导读:本文包含了免疫沉淀论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:免疫,蛋白,内皮,抗原,细胞,上皮细胞,细胞膜。
免疫沉淀论文文献综述
陈震,陈恒星,胡开顺[1]（2019）在《免疫沉淀——质谱联用揭示RCC2在乳腺癌MDA-MB-468细胞系中的新功能》一文中研究指出目的分析RCC2蛋白在乳腺癌MDA-MB-468细胞系中的互作蛋白组并揭示其功能调控网络。方法运用酶切技术结合一代测序构建携带Flag标签RCC2蛋白过表达载体,慢病毒包装感染构建Flag-RCC2过表达的MDA-MB-468稳转细胞株。采用Flag抗体凝胶珠亲和沉淀,收集蛋白样品进行高敏感度质谱鉴定。生物信息蛋白组学分析互作蛋白组,包括GO注释,KEGG通路富集,构建蛋白互作网络(PPIN)。结果高可信度164个蛋白聚类分析显示,RCC2及其互作蛋白显着富于核糖体相关通路中,具有RNA与核蛋白体结合能力,揭示其参与蛋白翻译与成熟的过程。结论成功鉴定RCC2互作蛋白组,揭示RCC2在乳腺癌细胞中发挥新的翻译调控功能。(本文来源于《肿瘤防治研究》期刊2019年09期）
王远锏[2]（2019）在《染色质免疫沉淀技术及其应用》一文中研究指出染色质免疫沉淀技术是一种利用抗原抗体结合的特异性来检测蛋白质与基因互作的技术,具有高效率但是低重复性的特点,影响实验结果分辨率的因素包括检测样品使用量、DNA片段断裂程度、抗体亲和性等。随着该技术的不断发展,其应用范围也逐渐扩大到如DNA测序、蛋白质修饰、对细胞类型特异性串联染色质表观遗传修饰研究等方面,并逐步与如高通量测序技术、免疫荧光技术等其他研究手段相结合,在蛋白质尤其是组蛋白及其修饰产物与DNA互作研究领域发挥作用。(本文来源于《科技创新导报》期刊2019年19期）
梁延连,洪文旭,苏宇清,张印则,梁爽[3]（2018）在《免疫沉淀法与质谱联用检测Rh血型抗原蛋白序列方法的研究》一文中研究指出目的对人类红细胞Rh血型抗原蛋白进行序列分析方法学的建立,为验证Rh血型基因在红细胞膜上抗原量的表达奠定基础。方法随机选取10例已知RhD阳性抗凝血5mL,对标本中的Rh血型抗原蛋白进行免疫沉淀,使用蛋白酶裂解法提取红细胞膜的Rh蛋白并进行浓度定量,蛋白酶切后使用LC-MS质谱平台进行Rh蛋白鉴定。结果制定出适合检测Rh血型蛋白的标准曲线,计算出10例标本的Rh血型蛋白的浓度,鉴定到Rh血型目标蛋白序列,在Blast平台检索到所测蛋白的相合度与Rh参比序列吻合度达80%(本文来源于《中国输血协会第九届输血大会论文专辑》期刊2018-11-01）
田素雯,朱如萍[4]（2017）在《运用紫外交联免疫沉淀技术构建RNA结合蛋白的靶基因文库》一文中研究指出紫外交联免疫沉淀(crosslinking-immunoprecipitation,CLIP)是一种研究RNA结合蛋白的技术,它通过特异性抗体富集靶RNA片段,然后逆转录构建cDNA文库,最后进行高通量测序。它可以在基因组水平上全景式研究靶RNA的特点,为揭示该蛋白生物学功能与分子功能提供新的依据。本研究针对一个已知的RNA结合蛋白MOV10(moloney leukemia virus 10),通过CLIP技术构建cDNA文库,然后小规模克隆后测序,得到小部分靶RNA信息,并利用RNA免疫沉淀技术(RNA-immunoprecipitation,RIP)进行验证。测序提示MOV10结合mRNA,而其中有部分是其已知靶标。说明该文库可以用于后续深度测序,为研究该蛋白在精子发生领域内的功能和机制奠定基础。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2017年06期）
