导读:本文包含了细胞核转化论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:细胞核,基因,抗原,拟南芥,细胞器,叶绿体,质体。
细胞核转化论文文献综述
王云鹏[1](2018)在《植物生物反应器之叶绿体转化与细胞核转化》一文中研究指出自从1984年首例烟草转基因植株诞生以来,基于遗传转化技术的植物生物反应器蓬勃发展。基于该技术的廉价性、稳定性和环境友好性等特质,使其成为未来分子医药农业的研究重点领域。尤其是叶绿体转化技术的出现,由于叶绿体的数量、基因组结构等方面的特殊性,植物叶绿体转化与(动植物)细胞核转化相比,具有多种优势,包括外源基因定点整合、蛋白表达水平高、多基因同时转化、环境安全的风险小等。其中由于大量的拷贝数而导致的外源蛋白表达水平高是其最显着的特点之一,也是其作为植物反应器的理论基础和优势所在。本次报告将依据选取的几个典型事例综述国内外叶绿体遗传转化方面的研究进展,同时结合报告人所在课题组开展的研究工作,对烟草叶绿体中表达几种生长因子和抗菌肽的工作进行阐述,并针对GFP融合蛋白标签的添加,探讨如何提高外源蛋白在叶绿体遗传转化中的稳定性和在目的蛋白分离纯化方面发挥的作用。同时,也会就报告人所在团队开展的规模化植物细胞核转化工作结合现有植物生物反应器的发展动态进行综述,探讨不同技术在未来分子医药农药发展中的定位以及研究策略,以期引起广泛的重视与深入的讨论。(本文来源于《第八届泛环渤海生物化学与分子生物学会2018年学术交流会论文集》期刊2018-06-30)
赵斌[2](2018)在《PIM1通过靶向细胞核中的Smads和c-Myc来调节上皮间质转化过程并增强肾透明细胞癌的肿瘤活动》一文中研究指出背景越来越多的研究表明,PIM丝氨酸/苏氨酸激酶家族,包括PIM1、PIM2和PIM3成员,与肿瘤进展和转移相关。PIM1作为最吸引研究者研究的分子靶点,已经被鉴定为血液学和上皮性恶性肿瘤的潜在预后生物标志物。然而,到目前为止,PIM1影响癌症发生和进展的潜在调节作用和分子机制仍然在很大程度上仍然是未知的,包括肾透明细胞癌(ccRCC)。目的本研究的目的是分析PIM1在肾透明细胞癌中的表达和作用,进而为肾透明细胞癌患者治疗提供可能的新措施。方法(1)使用PIM1单克隆抗体对75例包含癌和癌旁组织的肾透明细胞癌组织芯片以及从医院收集的56例肾细胞癌患者石蜡组织切片(包含癌和癌旁组织)进行免疫组织化学染色,并对染色结果进行统计,分析PIM1基因的差异性表达,确定PIM1蛋白的定位,以及分析PIM1基因差异性表达和TNM分期、生存预后的相关性;并通过蛋白免疫印迹实验和实时荧光定量PCR检测PIM1基因在肾透明细胞癌细胞系中的差异性表达情况。(2)检测PIM1基因稳定下调前后,肾透明细胞癌细胞株体外增殖、迁移、侵袭、血管生成能力和上皮间质转化过程(EMT)的改变。(3)通过蛋白免疫印迹实验、蛋白质免疫共沉淀实验和小分子抑制剂等验证可能的细胞信号通路。检测PIM1基因稳定下调前后对EMT上游转录因子ZEB1、ZEB2、Snail1、Snail2和Twist表达的影响;检测PIM1基因稳定下调前后对Smad信号通路的改变;检测PIM1基因稳定下调前后对c-Myc的影响;检测PIM1基因稳定下调前后c-Myc与Smad相互作用关系的变化。(4)通过裸鼠皮下成瘤实验,检测PIM1基因稳定下调前后,肾透明细胞癌细胞株体内增殖能力的改变。结果(1)在本研究中,我们首次证实了PIM1在人肾透明细胞癌组织和细胞系中异常过表达,并且与人肾透明细胞癌的进展呈正相关。(2)下调PIM1基因抑制了肾透明细胞癌细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭和血管生成的能力,表明PIM1在肾透明细胞癌中可能是一个促癌基因。