拟南芥AtNHX6基因启动子的克隆及表达分析

拟南芥AtNHX6基因启动子的克隆及表达分析

论文摘要

为了探明拟南芥内膜反向转运体AtNHX6基因的组织表达模式,从基因组中克隆了AtNHX6基因开放阅读框(ORF)上游侧翼调控区1 922bp序列,并成功构建AtNHX6基因启动子与GUS融合表达载体pCAM-BIA1381-proNHX6-GUS,通过农杆菌花序浸染法转化野生型拟南芥获得T3代纯合转基因拟南芥株系,经PCR检测扩增得到2 187bp目的条带。利用组织染色法鉴定转基因拟南芥的GUS表达模式发现,在子叶、下胚轴和花中GUS活性显著。在这些广泛表达的部位中,微管系统中的表达最为显著,真叶中只有局部检测到GUS表达;在根中GUS在根毛和侧根生长部位表达;在未成熟果荚中只有在果荚顶端和基部存在GUS活性,成熟果荚中只在果柄检测到GUS表达;在花中,雄蕊的花丝和花粉粒及雌蕊的柱头中检测到GUS表达。GUS染色分析结果表明,AtNHX6基因启动子与GUS的融合表达载体成功构建并正常启动GUS基因表达,且AtNHX6基因主要在拟南芥的子叶、下胚轴、根、花、果荚中的微管系统、根毛和侧根生长部位以及花丝、花粉、柱头中表达。

论文目录

  • 1 材料和方法
  •   1.1 植物材料及生长条件
  •   1.2 方法
  •     1.2.1 引物
  •     1.2.2 DNA提取及AtNHX6基因启动子克隆
  •     1.2.3 AtNHX6基因启动子序列分析
  •     1.2.4 载体构建及植株转化、筛选
  •     1.2.5 GUS染色分析
  • 2 结果与分析
  •   2.1 拟南芥AtNHX6基因启动子的克隆及顺式作用元件分析
  •   2.2 启动子表达载体的构建及鉴定
  •   2.3 拟南芥转基因植株的获得
  •   2.4 AtNHX6启动子在拟南芥中的表达分析
  • 3 讨论
  • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 王立光,陈军,李静雯

    关键词: 基因,启动子,表达分析

    来源: 西北植物学报 2019年02期

    年度: 2019

    分类: 基础科学

    专业: 生物学

    单位: 甘肃省农业科学院生物技术研究所,兰州大学生命科学学院

    基金: 国家自然科学基金(31660391,31460350),甘肃省农业科学院中青年基金(2016GAAS53),国家特色油料产业技术体系(GARS-17-SYZ-6)

    分类号: Q943.2

    页码: 191-198

    总页数: 8

    文件大小: 2812K

    下载量: 453

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