去细胞瓣膜论文_白鹏,乔韡华,张楠,刘春耕,史嘉玮

导读:本文包含了去细胞瓣膜论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译,主要关键词:瓣膜,细胞,心脏,组织,主动脉,支架,工程。

去细胞瓣膜论文文献综述

白鹏,乔韡华,张楠,刘春耕,史嘉玮[1](2018)在《去细胞组织工程心脏瓣膜再细胞化的研究进展》一文中研究指出心脏瓣膜疾病已经成为严重威胁人类健康的疾病之一。瓣膜置换手术作为治疗心脏瓣膜疾病的重要手段已在临床上广泛应用多年,据估计每年有超过20万患者接受主动脉瓣置换手术[1-2]。目前临床上所用人工瓣膜均存在明显缺陷,机械瓣置换者需要终身抗凝治疗,具有出血栓塞等风险[3];而生物瓣耐久性差,因远期存在钙化、衰败等变化,平均使用周期仅约10~15年[4-5]。近些年研究较多的组织工程瓣膜,有望解决目前瓣膜替代物存在的问题,使植(本文来源于《华中科技大学学报(医学版)》期刊2018年02期)

朱志刚[2](2016)在《应用聚乙二醇—聚己内酯制备去细胞组织工程心脏瓣膜支架的研究》一文中研究指出目的:应用甲氧基聚乙二醇-聚己内酯(methoxy poly(ethylene glycol)-poly(ε-caprolactone),MPEG-PCL)作为去细胞试剂,探索其对猪主动脉瓣的去细胞效果,并与目前常用的两种去细胞试剂(曲拉通(Triton X-100)和脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,SD))在组织形态、瓣膜相关成分、生物相容性及力学性能等方面作比较,旨在为组织工程心脏瓣膜的构建研究提供一种新颖的去细胞方法。方法:采用开环聚合法合成MPEG-PCL,并对其进行傅里叶红外光谱和核磁共振氢谱表征。新鲜猪主动脉瓣分别用不同浓度的MPEG-PCL进行去细胞处理,依据组织形态学观察确定最佳去细胞浓度,并以此浓度MPEG-PCL与同浓度曲拉通和脱氧胆酸钠分别对主动脉瓣进行处理(A组:MPEG-PCL,B组:Triton X-100,C组:SD,D组:正常瓣膜)。采用HE、MASSON染色和扫描电镜从组织形态学评价3种试剂的去细胞效果,再测定瓣膜相关成分,测定生物相容性和力学性能并通过细胞毒性实验测定各组去细胞瓣的毒性,从多方面评价各组瓣膜去细胞效果。结果:傅里叶红外光谱显示合成的共聚物具有MPEG链段和PCL链段的伸缩振动峰(3443.05cm-1、1728.66cm-1、1109.81cm-1),核磁共振氢谱显示合成的共聚物具有MPEG链段和PCL链段的质子峰(d1.38、1.65、2.31、4.06、3.64 ppm),通过红外光谱和核磁共振氢谱表征显示,成功合成MPEG-PCL,且共聚物的分子量约为4000 D。对于经不同浓度MPEG-PCL处理的猪主动脉瓣,从光学显微镜下观察,浓度为1%MPEG-PCL去细胞效果良好,细胞去除完全且瓣膜纤维结构保持完整。1%MPEG-PCL与同浓度的曲拉通和脱氧胆酸钠对瓣膜进行去细胞处理,并与正常瓣膜组比,各去细胞组瓣膜残留DNA量明显减少(A:5.00±0.11 ng/mg VS.B:21.26±0.84 ng/mg VS.C:16.31±0.83 ng/mg VS.D:336.94±9.33 ng/mg)(P<0.05),其中以MPEG-PCL组残存最少。各去细胞组瓣膜弹性蛋白含量减少(A:202.43±22.70 ng/mg VS.B:226.82±25.21 ng/mg VS.C:209.43±17.54 ng/mg VS.D:326.39±43.74 ng/mg)。而各去细胞组瓣膜含水量和胶原蛋白含量与正常瓣膜组比,未见明显变化。各去细胞组瓣膜均见一定程度的血小板黏附,但各去细胞组的溶血率较正常组小。细胞毒性实验表明,MPEG-PCL无细胞毒性,细胞增殖率在24小时和48小时均高于Triton X-100和SD(24h/48h:A:97.16±1.66%/98.30±1.28%VS.B:87.17±0.41%/86.79±3.10%VS.C:77.22±1.96%/72.90±2.75%VS.D:97.70±1.41%/97.72±0.72%)。从力学性能上,各去细胞瓣膜组在圆周和径向方向的相关力学性能与正常瓣膜相比未见明显变化。结论:浓度为1%的MPEG-PCL可用于去细胞猪主动脉瓣的制备,其去细胞效果优于同浓度的曲拉通和脱氧胆酸钠。MPEG-PCL无细胞毒性,能将瓣膜上的细胞去除完全,保留细胞外基质的超微结构完整,可作为制备组织工程心脏瓣膜去细胞生物支架的一种新试剂。(本文来源于《南昌大学》期刊2016-05-01)