(3)机制上,我们发现PIM1可以与细胞核中的Smad2或Smad3相互作用,并磷酸化Smad2和Smad3,进而诱导转录因子ZEB1、ZEB2、Snail1、Snail2和Twist的表达,从而促进上皮间质转化过程(EMT)的发生。(4)此外,PIM1和c-Myc相互作用,并磷酸化c-Myc,进而激活了转录因子ZEB1、ZEB2、Snail1、Snail2和Twist的表达,以协同促进EMT,但是Smads没有参与到此信号通路中。结论(1)我们的研究结果表明,PIM1的异常表达有助于肾透明细胞癌的发生和进展。(2)此外,我们的研究结果揭示了PIM1潜在的分子调节机制;PIM1通过与Smads和c-Myc这两条不同信号通路相互作用,激活了下游转录因子ZEB1、ZEB2、Snail1、Snail2和Twist的表达,进而诱导EMT的发生。(3)总而言之,PIM1可作为治疗肾透明细胞癌患者的潜在靶点。(本文来源于《大连医科大学》期刊2018-02-01)
黄亚萍,艾丽,王川[3](2017)在《莱茵衣藻细胞核转化体系研究进展》一文中研究指出莱茵衣藻(Chlamydomonas reinhardtii)是一种叁套基因组都可以进行遗传转化的模式生物,具有培养条件简单、生长速度快、光合效率高等优点,细胞核转化体系相对更为成熟,将其开发为生物反应器具有广阔的应用前景。该文对衣藻核基因组特点及转化机理、转基因衣藻的筛选方法、外源基因的表达以及影响因素等方面进行了综述。(本文来源于《生物技术》期刊2017年06期)
黄麟,杨济云,方玉兰,李秋成,梁燕[4](2017)在《杉木炭疽菌遗传转化及附着胞发育过程的细胞核行为观察》一文中研究指出【目的】建立高效的杉木炭疽菌遗传转化体系,并观察附着胞发育过程中的细胞核行为。【方法】通过菌丝体酶解的方法制备原生质体,PEG介导的原生质体转化法将含有伯莱霉素抗性的细胞核表达质粒NL1∶∶GFP转入受体材料杉木炭疽菌SMCG1#C菌株,通过荧光显微镜跟踪观察附着胞发育过程中的孢子、芽管和附着胞等结构中的细胞核行为。【结果】获得了稳定表达NL1∶∶GFP质粒的杉木炭疽菌阳性转化子;杉木炭疽菌附着胞发育过程伴随着细胞的有丝分裂与细胞核的转移;附着孢发育成熟后,孢子和芽管菌丝中的细胞核仍然保持完整。【结论】建立了高效的杉木炭疽菌遗传转化体系;杉木炭疽菌与稻瘟病菌、希金斯炭疽菌的附着胞发育过程的细胞生物学特性显着不同。(本文来源于《南京林业大学学报(自然科学版)》期刊2017年06期)
李东[5](2015)在《miRNA对垂体瘤细胞株中增生细胞核抗原、垂体瘤转化基因、血管内皮细胞生长因子表达的影响》一文中研究指出目的探讨微小RNA(miRNA)对垂体瘤细胞株中增生细胞核抗原(ki-67)、垂体瘤转化基因(PTTG)、血管内皮细胞生长因子(VEGF)表达影响。方法将培养好的人垂体瘤细胞放入A、B两培养瓶中培养,其中A培养瓶培养基中加入标记的miRNA基因2μl,而B培养瓶只是加入等量的培养基,采用RT-PCR及Western印迹法检测培养24 h后人垂体瘤细胞中ki-67、PTTG、VEGF基因及蛋白表达水平。结果 1A培养瓶加标记的miRNA基因后培养24 h,人垂体瘤细胞ki-67、PTTG和VEGF mRNA表达水平明显低于B培养瓶(P<0.05);2A培养瓶加入miRNA基因后培养24 h,人垂体瘤细胞ki-67、PTTG和VEGF蛋白表达水平明显低于B培养瓶(P<0.05)。结论垂体瘤细胞中ki-67、PTTG、VEGF处于高水平表达,而miRNA能够明显降低ki-67、PTTG、VEGF的表达,抑制细胞的生长,对临床具有指导意义。(本文来源于《中国老年学杂志》期刊2015年24期)
