人脐血间充质干细胞对小鼠骨髓巨噬细胞M2亚型的转化作用

人脐血间充质干细胞对小鼠骨髓巨噬细胞M2亚型的转化作用

论文摘要

背景:间充质干细胞已经被用于多种疾病的治疗,且研究表明间充质干细胞可能是通过促进巨噬细胞向M2亚型转化来产生生物效应,但这种效应是否呈量效、时效关系及其转化效应是否需要细胞间直接接触尚不明确。目的:验证人脐血间充质干细胞对巨噬细胞M2亚型转化效应,并探讨人脐血间充质干细胞对巨噬细胞M2亚型转化效应的剂量与时间相关性。方法:从小鼠骨髓中提取单核细胞,采用巨噬细胞集落刺激因子诱导产生M0型巨噬细胞(F4/80+,CD11B+)。将M0型巨噬细胞以1×106/孔密度植入Transwell板或6孔培养板中,分别以不同密度(0,2×105,4×105)人脐血间充质干细胞在含有脂多糖(100μg/L)/干扰素γ(20μg/L)完全培养基中直接或间接共培养24,48 h。显微镜下观察巨噬细胞形态学改变,流式细胞仪检测M2型巨噬细胞(CD206+,CD11C-)占整体比例,ELISA检测细胞培养上清液白细胞介素10、白细胞介素6和白细胞介素1β水平。结果与结论:①与人脐血间充质干细胞共培养后,巨噬细胞触角伸长,呈长索状M2型细胞形态特征;②与人脐血间充质干细胞直接共培养、间接共培养24,48 h,M2型巨噬细胞百分比显著性增加(P <0.05);③人脐血间充质干细胞低浓度与高浓度组间比较,M2型巨噬细胞百分比差异无显著性意义;④直接或间接培养48 h的M2型巨噬细胞百分比均显著高于24 h,差异有显著性意义(P <0.05)。⑤人脐血间充质干细胞直接共培养、间接共培养上清中促炎性细胞因子白细胞介素6、白细胞介素1β水平显著减少,而抑炎性细胞因子白细胞介素10水平显著增加(P <0.05);⑥直接或间接共培养48 h抑炎性细胞因子白细胞介素10水平均较24 h显著上升(P <0.05);⑦结果表明,人脐血间充质干细胞与巨噬细胞直接与间接接触均促进巨噬细胞M2亚型转化,其转化效应有时效依赖性,而与细胞浓度无相关性。

论文目录

  • 文章快速阅读:
  • 文题释义:
  • 0引言Introduction
  • 1 材料和方法Materials and methods
  •   1.1 设计
  •   1.2 时间及地点
  •   1.3 材料
  •     1.3.1 实验动物及细胞
  •     1.3.2 实验试剂与仪器
  •   1.4 实验方法
  •     1.4.1 小鼠巨噬细胞培养
  •     1.4.2 实验分组
  •     1.4.3 流式细胞术鉴定巨噬细胞表型
  •     1.4.4 ELISA检测培养液中白细胞介素6、白细胞介素1β、白细胞介素10水平
  •   1.5 主要观察指标
  •   1.6 统计学分析
  • 2 结果Results
  •   2.1 巨噬细胞形态学
  •   2.2 巨噬细胞流式细胞仪鉴定结果
  •   2.3 直接共培养后巨噬细胞流式细胞仪分析结果
  •   2.4 间接共培养后巨噬细胞流式细胞仪分析结果
  •   2.5 直接与间接共培养细胞流式细胞仪分析结果比较
  •   2.6 直接/间接共培养各组白细胞介素1β、白细胞介素6和白细胞介素10水平比较
  • 3 讨论Discussion
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈柄全,彭漪,肖轶,彭智勇,赵吉玲,余国龙

    关键词: 人脐血间充质干细胞,巨噬细胞,亚型,亚型转化效应,炎症反应,直接共培养,间接共培养,国家自然科学基金

    来源: 中国组织工程研究 2019年25期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学

    专业: 生物学,基础医学

    单位: 中南大学湘雅医院心内科

    基金: 国家自然科学基金面上项目(81570266),项目负责人:余国龙,湖南省自然科学基金重点项目(2015SK2025),项目负责人:余国龙~~

    分类号: R329.2

    页码: 3987-3992

    总页数: 6

    文件大小: 1502K

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