崔彬,刘重阳[3](2015)在《两种去细胞人心脏瓣膜的免疫原性分析》一文中研究指出目的应用组织工程学方法去除人同种心脏瓣膜(HV)的内皮细胞成分或全部细胞成分,比较两种去细胞HV的免疫原性变化。方法采用低渗液-去污剂(1%Triton)-核酸酶[1μg/ml核糖核酸酶(RNase)和10μg/ml去氧核糖核酸酶(DNase)]去细胞法去除HV表面的内皮细胞成分,保留间质细胞及细胞外基质结构的完整性;采用低渗液-去污剂(1%去氧胆酸)-核酸酶[20μg/ml RNase和200μg/ml DNase]去细胞法去除HV组织中所有细胞成分,保留完整的细胞外基质。免疫组织化学方法测定HLA-DR抗原在HV组织中的表达;行大鼠皮下移植试验,组织学评价及定性、定量分析组织的钙化程度。结果免疫组织化学结果证实HV去内皮细胞和去全部细胞后组织中HLA-DR抗原表达均下降,但去全部细胞HV的HLA-DR抗原表达下降更为显着。大鼠皮下移植实验结果表明深低温液氮保存HV和去内皮细胞HV组织中有大量炎性细胞浸润,以淋巴细胞为着,管壁组织更为显着;去全部细胞HV炎性反应较轻,仅组织边缘有少量炎性细胞浸润。钙盐染色深低温液氮保存HV和去内皮细胞HV组织中可见钙盐沉积,呈现大量黑色颗粒,管壁组织更为显着;而去全部细胞HV组织中钙盐沉积极少。原子吸收光谱法定量分析结果表明去全部细胞HV组织中钙离子含量明显低于去内皮细胞HV和深低温液氮保存HV(P<0.05),后两者差异无统计学意义(P>0.05)。结论去全部细胞HV组织免疫原性显着下降,移植后炎性反应和组织钙化程度显着减轻。去内皮细胞HV组织免疫原性及移植后炎性反应有所下降,但移植后组织钙化程度仍显着增高,且管壁组织钙盐含量增高较瓣叶组织更加显着,提示组织中大量的间质细胞可能是参与HV移植后免疫反应、导致HV移植后钙化毁损的主要组织成份。(本文来源于《中国胸心血管外科临床杂志》期刊2015年05期)