张婉,陈健,陈恒玲[5]（2017）在《一种新型的利用DSS交联剂避免重链轻链干扰的免疫沉淀技术》一文中研究指出抗体是含有4条多肽链的对称结构,其中两条较长的相对分子量较大的为重链,大小为55KDa,另外两条较短的相对分子量较小的为轻链,大小25KDa。在免疫沉淀技术中如果目的条带大小和重链轻链的大小一样或接近将影响实验结果的判断。本文章通过DSS使抗体和蛋白A/G磁珠紧密交联,即使高温或还原剂作用下也不会破坏交联的结构,而高温或还原剂可以使抗体和抗原分开,从而达到SDS-PAGE检测到的条带都是蛋白条带而没有重链轻链条带的干扰的目的。(本文来源于《科教导刊(上旬刊)》期刊2017年04期）
郑芳芳,姚建凤,黄荣富[6]（2016）在《染色质免疫沉淀ChIP技术检测传代培养细胞Grb10组蛋白乙酰化水平》一文中研究指出目的检测传代培养过程鼠尾成纤维样细胞中印迹基因Grb10中组蛋白乙酰化水平的改变。方法应用染色质免疫沉淀ChIP技术和荧光定量PCR(Q-PCR)分析,检测传代培养细胞中印迹基因Grb10组蛋白乙酰化水平。结果应用ChIP和Q-PCR检测出印迹基因Grb10组蛋白乙酰化水平上升。结论 ChIP技术与实时荧光定量PCR技术的结合,通过免疫共沉淀作用和后续PCR定量分析,可以有效地检测目的基因的组蛋白修饰水平;鼠尾成纤维样细胞中印迹基因Grb10的乙酰化水平受体外传代培养的影响。(本文来源于《福建医药杂志》期刊2016年06期）
韩志霞,刘芳,蒋大伟,许兰菊,孔江南[7]（2016）在《利用免疫沉淀法对鸡源志贺菌IpaC蛋白受体候选蛋白的初步筛选》一文中研究指出为筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白的受体。利用生物素标记试剂盒标记IpaC蛋白,分离培养原代鸡肠上皮细胞和。利用ProteoExtract?天然膜蛋白提取试剂盒提取鸡肠上皮细胞的膜蛋白;应用免疫沉淀、免疫磁珠法分离富集与IpaC蛋白结合的蛋白质;利用SDS-PAGE电泳检测和Western blot鉴定。结果获得了与IpaC蛋白特异性结合的大约在34 000~55 000之间的蛋白条带。筛选得到的SDS-PAGE蛋白条带进行LC-MS/MS测序鉴定和生物信息学分析。初步将annexin A2,37 000Laminin receptor precursor,LIM and SH3protein 1,ras-related protein Rab-43作为IpaC蛋白受体的候选蛋白。为研究志贺菌在鸡体内的致病机制奠定基础,而且可以为评估鸡源志贺菌在公共卫生方面的重要性提供参考依据。(本文来源于《中国兽医学报》期刊2016年11期）
郭旭丽,胡娟,罗伟光,罗奇志,郭靖[8]（2016）在《应用免疫沉淀和质谱技术鉴定角蛋白1为一种新的血管内皮细胞移植抗原》一文中研究指出器官移植排斥反应仍然是移植器官存活的重要障碍,与移植排斥相关的移植抗原除ABO血型抗原,HLA和MICA多态性抗原外,还有一些Non-HLA抗原。研究表明这些抗原都与血管内皮细胞抗体(AECAs)有关,并在器官移植排斥中发挥作用,但病人血清中存在的Non-HLA抗体确切作用于何种内皮细胞(EC)表面抗原尚未完全清楚。本研究应用对肾排斥病人血清AECA抗体特异性分析,用从人脐静脉血清分离的HUEVC作为靶细胞对AECA阳性血清进行吸附和洗脱,实现了对HLA和MICA抗原捕获,成功建立了用血清抗体对靶抗原的免疫沉淀方法。我们通过免疫沉淀和质谱技术发现了一种新的内皮细胞移植抗原角蛋白1(KRT1)可能与肾移植排斥反应相关。同时我们用抗KRT1单克隆抗体检测到人脐静脉血管内皮细胞膜表面有KRT1的表达,通过基因克隆技术将人群中常见的叁种KRT1多态性蛋白进行了表达和重组蛋白的分离纯化。用这种重组蛋白设计ELISA实验对肾移植病人的血清抗KRT1特异性抗体进行检测,结果显示:肾移植随访病例血清KRT1抗体阳性率为20.8%(53/255)。对肾移植后病例的血清肌酐(Cr)浓度进行分析,发现在Cr>120umol/L的病例组有29.9%(23/77)的受者被检测出存在KRT1抗体,而在Cr≤120umol/L的肾移植病例中的KRT1阳性率为16.8%(30/178),提示KRT1抗体阳性与肾移植后肾功能的慢性损伤存在统计学上的相关性(P<0.05)。进一步对高滴度KRT1抗体的特异性和相应病例的KRT1基因型进行分析,我们发现KRT1抗体属于一种抗KRT1的自身抗体。随着对临床上大样本器官移植病例回顾性调查分析,我们将揭示KRT1作为血管内皮细胞移植抗原在器官移植体液排斥中发挥作用,这为设计新的实验方法,评估器官移植风险和指导临床预防排斥用药具有重要的临床意义。(本文来源于《第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编》期刊2016-11-04）
