胞内分枝杆菌ELISA检测方法的建立及初步应用

胞内分枝杆菌ELISA检测方法的建立及初步应用

论文摘要

目的建立胞内分枝杆菌双抗夹心ELISA检测胞内分枝杆菌生物学新方法。方法以自主制备的胞内分枝杆菌HBHA单克隆抗体为包被抗体,建立胞内分枝杆菌ELISA检测方法。应用棋盘法优化检测条件,同时试验对封闭液进行了最佳选择,对检测样品的特异性、敏感性和准确度进行评估。结果确定抗体包被最佳浓度为4μg/ml,抗鼠血清最佳稀释浓度为1:400,同时选择P/N值为3.38的1%BSA作为最佳封闭剂。双抗夹心法对新金分枝杆菌、耻垢分枝杆菌、浅黄分枝杆菌和卡介苗等抗原检测的P/N值均小于2.1,无交叉反应。当菌体浓度为200个/ml时,检测结果仍为阳性,应用该方法检测60份样品中,呈现阳性的菌株为56份,检测准确度高达93.3%。结论本方法可作为胞内分枝杆菌快速检测和流行病学调查的工具,同时对畜牧业的健康发展提供一种新的技术保障。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 样品
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 胞内分枝杆菌双抗夹心ELISA检测方法的建立
  •     1.2.2 检测条件优化
  •       1.2.2.1 单克隆抗体包被最佳浓度与抗鼠血清最佳浓度确定
  •       1.2.2.2 最佳封闭液的确定
  •     1.2.3 特异性试验
  •     1.2.4 敏感性试验
  •     1.2.5 准确度试验
  • 2 结 果
  •   2.1 胞内分枝杆菌双抗夹心ELISA检测方法的建立
  •   2.2 单克隆抗体包被最佳浓度与抗鼠血清最佳浓度的确定
  •   2.3 最佳封闭液的确定
  •   2.4 特异性试验
  •   2.5 敏感性试验
  •   2.6 准确度检测
  •   2.7 待测样品检测
  • 3 讨 论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王康,葛淑敏,宋力强,张家宁,饶继红

    关键词: 胞内分枝杆菌,酶联免疫法,检测

    来源: 现代预防医学 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 医药卫生科技,基础科学,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 长春理工大学生命科学技术学院

    基金: 吉林省科技发展计划项目(20120235),省级创新训练项目(2014S042),国家自然基金项目(31272566),编号:201810193

    分类号: S852.6

    页码: 1668-1671+1683

    总页数: 5

    文件大小: 101K

    下载量: 67

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