吴天山,郭飞[6](2015)在《细胞核Snail因子在胰腺癌上皮-间质转化中的作用》一文中研究指出目的:探讨细胞核因子Snail在胰腺癌组织中的表达及与胰腺癌上皮-间质转化(EMT)过程的相关性。方法:采用免疫组织化学方法检测77例胰腺癌组织(研究组)与13例正常胰腺组织(对照组)中的Snail、Slug、E-cadherin、vimentin的表达。结果:研究组中胰腺癌患者胰腺组织中Snail、Slug、E-cadherin、vimentin的表达阳性率为70.13%、68.83%、36.36%、72.73%。对照组13例正常胰腺组织中Snail、Slug均不表达,E-cadherin、vimentin的表达阳性率分别为92.31%、7.69%。胰腺癌组织中Snail表达与E-cadherin表达呈负相关(r=-0.225,P=0.025),与vimentin表达呈正相关(r=0.493,P<0.01);Slug表达与vimentin表达呈正相关(r=0.358,P=0.001)。Slug的表达与肿瘤分化程度及肿瘤TNM分期有关、E-cadherin的表达与淋巴结的转移与肿瘤分化程度有关、vimentin的表达与淋巴结转移、肿瘤分化程度及肿瘤TNM分期有关(均P<0.01)。结论:Snail的高表达可能通过调控EMT过程在胰腺癌的发展过程中发挥作用,是胰腺癌浸润和转移的重要生物学指标。(本文来源于《中国普通外科杂志》期刊2015年03期)
张眉,周善跃,陈旭君,李宝笃,郭泽建[7](2014)在《玉米纹枯病菌细胞核纯化与原生质体转化的探讨》一文中研究指出引起玉米纹枯病的立枯丝核菌(Rhizoctonia solani K(u|¨)hn)多为多核杂核真菌,也难以通过有性态使其细胞核进行单一化。利用原生质体再生的方法对单核玉米纹枯病菌JN的细胞核进行同核纯化,比较从单个原生质体再生菌获得的rDNAITS序列,发现序列间存在差异,说明其细胞核没有达到预期纯化的效果。继而扩增了双核和多核玉米纹枯病菌的rDNAITS序列,发现它们自身的rDNA-ITS序列也存在差异,因此认为立枯丝核菌的这种rDNA-ITS序列的差异可能是长期未经过有性阶段的结果且与其细胞核数目无关。使用转化丝状真菌的载体转化纹枯菌未获得稳定的转化子,进而对载体进行了改造,用纹枯菌(AG-3)actin基因的启动子和终止子控制潮霉素基因构建了载体pRsA。利用PEG介导的原生质体转化方法,实现了对单核纹枯菌的转化,PCR验证得到3个转化子。但在PDA培养基连续继代5代后,转化子的潮霉素抗性消失。结果对改进纹枯菌的转化方法有借鉴意义。(本文来源于《植物病理学报》期刊2014年03期)
谭翼[8](2012)在《拟南芥细胞核与线粒体同源基因rps7、ccb256、cox3的amiRNA干扰载体的遗传转化研究》一文中研究指出叶绿体和线粒体是植物能量代谢中最重要的两种细胞器,二者均具有原核起源,母系遗传的基因组,与细胞核一起组成了植物细胞中遗传物质的叁大携带者,在植物的遗传进化研究中也具有重要地位。随着测序工作的开展和基因组研究的不断深入,越来越多的证据表明,植物的叁套基因组之间存在着遗传信息的转移和交流。研究细胞核和细胞器对基因表达调控的关系,挖掘遗传信息传递转移的证据和规律,对于探寻细胞核与细胞器进化演变的足迹和未来方向具有重要意义。本研究结合运用生物信息学和基因工程手段,从细胞核与细胞器的同源基因入手,利用RNA干扰技术尝试干扰其在核内的表达,以此探明细胞核与细胞器对该基因的表达调控关系,进而找出相应遗传信息的流动方向,为推测细胞器未来的进化方向提供一些证据,所取得的主要研究成果如下:(1)通过BLAST比对,在拟南芥核基因组中找到rps7、ccb256、cox3叁个与线粒体基因组同源的基因,这叁个基因在核基因组中只有单个可表达拷贝,选其作为干扰目标;并利用WMD3完成amiRNA干扰序列设计。(2)在农杆菌介导下,将干扰载体转入拟南芥,并收获得到T0代种子;经潮霉素筛选和PCR检测,得到9株阳性转化体。(3)对转化体中存活的3株进行RT-PCR检测,发现ccb256基因受干扰后在核内的表达被完全抑制,rps7基因的表达量大幅上调,未得到cox3基因的干扰结果。结合基因功能分析得出结论:ccb256基因的表达主要由线粒体调控,可能是线粒体起源并复制进入核基因组的;而rps7基因的表达则主要由核基因组调控,推测它是由核基因组起源并复制进入线粒体基因组的。以上结果说明细胞核与线粒体确实存在双向的遗传信息交换,但是尚不能确定线粒体的进化方向。本文的研究成果为研究细胞核与细胞器间遗传信息的传递规律,以及预测细胞器基因组的进化方向奠定了初步的基础。(本文来源于《华中科技大学》期刊2012-01-01)