文莉薇,吴智妹,朱鸿亮[9]（2016）在《磁珠和蛋白质标签特异性免疫沉淀体系的建立》一文中研究指出为建立植物中特异性免疫沉淀微量蛋白体系,以GUS为报告基因,利用Flag、Myc两种蛋白标签对GUS氨基端进行标记,以农杆菌为介导,在烟草叶片中瞬时高效表达GUS基因。利用Western blot检测叶片中标记的GUS蛋白含量,便于后续GUS蛋白的特异性纯化。以anti-Flag M2磁珠和anti-c-Myc琼脂糖为固相载体,特异性识别和结合标记的GUS蛋白,利用磁分离技术和特异性免疫沉淀对目的蛋白进行两次富集,通过Western blot检测对比各个步骤所得目的蛋白的含量判断富集纯化效果。结果表明,以磁珠和琼脂糖为载体的蛋白,经两次特异性免疫沉淀后得到明显富集和纯化,且每一次的富集效果都较好,初步建立了蛋白标签和磁珠法二次特异性免疫沉淀体系,为体外深入研究活性蛋白复合体奠定了一定的技术基础。(本文来源于《中国农业科技导报》期刊2016年03期）
韩志霞[10]（2016）在《利用免疫沉淀法初步筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白受体》一文中研究指出志贺菌病是由革兰氏阴性志贺菌引起的,可出现伴有血液和粘液的稀粪便,同时会引起机体的里急后重、腹部疼痛和发热等发病症状。志贺菌除感染人外,还可以感染猪、猕猴、狐狸、牛、鸡、鸭等多种动物。近些年发现的鸡源志贺菌可感染不同品种和日龄的鸡,尤其是雏鸡,给养禽业带来严重的影响。国内外研究发现鸡源志贺菌不仅可引起家禽的相互感染,在人禽之间也会发生交叉感染,不仅给养禽业的发展带来损害,也给人类的卫生安全造成了隐患。志贺菌引起机体发病的关键环节是能侵入肠上皮细胞内进行增殖和扩散,而这一环节的发生又必须具备两个要素,一是肠上皮细胞表面必须存在细菌吸附所需的相应特异性受体,该受体已被证实存在于人肠道上皮细胞的基底外侧膜;二是志贺菌必须具有与细胞表面受体相结合的侵袭性蛋白。主要包括编码Ⅲ型分泌系统的mxi-spa基因和编码侵袭性蛋白Ipa(A、B、C、D)的基因。侵袭性蛋白Ipa B和IpaC结合成复合物,复合物的IpaC端首先与肠上皮细胞基底面的受体结合,并进一步介导细菌侵入细胞。体外实验表明,只有重组纯化的IpaC蛋白才能够在一定程度上恢复志贺菌的侵袭能力。相关研究表明:人源志贺菌可感染雏鸡并引起发病死亡,而且还发现鸡源志贺菌拥有与人源菌株相同的IpaC蛋白分子,但是尚不清楚鸡源志贺菌是否存在与人相似的IpaC蛋白受体分子。本研究进行鸡肠上皮细胞膜上IpaC蛋白受体的筛选,为进一步阐明志贺菌在鸡体内的致病机制奠定了基础、提供了科学依据。研究结果如下:1.鸡源志贺菌IpaC基因的原核表达及IpaC蛋白纯化利用本实验室构建和保存的重组表达菌株pET32a-IpaC/BL21和p ET32a/BL21,进行菌种复苏和培养,并进行PCR鉴定。37℃培养至OD600为0.6-1.0时,加入终浓度为1.0m M的IPTG诱导剂诱导,28℃继续培养8h。利用超声波破碎仪裂解菌液,破碎上清用镍柱亲和纯化,纯化条件为:含咪唑50mM的Washing Buffer洗脱杂蛋白,含咪唑250mM的Elution Buffer洗脱目的蛋白。表达和纯化后的蛋白利用SDS-PAGE和Western blot进行鉴定,SDS-PAGE结果表明不但成功表达出了IpaC蛋白和空载体蛋白,并且两种蛋白的纯化结果都达到95%以上,Western blot结果表明IpaC蛋白和空载体蛋白具有良好的生物学活性。