蛹虫草固态发酵红枣及其培养物抗氧化性和斑马鱼保肝活性研究

蛹虫草固态发酵红枣及其培养物抗氧化性和斑马鱼保肝活性研究

论文摘要

蛹虫草是一种珍贵的真菌,它拥有抗炎、抗氧化、抑肿瘤、降血脂、免疫调节、保肝作用、神经保护等功效。红枣拥有非常高的保健价值,富含多糖、多酚、生物碱、三萜类、氨基酸、维他命等活性组分,拥有抗衰老、保护肝脏、抑癌、防治心血管疾病、抗抑郁、抗过敏、抗焦虑、改善胃肠环境等多种生理作用。蛹虫草拥有丰富的虫草素,红枣中拥有大量的红枣多糖、多酚、黄酮组分,它们都具有良好的可清除自由基的功能。本课题利用蛹虫草固态发酵不同比例红枣粉-大米培养基能够增加红枣培养物中的活性组分含量,增强红枣培养物的抗氧化活性。通过检测金丝小枣和蛹虫草子实体中总酚、总黄酮含量,比较两种萃取方法(热水浴法、超声萃取法)以及三种极性溶剂(水、80%乙醇、80%甲醇)萃取效果,为测定发酵产物中酚类、黄酮类含量选择最佳的处理方法。实验结果表明萃取效果表现为超声萃取法>热水浴法,80%甲醇>80%乙醇>水,但甲醇毒性强危害大,而乙醇廉价无毒,鉴于此,选择超声萃取法和80%乙醇为萃取溶剂,检测发酵产物中酚类和黄酮类的含量。实验设计4个不同比例红枣粉-大米培养基,分别表示为0%培养物、10%培养物、30%培养物和50%培养物。蛹虫草固态发酵周期为28 d,发酵期间,分别在未发酵(NF)、发酵第14 d、第21 d和第28 d取样,晾干,粉碎,得到样品粉末。实验通过检测发酵产物中多酚和黄酮组分的含量、评价了发酵产物水提取物的体外抗氧化作用以及发酵产物水提取物对酒精引起斑马鱼体成鱼及幼鱼体内氧化应激的影响,研究了蛹虫草发酵红枣产物的生理功能。通过检测各培养物80%乙醇萃取物中的多酚和黄酮组分的含量,结果表明蛹虫草发酵作用能够使4种培养物中多酚物质、黄酮类物质含量明显升高,且发酵28 d效果最佳。通过检测0%培养物和50%培养物水提物的体外抗氧化作用,结果表明发酵作用能够极大地提高红枣培养物的抗氧化活性,包括DPPH-清除力、ABTS+清除力、Fe2+鳌合力(FICP)、Fe3+还原抗氧化力(FRAP)。研究发现发酵时间越长,其抗氧化力就越强,发酵28 d的效果最佳;抗氧化力具有浓度依赖性,即萃提物的浓度越高,抗氧化能力就越高。此外,通过评估发酵28 d的50%培养物水提物对酒精引起斑马鱼成鱼及幼鱼体内氧化应激水平的影响,包括超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性和总抗氧化能力(T-AOC),结果表明酒精能够明显导致斑马鱼成鱼及幼鱼体内氧化应激水平升高,显著提高MDA含量,降低SOD、GSH-Px酶活性,降低T-AOC,而水提物能够改善斑马鱼体内氧化损伤,且高浓度水提物的效果最佳。实验结果表明发酵产物具有一定的保肝作用,在一定程度上能够缓解酒精引起斑马鱼肝脏氧化损害。

论文目录

  • 摘要
  • ABSTRACT
  • 缩略符号说明
  • 第一章 绪论
  •   1.1 蛹虫草概述
  •   1.2 红枣概述
  •     1.2.1 红枣多糖
  •     1.2.2 酚类化合物
  •     1.2.3 三萜类化合物
  •     1.2.4 环核苷酸
  •     1.2.5 其他物质
  •   1.3 固态发酵相关研究
  •   1.4 酒精性肝损伤的相关研究
  •   1.5 斑马鱼实验动物模型的优势
  •   1.6 本研究的目的和意义
  • 第二章 发酵样品处理方法的选择
  •   2.1 主要材料与仪器
  •     2.1.1 实验材料
  •     2.1.2 实验试剂
  •     2.1.3 实验仪器
  •   2.2 实验方法
  •     2.2.1 各提取物的制备
  •     2.2.2 总酚含量的测定
  •     2.2.3 总黄酮含量的测定
  •   2.3 实验结果
  •     2.3.1 各提取物总酚含量
  •     2.3.2 各提取物总黄酮含量
  •   2.4 本章小结与讨论
  • 第三章 蛹虫草与红枣固态发酵产物的成分研究
  •   3.1 主要材料与仪器
  •     3.1.1 实验材料
  •     3.1.2 实验试剂
  •     3.1.3 实验仪器
  •   3.2 实验方法
  •     3.2.1 固态发酵
  •     3.2.2 总糖含量的检测
  •     3.2.3 菌丝生长量的检测
  •     3.2.4 乙醇萃取物中总酚和总黄酮含量的检测
  •     3.2.5 二次萃取组分中总酚含量的检测
  •   3.3 实验结果
  •     3.3.1 固态发酵中菌丝生长情况
  •     3.3.2 各培养物的总糖含量
  •     3.3.3 各培养物的菌丝生长量
  •     3.3.4 乙醇萃取物中总酚和总黄酮含量的检测
  •     3.3.5 二次萃取物中总酚含量的检测
  •   3.4 本章小结与讨论
  • 第四章 蛹虫草-红枣发酵产物的抗氧化活性研究
  •   4.1 主要材料与仪器
  •     4.1.1 实验材料
  •     4.1.2 实验试剂
  •     4.1.3 实验仪器
  •   4.2 实验方法
  •     4.2.1 培养物抗氧化组分的提取
  •     4.2.2 培养物抗氧化能力的检测
  •   4.3 实验结果
  • -清除力的测定'>    4.3.1 DPPH-清除力的测定
  • +清除力的测定'>    4.3.2 ABTS+清除力的测定
  • 2+鳌合力的测定'>    4.3.3 Fe2+鳌合力的测定
  • 3+还原抗氧化力的测定'>    4.3.4 Fe3+还原抗氧化力的测定
  •   4.4 本章小结与讨论
  • 第五章 蛹虫草-红枣发酵产物的斑马鱼保肝活性研究
  •   5.1 主要材料与仪器
  •     5.1.1 实验材料
  •     5.1.2 实验试剂
  •     5.1.3 实验仪器
  •   5.2 实验方法
  •     5.2.1 斑马鱼的饲养
  •     5.2.2 发酵培养物活性物质的提取
  •     5.2.3 培养物水提物对斑马鱼成鱼保肝活性试验
  •     5.2.4 培养物水提物对斑马鱼幼鱼保肝活性试验
  •   5.3 实验结果
  •     5.3.1 培养物水提物对斑马鱼成鱼保肝活性试验
  •     5.3.2 培养物水提物对斑马鱼幼鱼保肝活性试验
  •   5.4 本章小结与讨论
  • 工作总结与展望
  • 参考文献
  • 附录
  • 致谢
  • 学位论文评阅及答辩情况表
  • 文章来源

    类型: 硕士论文

    作者: 王曼曼

    导师: 凌建亚

    关键词: 蛹虫草,红枣,斑马鱼,抗氧化活性

    来源: 山东大学

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,医药卫生科技

    专业: 轻工业手工业,中药学

    单位: 山东大学

    分类号: TS205.5;R285.5

    总页数: 77

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