周建良,丁静丽,聂彬恩,胡时栋,朱志刚[4](2013)在《基于迈克尔加成反应构建抗血小板黏附的去细胞猪主动脉瓣膜复合支架》一文中研究指出目的对去细胞猪主动脉瓣膜(DPAV)进行聚乙二醇(PEG)改性,构建血液相容性好的复合支架(PEG-DPAV)。方法基于固相有机合成理论对去细胞瓣进行巯基化修饰利用巯基-丙烯酸酯发生的迈克尔加成反应,使引入到DPAV中的巯基与4-arm-PEG-acrylate中的丙烯酸酯共价结合,全反射傅里叶变换红外光谱(ATR-FTIR)对PEG化的DPAV进行表征。复合支架血小板黏附实验评价其血液相容性,CCK-8法检测复合支架浸提液对大鼠内皮细胞增殖率的影响,评价其细胞毒性。结果 PEG-DPAV ATR-FTIR光谱:除出现DPAV特征峰外还出现PEG特征信号峰:1100,1342,C-O,-C-H2振动峰,证明DPAV成功接枝上PEG。复合支架和DPAV毒性评级均0级,和阴性对照组差异无统计学意义。大鼠内皮细胞经含浸提液的培养液培养后形态良好,增殖旺盛,复合支架表面血小板黏附数量较少,无聚集。结论利用迈克尔加成反应成功将PEG交联到DPAV上,反应条件温和,改性效果确切。复合支架表现出良好的血液相容性,无细胞毒性,适合组织工程心脏瓣膜支架的构建。(本文来源于《中华临床医师杂志(电子版)》期刊2013年24期)

史峰,邓诚,胡行健,史嘉玮,董念国[5](2012)在《聚乙二醇去细胞瓣复合支架联合人主动脉瓣膜间质细胞体外构建组织工程心脏瓣膜》一文中研究指出目的:运用聚乙二醇(PEG)交联猪去细胞瓣,共价接枝GRGDSPC多肽(甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸-脯氨酸-半胱氨酸),并联合人主动脉瓣膜间质细胞(HAVICs)体外构建组织工程心脏瓣膜。方法:通过迈克尔加成反应,将去细胞瓣支架上引入的巯基与枝化状PEG末端丙烯酰基共价结合,使PEG交联去细胞瓣,并行生物力学检测。再利用PEG-去细胞瓣支架上未饱和的丙烯酰基与GRGDSPC多肽末端半胱氨酸的巯基发生迈克尔加成反应,对PEG-去细胞瓣支架行GRGDSPC多肽共价修饰,免疫荧光测定GRGDSPC多肽修饰效果。在RGD-PEG-去细胞瓣复合支架上种植HAVICs,缝制于生物反应器内,体外构建心脏瓣膜。接种2、4、8h后,通过细胞计数观察细胞粘附情况。体外培养10d后行形态学观察和DNA含量测定。结果:力学测试结果显示,PEG-去细胞瓣支架的最大抗张强度较单纯去细胞瓣支架明显提高[(7.53±0.32)Mpa∶(5.65±0.28)Mpa],差异有统计学意义(P<0.05),与天然主动脉瓣的差异无统计学意义(P>0.05)。免疫荧光检测显示,GRGDSPC多肽可有效地与PEG-去细胞瓣共价接枝。不同时段细胞粘附计数及形态学观察提示,RGD-PEG-去细胞瓣复合支架明显促进HAVICs的粘附,并可在瓣膜表面形成连续单细胞层。DNA含量测定提示,RGD-PEG-去细胞瓣复合支架DNA含量明显增高(P<0.05)。结论:PEG交联去细胞瓣可明显改善瓣膜支架力学性能,GRGDSPC多肽接枝的PEG-去细胞瓣复合支架,可促进种子细胞的粘附,改善瓣膜支架生物学性能。(本文来源于《临床心血管病杂志》期刊2012年09期)