万慧颖,徐敏燕[9](2011)在《皮肤混合瘤中生存素、转化生长因子和增殖细胞核抗原的表达及意义》一文中研究指出目的检测生存素(Survivin)、转化生长因子(TGF)-α和增殖细胞核抗原(PCNA)在皮肤混合瘤中的表达,探讨它们在皮肤混合瘤发病中的意义。方法用免疫组织化学技术检测22例皮肤混合瘤的石蜡包埋组织及10例正常皮肤组织中Survivin、TGF-α和PCNA的表达。结果 Survivin在皮肤混合瘤组织中阳性率明显高于正常皮肤对照组,两者差异有统计学意义(P<0.01);TGF-α在皮肤混合瘤组织中阳性率明显高于正常皮肤对照组,两者差异有统计学意义(P<0.01);PCNA在皮肤混合瘤组织中阳性率明显高于正常皮肤对照组,两者差异有统计学意义(P<0.01)。结论 Survivin、TGF-α和PCNA在皮肤混合瘤组织中均呈高表达,其与皮肤混合瘤的发生关系密切。(本文来源于《四川医学》期刊2011年07期)
崔玉琳[10](2011)在《亚心型扁藻细胞核与叶绿体稳定转化系统的构建》一文中研究指出亚心型扁藻,又称亚心型四爿藻,是一种单细胞海洋绿藻。该藻在水产养殖、新能源开发等方面有重要的应用价值。为了推动该藻的基础研究进程并提高其应用价值,本文对亚心型扁藻的细胞核与叶绿体遗传转化体系进行了较系统的研究。首先通过亚心型扁藻对多种常用抗生素和除草剂草丁膦的敏感性实验,确定以草丁膦为筛选压力,其抗性基因bar基因为选择标记基因,构建亚心型扁藻核遗传转化系统。本文采用基因枪转化法和珠磨法两种方法建立亚心型扁藻的核遗传转化系统。珠磨法转化需要以原生质体为材料,所以我们用鲍鱼酶液去除亚心型扁藻的细胞壁制备原生质体;然后用珠磨法将pEGFP-N1质粒导入原生质体中,观察到了绿色荧光蛋白的瞬间表达,证明珠磨法可用来建立亚心型扁藻的核遗传转化系统。然后利用基因枪法和珠磨法将含有bar基因的质粒pSVB导入亚心型扁藻中,通过草丁膦筛选得到稳定转化的抗性单藻落。根据统计结果发现,珠磨法的转化效率高于基因枪法。本文采用基因枪法建立了亚心型扁藻的叶绿体遗传转化系统。首先克隆了亚心型扁藻的叶绿体基因组片段rrn16S-trnI和trnA-rrn23S作为同源整合区域;从莱茵衣藻叶绿体转化载体p64D上克隆启动子5’atpA和终止子3’rbcL,作为调控序列;以绿色荧光蛋白基因(gfp)为报告基因,bar基因为选择标记基因,构建了亚心型扁藻叶绿体同源整合载体pPSCG、pPSCB,用基因枪法将两个质粒导入亚心型扁藻细胞。通过流式细胞仪分选及激光共聚焦显微镜对观察到绿色荧光蛋白在叶绿体中的瞬间表达;转化质粒pPSCB的藻细胞经过草丁膦筛选,获得稳定转化子,检测到bar基因在亚心型扁藻叶绿体中的定点插入和稳定整合。(本文来源于《中国科学院研究生院(海洋研究所)》期刊2011-04-18)
细胞核转化论文开题报告
(1)论文研究背景及目的
此处内容要求:
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例:
