宋晓庆王洪华蔡立义肖潇翁美玲南京医科大学附属无锡市妇幼保健院生殖中心江苏无锡２１４００２基金项目:无锡市医院管理中心重大项目(YGZZ１１０７)
【摘要】目的观察应用新型多孔睾丸穿刺针对无精子症患者行睾丸精子抽吸术进行卵胞浆内单精子注射(ICSI)的临床结局.方法选取２０１１年－２０１４年在我院行CISI助孕的患者,共２８６个周期,将从睾丸获得精子的无精子症患者分为一组,共１４７个周期.将体外射出精液(严重少弱精子症)的患者分为一组,共１３９个周期.对这两组的一般情况、卵裂率、可移植胚胎率、优质胚胎率、生化妊娠率、临床妊娠率、自然流产率情况进行比较.结果TESA组、射出精液组比较,患者的一般情况,卵裂率、可移植胚胎率、优质胚胎率、生化妊娠率、临床妊娠率、自然流产率无统计学差异.结论对于无精子症患者,应用新型多孔睾丸穿刺针行TESA进行ICSI对临床结局没有影响,可以在临床工作中应用.【关键词】无精子症;睾丸精子抽吸术;卵胞浆内单精子注射;【中图分类号】R７【文献标识码】B【文章编号】１００８－６３１５(２０１５)１２－０１２０－０２
男性不育症是男科的常见疾病,其中无精子症占男性不育症患者的１０％－２０％[１],其治疗关键是如何高效的通过外科取精方法从睾丸组织中获得足够数量的、高质量的活动精子.但是,睾丸精子相对于精液中的精子数量少、活动力差、成熟度低,利用其行ICSI助孕的临床结局与精液中的精子相比较是否有差异,一直倍受关注.本中心自２０１１年开始应用自制新型多孔睾丸穿刺针对无精子症患者行睾丸精子抽吸术,获得精子后行ICSI助孕治疗,获得了良好的效果,现将临床资料总结如下.
１资料与方法
１．１临床资料选取２０１１年４月至２０１４年１２月在我院生殖医学中心男科门诊行TESA找到活动精子的无精子症患者１４７例.选取同期因男方严重少弱精子症而在本中心行ICSI助孕患者１３９例.所有患者外周血染色体检查正常.１．２方法１．２．１__________精子获取对于无精子症患者,完成辅助检查后,于女方取卵日当天获取精子待行ICSI.严重少弱精子症患者禁欲３－７天于女方取卵日当天取精室手淫取精.
１．２．２TESA应用多孔睾丸穿刺针取材,患者取仰卧位,常规消毒、铺无菌巾,２％利多卡因精索神经阻滞麻醉效果满意后,左手三指固定睾丸,将连接２０ml一次性注射器的多孔睾丸穿刺针垂直刺入睾丸中部约１．５cm.利用负压抽吸的原理,将组织吸入针孔中,将针快速拔出,用眼科镊将穿刺针侧孔中的睾丸组织取出,反复操作２－３次.将抽吸出的睾丸组织放入HEPES缓冲的HTF培养液中,立即送往本中心实验室,利用空针针头研碎曲细精管,最后在倒置显微镜下观察有无精子及活动精子,将见到的含有活动精子的睾丸组织悬液洗涤后进行ICSI.见图１－５.１．２．３控制性超促排卵方法所有患者均采用黄体中期启动的短效GnRHa.于当晚注射注射绒毛膜促性腺激素２５０ug.３４－３６h后取卵.１．２．４卵裂、胚胎移植和ICSI结局判断取卵后采用ICSI方法受精,ICSI后１８－２０h后观察受精情况,至第３天,根据细胞数目和核碎片量评估胚胎级别,行胚胎移植,并同时给于黄体支持.胚胎移植２周后进行血HCG检查,胚胎移植４周后,阴道超声检查见有孕囊和胎心搏动为临床妊娠.２统计学分析用SPSS１６．０软件进行数据处理,计数资料以(x±s)表示,计量资料采用t检验,计数资料采用x２检验,P＜０．０５为有统计学差异.