周建良,邹明晖,胡行健,邓诚,史嘉玮[6](2011)在《血管内皮细胞生长因子修饰的聚乙二醇化去细胞瓣构建心脏瓣膜复合支架》一文中研究指出目的对去细胞瓣进行聚乙二醇(PEG)化改性和血管内皮细胞生长因子(VEGF)共价修饰,以改善去细胞瓣力学性能和生物学性能,并联合内皮祖细胞构建心脏瓣膜复合支架。方法枝化状PEG末端的丙烯酰基与引入到去细胞瓣上的巯基,通过迈克尔加成反应完成去细胞瓣的PEG化,并作去细胞瓣PEG化前后以及天然主动脉瓣的生物力学测定;通过PEG化去细胞瓣上未饱和的丙烯酰基与VEGF中半胱氨酸残基上的巯基发生另一个迈克尔加成反应,对去细胞瓣进行VEGF共价修饰,免疫荧光测定VEGF修饰效果;在VEGF修饰的PEG化去细胞瓣、去细胞瓣和PEG化去细胞瓣上种植内皮祖细胞(EPCs),培养10d后行瓣膜上DNA含量测定、苏木素-伊红染色和扫描电镜。结果力学测试显示:PEG化去细胞瓣的最大抗张强度较单纯去细胞主动脉瓣明显提高(P<0.05),而与天然主动脉瓣相比无差异(P>0.05);免疫荧光检测显示:VEGF可有效地共价修饰PEG化去细胞瓣;与PEG化去细胞瓣和单纯去细胞瓣相比,VEGF修饰的PEG化去细胞瓣明显促进EPCs的增殖,并且可在瓣膜表面形成一层连续的单细胞层。结论 PEG化可明显改善去细胞瓣的力学性能,并且VEGF修饰PEG化去细胞瓣可促进支架上黏附细胞的增殖,有利于改善组织工程心脏瓣膜的构建。(本文来源于《中华临床医师杂志(电子版)》期刊2011年10期)

邹明晖,周建良,陈义初,胡行健,邓诚[7](2011)在《聚乙二醇交联去细胞瓣构建组织工程瓣膜复合支架》一文中研究指出目的采用分子量20kDa的枝化状丙烯酰化聚乙二醇(PEG)交联巯基化去细胞瓣,构建组织工程瓣膜复合支架,并对支架的结构稳定性、力学性能和细胞相容性进行初步检测。方法取猪新鲜主动脉瓣叶,进行脱细胞瓣处理,制备去细胞瓣并巯基化。戊二醛固定去细胞瓣,PEG交联巯基化去细胞瓣。形态学观察去细胞及交联效果,差示扫描量热法(DSC)测定热收缩温度,Ⅰ型胶原酶溶液测定其抗酶性分解能力,拉伸实验测定其抗拉强度和弹性模量,并采用AlamarBlue法测定支架对MRC-5人胚肺细胞的细胞毒性。结果 HE染色和扫描电镜(SEM)显示去细胞完全,细胞外基质保存完整;PEG交联后瓣叶变薄,纤维增粗呈束。PEG交联瓣的热收缩温度为(75.16±0.69)℃,与去细胞瓣[(67.63±1.09)℃]相比有显着提高,其差异有统计学意义(P<0.05)。PEG交联瓣6h及12h酶性分解率分别为(17.52±1.69)%和(48.83±2.67)%,与去细胞瓣[(64.91±2.05)%和(98.23±1.20)%]相比,分解率显着下降。PEG交联瓣抗拉强度较去细胞瓣显着为高,并达到天然瓣水平,弹性模量则远高于其他各组。细胞毒性试验显示PEG组和对照组活力细胞差别为(1.82±0.03)%,无统计学意义(P>0.05)。结论 PEG交联可显着改善去细胞瓣结构稳定性和力学性能,而无明显细胞毒性,有望用于组织工程瓣膜复合支架的构建。(本文来源于《中华临床医师杂志(电子版)》期刊2011年08期)