背景越来越多的研究表明,PIM丝氨酸/苏氨酸激酶家族,包括PIM1、PIM2和PIM3成员,与肿瘤进展和转移相关。PIM1作为最吸引研究者研究的分子靶点,已经被鉴定为血液学和上皮性恶性肿瘤的潜在预后生物标志物。然而,到目前为止,PIM1影响癌症发生和进展的潜在调节作用和分子机制仍然在很大程度上仍然是未知的,包括肾透明细胞癌(ccRCC)。目的本研究的目的是分析PIM1在肾透明细胞癌中的表达和作用,进而为肾透明细胞癌患者治疗提供可能的新措施。方法(1)使用PIM1单克隆抗体对75例包含癌和癌旁组织的肾透明细胞癌组织芯片以及从医院收集的56例肾细胞癌患者石蜡组织切片(包含癌和癌旁组织)进行免疫组织化学染色,并对染色结果进行统计,分析PIM1基因的差异性表达,确定PIM1蛋白的定位,以及分析PIM1基因差异性表达和TNM分期、生存预后的相关性;并通过蛋白免疫印迹实验和实时荧光定量PCR检测PIM1基因在肾透明细胞癌细胞系中的差异性表达情况。(2)检测PIM1基因稳定下调前后,肾透明细胞癌细胞株体外增殖、迁移、侵袭、血管生成能力和上皮间质转化过程(EMT)的改变。(3)通过蛋白免疫印迹实验、蛋白质免疫共沉淀实验和小分子抑制剂等验证可能的细胞信号通路。检测PIM1基因稳定下调前后对EMT上游转录因子ZEB1、ZEB2、Snail1、Snail2和Twist表达的影响;检测PIM1基因稳定下调前后对Smad信号通路的改变;检测PIM1基因稳定下调前后对c-Myc的影响;检测PIM1基因稳定下调前后c-Myc与Smad相互作用关系的变化。(4)通过裸鼠皮下成瘤实验,检测PIM1基因稳定下调前后,肾透明细胞癌细胞株体内增殖能力的改变。结果(1)在本研究中,我们首次证实了PIM1在人肾透明细胞癌组织和细胞系中异常过表达,并且与人肾透明细胞癌的进展呈正相关。(2)下调PIM1基因抑制了肾透明细胞癌细胞增殖、克隆形成、迁移、侵袭和血管生成的能力,表明PIM1在肾透明细胞癌中可能是一个促癌基因。(3)机制上,我们发现PIM1可以与细胞核中的Smad2或Smad3相互作用,并磷酸化Smad2和Smad3,进而诱导转录因子ZEB1、ZEB2、Snail1、Snail2和Twist的表达,从而促进上皮间质转化过程(EMT)的发生。(4)此外,PIM1和c-Myc相互作用,并磷酸化c-Myc,进而激活了转录因子ZEB1、ZEB2、Snail1、Snail2和Twist的表达,以协同促进EMT,但是Smads没有参与到此信号通路中。结论(1)我们的研究结果表明,PIM1的异常表达有助于肾透明细胞癌的发生和进展。(2)此外,我们的研究结果揭示了PIM1潜在的分子调节机制;PIM1通过与Smads和c-Myc这两条不同信号通路相互作用,激活了下游转录因子ZEB1、ZEB2、Snail1、Snail2和Twist的表达,进而诱导EMT的发生。(3)总而言之,PIM1可作为治疗肾透明细胞癌患者的潜在靶点。
(2)本文研究方法
调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
细胞核转化论文参考文献
[1].王云鹏.植物生物反应器之叶绿体转化与细胞核转化[C].第八届泛环渤海生物化学与分子生物学会2018年学术交流会论文集.2018
[2].赵斌.PIM1通过靶向细胞核中的Smads和c-Myc来调节上皮间质转化过程并增强肾透明细胞癌的肿瘤活动[D].大连医科大学.2018
[3].黄亚萍,艾丽,王川.莱茵衣藻细胞核转化体系研究进展[J].生物技术.2017
[4].黄麟,杨济云,方玉兰,李秋成,梁燕.杉木炭疽菌遗传转化及附着胞发育过程的细胞核行为观察[J].南京林业大学学报(自然科学版).2017
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[6].吴天山,郭飞.细胞核Snail因子在胰腺癌上皮-间质转化中的作用[J].中国普通外科杂志.2015
[7].张眉,周善跃,陈旭君,李宝笃,郭泽建.玉米纹枯病菌细胞核纯化与原生质体转化的探讨[J].植物病理学报.2014
[8].谭翼.拟南芥细胞核与线粒体同源基因rps7、ccb256、cox3的amiRNA干扰载体的遗传转化研究[D].华中科技大学.2012
[9].万慧颖,徐敏燕.皮肤混合瘤中生存素、转化生长因子和增殖细胞核抗原的表达及意义[J].四川医学.2011
[10].崔玉琳.亚心型扁藻细胞核与叶绿体稳定转化系统的构建[D].中国科学院研究生院(海洋研究所).2011