３结果
３．１一般情况比较２组患者的年龄、不孕年限比较差异没有显著性(P＞０．０５),见表１
４讨论
男性不育的致病原因其中很大一部分是无精子症所致,辅助检查并不能完全预测睾丸中是否存在精子.睾丸穿刺活组织检查在男科学中是一种有价值的检查方法,只要通过睾丸穿刺在无精子患者的睾丸中找到活动精子,结合ICSI技术,就能使其配偶受孕.已有研究显示,即使是非梗阻性无精子症患者,睾丸中有可能存在局部精子发生区域,如何能更精确地找到这些局部精子发生区域一直是睾丸外科取精技术的发展方向.睾丸细针穿刺抽吸活检术(TESA)是目前男性科常用一种手术方式,通常在局麻下以１６G注射器针头连接２０m１一次性注射器经皮穿刺睾丸,通过负压吸引的方式获得少量睾丸组织,之后在显微镜下寻找组织中是否含有活动精子.如果能够找到精子可以进行冷冻保存,或者用于ICSI治疗.但是常规的手术方法所取的睾丸组织较少,有时甚至不足以找到可以利用的形态正常的活动精子,TESA的获精率各家报道不一,在１０％到３０％之间由本中心自行研制的新型多孔睾丸穿刺针,是在１６G不锈钢注射针头上,距针尖０．５cm之间间断序错开２－３个方形凹槽,每个槽的深度达针直径的２/３,多个错开的凹槽可以达到一次进针睾丸组织多点取材的目的,再利用注射器保持负压情况下将睾丸组织取出.一般所获取的组织结构较为完整,有时甚至可以取出一段较长的睾丸生精小管,大大提高了睾丸组织中精子获得率.而且具有操作方便、创伤小恢复快、术后并发症发生率极小等优点[２].本中心２０１１至今应用新型多孔睾丸穿刺针进行了２６４例睾丸穿刺抽吸取精术,精子获得率为５７．９％.高于已有的文献报道.精子在睾丸中产生,附睾中成熟,即获取运动能力和受精能力,再在生殖管道的运输过程中与附属性腺和生殖管道的分泌液共同组成精液精子[３].睾丸精子在结构上已完成减数分裂,有受精卵卵裂时纺锤体形成所必需的父源中心粒,在功能上具有卵子激活因子,可引发内源性钙离子的释放导致卵子激活,保证了正常的受精和持续的胚胎发育能力[４].ICSI技术将精子直接注射入卵胞浆内完成受精,远远降低了对精子数量、活动率的要求[５].无论是来自精液还是睾丸组织,只要找到形态正常的活动精子,都有可能受精、妊娠.因此推测,精子的来源对ICSI结局无影响,而影响ICSI的关键在于是否能找到正常形态的活动精子[６].我们对睾丸精子组与射出精液的严重少弱精子症组进行分析,发现两组卵裂率、可移植胚胎率、优质胚胎率、临床妊娠率、早期流产率均无统计学差异.综上所述,无精子症患者行TESA所获得的活动精子与严重少弱精子症患者射出的精子行ICSI后的临床结局无显著性差异.应用本中心自行研制的新型多孔睾丸穿刺针行TESA具有创伤小,并发症少,恢复快,一次性获取睾丸组织多,获得形态正常的活动精子多的优点,可以在临床应用.
参考文献[１]JarowJP,EspelandMA,LipshultzLI,etal．Evaluationoftheazoospermicpatient．JUrol,１９８９,１４２(１):６２－６５．[２]StanwellSmithRE,HendryWF．Theprognosisofmaleinfertility:AsurＧveyof１０２５menreferredtoafertilityclinic．BrJUrol,１９８４,５６(４):４２２－４２８．[３]SchlegelPN．Nonobstructiveazoospermia:ArevolutionarysurgicalapＧproachandresults．SeminReprodMed,２００９,２７(２):１６５－１７０．[４]AbdelRaheemA,GaraffaG,RushwanN,etal．Testicularhistopathologyasapredictorofapositivespermretrievalinmenwithnon－obstructiveazoospermia．BJUInt,２０１２May１５．doi:１０．１１１１/j．１４６４－４１０X．２０１２．１１２０３．x．[５]王洪华,蔡立义,俞红英,等．新型多孔穿刺针在临床中的应用[J]．中国男科学杂志,２０１３,１９(９):８０２－８０５．[６]AmerM,AteyahA,HanyR,eta１．HumReprod２０００,１５(３):６５３－６５６．