2.鸡肠上皮细胞的培养及膜蛋白的提取采用18日龄的SPF鸡胚进行肠组织的分离,利用300U/mL XI型胶原酶和0.1 mg/mL I型中性蛋白酶进行联合消化肠组织,用贴壁时间差法纯化鸡肠上皮细胞,在倒置显微镜下能看到呈铺路石样的细胞,碱性磷酸酶染色为阳性。利用膜蛋白提取试剂盒提取培养48h的肠上皮细胞的膜蛋白,并用Na+/K+-ATPaseα1兔源多克隆抗体进行Western blot鉴定,结果表明提取物中富集了鸡肠上皮细胞膜蛋白。3.鸡源志贺菌IpaC蛋白受体的筛选利用生物素标记试剂盒标记IpaC蛋白和空载体蛋白,由于生物素和亲和素系统具有较强结合能力,利用链霉亲和素磁珠和生物素标记的IpaC蛋白进行磁性分离,能与IpaC蛋白结合的鸡肠上皮细胞膜蛋白会被富集到磁珠上,加入蛋白上样缓冲液分离磁珠和富集物。处理好的磁珠样品进行SDS-PAGE分离和Western blot鉴定,确定能和IpaC结合的目的条带。筛选出的蛋白条带利用液相色谱-串联质谱(LC-MS/MS)进行质谱检测和生物信息学分析,结合对IpaC蛋白已有资料的分析,初步将annexin A2,37kD Laminin receptor precursor,LIM and SH3 protein 1,ras-related protein Rab-43作为IpaC蛋白受体的候选蛋白,并明确了其氨基酸序列,关于确切的IpaC受体试验目前正在进行中,有关该受体的蛋白结构和生物学功能有待进一步研究。(本文来源于《河南农业大学》期刊2016-06-01）
免疫沉淀论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
染色质免疫沉淀技术是一种利用抗原抗体结合的特异性来检测蛋白质与基因互作的技术,具有高效率但是低重复性的特点,影响实验结果分辨率的因素包括检测样品使用量、DNA片段断裂程度、抗体亲和性等。随着该技术的不断发展,其应用范围也逐渐扩大到如DNA测序、蛋白质修饰、对细胞类型特异性串联染色质表观遗传修饰研究等方面,并逐步与如高通量测序技术、免疫荧光技术等其他研究手段相结合,在蛋白质尤其是组蛋白及其修饰产物与DNA互作研究领域发挥作用。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
免疫沉淀论文参考文献
[1].陈震,陈恒星,胡开顺.免疫沉淀——质谱联用揭示RCC2在乳腺癌MDA-MB-468细胞系中的新功能[J].肿瘤防治研究.2019
[2].王远锏.染色质免疫沉淀技术及其应用[J].科技创新导报.2019
[3].梁延连,洪文旭,苏宇清,张印则,梁爽.免疫沉淀法与质谱联用检测Rh血型抗原蛋白序列方法的研究[C].中国输血协会第九届输血大会论文专辑.2018
[4].田素雯,朱如萍.运用紫外交联免疫沉淀技术构建RNA结合蛋白的靶基因文库[J].基因组学与应用生物学.2017
[5].张婉,陈健,陈恒玲.一种新型的利用DSS交联剂避免重链轻链干扰的免疫沉淀技术[J].科教导刊(上旬刊).2017
[6].郑芳芳,姚建凤,黄荣富.染色质免疫沉淀ChIP技术检测传代培养细胞Grb10组蛋白乙酰化水平[J].福建医药杂志.2016
[7].韩志霞,刘芳,蒋大伟,许兰菊,孔江南.利用免疫沉淀法对鸡源志贺菌IpaC蛋白受体候选蛋白的初步筛选[J].中国兽医学报.2016
[8].郭旭丽,胡娟,罗伟光,罗奇志,郭靖.应用免疫沉淀和质谱技术鉴定角蛋白1为一种新的血管内皮细胞移植抗原[C].第十一届全国免疫学学术大会摘要汇编.2016
[9].文莉薇,吴智妹,朱鸿亮.磁珠和蛋白质标签特异性免疫沉淀体系的建立[J].中国农业科技导报.2016
[10].韩志霞.利用免疫沉淀法初步筛选鸡源志贺菌IpaC蛋白受体[D].河南农业大学.2016
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