聚赖氨酸包被的T75培养瓶中。待细胞长满瓶底,200 r/min 37℃恒温摇18 h,加入1 m L 0. 25%胰蛋白酶,待大部分细胞悬浮后收集细胞。在倒置相差显微镜下对细胞进行形态学观察,胶质纤维酸性蛋白免疫荧光染色法进行星形胶质细胞纯度鉴定,并以MTS法测定传代后细胞增殖活力。结果星形胶质细胞纯度达到（97. 86±0. 91）%,细胞传代后生长情况及增殖活力良好。结论该方法可以高效获取原代及传代的大鼠大脑皮质星形胶质细胞。

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文章来源

类型: 期刊论文

作者: 马悦,李文,李振舒,吕欣,王心妍,黄国伟

关键词: 星形胶质细胞,胰蛋白酶消化,细胞培养,传代培养

来源: 卫生研究 2019年05期

年度: 2019

分类: 医药卫生科技,基础科学

专业: 生物学,基础医学

单位: 天津医科大学公共卫生学院营养与食品卫生学系

基金: 国家自然科学基金重点项目(No.81730091)

分类号: R-332;Q813.11

DOI: 10.19813/j.cnki.weishengyanjiu.2019.05.018

页码: 795-798

总页数: 4

文件大小: 384K

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