王国锋[8](2010)在《腹腔预处理去细胞光氧化猪主动脉瓣膜制备组织工程瓣膜》一文中研究指出第一部分去细胞结合光氧化对猪主动脉瓣膜组织学和生物力学的影响目的:采用去细胞结合染料介导的光氧化法处理猪主动脉瓣膜,寻找合适去细胞方案;评价光氧化交联法对猪主动脉瓣膜的生物力学性能的影响。方法:体外性能的研究:将120个瓣膜随机分为12组,每组10个,通过对瓣膜多步骤的去细胞效果,以及胶原弹力纤维保存的完整性等方面评价,获得去细胞的合适方案;将修剪好的40去细胞猪主动脉瓣膜随机分为4组,每组10个。F组:为新鲜组,置于无菌PBS液中40℃保存备用。DP组:为去细胞结合光氧化处理组,共计叁个亚组:DP12h组:为去细胞处理后再进行染料介导的光氧化处理12小时;DP24h组:去细胞后光氧化反应24小时;DP36h组:去细胞后光氧化反应36小时。通过热皱缩温度、组织含水量、最大抗张强度和最大拉伸距离及体外酶降解实验评价光氧化的最理想时间。体内性能研究:得到合适去细胞光氧化方案后,将45个瓣膜分为3组,新鲜组、戊二醛组、去细胞光氧化组。通过热皱缩温度、最大抗张强度和最大拉伸距离评价各瓣膜性能。然后建立大鼠皮下包埋模型,12周后获取组织标本,通过HE染色,比较各组瓣叶的形态结构变化及炎性反应情况;原子吸收光谱法测定组织钙含量,评价光氧化处理对去细胞猪主动脉瓣膜的体内生物稳定性及抗钙化性能影响。结果:采用多步骤去垢剂-酶消化法处理猪主动脉瓣膜,能够有效的去除瓣膜的细胞成分同时保留了完整的细胞外基质成分。第Ⅷ组脱细胞处理后的猪瓣膜比较理想,组织大体形态和新鲜猪瓣膜相似,光镜观察结果显示:细胞成分去除彻底,未见明显细胞残留成分,胶原弹力纤维保存较完整,组织结构无明显疏松。光镜结果显示,经光氧化反应进一步交联后去细胞瓣膜的组织结构将变紧凑,24小时可达最佳效果。机械性能检测显示,光氧化交联去细胞后的瓣膜,其机械性能将逐渐恢复,至光氧化24小时后去细胞猪主动脉瓣膜的机械性能与新鲜组比较无统计学差异(P>0.05);体外抗酶降解实验结果表明,去细胞光氧化后的猪主动脉瓣膜抗酶解能力相比新鲜的猪主动脉瓣膜有所提高,光氧化处理24小时后的抗酶解能力要优于12小时,与再处理12小时的效果无明显差异(P>0.05)。体内性能研究结果显示,大鼠皮下包埋实验中,新鲜对照组的猪主动脉瓣膜发生了比较严重、广泛的炎性反应,并出现了一定程度的溶解;去细胞光氧化组的炎性反应是所有组别中最轻的。钙含量测定结果显示去细胞光氧化组钙化程度最低,与其它两组有统计学差异(P<0.05);去细胞光氧化组的生物稳定性要优于新鲜的猪主动脉瓣膜及戊二醛组,瓣叶无明显降解,炎性细胞浸润少且范围局限,组织结构保存较好并有新生血管形成。戊二醛处理组可见明显大片团聚钙化区域,钙含量测定结果与其它两组比较有统计学差异(P<0.05)。结论:1.采用多步骤去垢剂一酶消化法(0.25%曲那通X-100 24h,0.05%胰蛋白酶和0.02%EDTA 10min,30u/m1DNase-Ⅰ和0.3mg、mlRNase-A 12h)是适合猪主动脉瓣膜的较佳脱细胞方案,能够有效去除其细胞成分,同时完整保存胶原纤维及弹力纤维。2.光氧化反应对去细胞猪主动脉瓣膜的交联作用呈时间依赖性,至光氧化反应24小时性能表现最佳。3.相比新鲜猪主动脉瓣膜,去细胞光氧化反应交联的猪主动脉瓣膜脉免疫原性低,生物耐受程度好。而相对戊二醛处理的猪主动脉瓣膜则具有更好的抗钙化性能。4.去细胞结合光氧化处理有可能成为前景广泛、适合于处理猪主动脉瓣膜新型处理方法。第二部分腹腔预处理制备组织工程瓣膜目的:评价腹腔预处理的去细胞光氧化的猪主动脉瓣膜在体内生物学性能及抗栓性能,细胞生长情况。方法:成年狗10只,雌雄不拘,随机分为两组,一组为腹腔预处理组,一组为普通组。去细胞光氧化的猪主动脉瓣膜,植入狗的腹腔内5天,然后取出裁剪成带瓣血管片,吻合到同一只狗的腹主动脉上,2月后取出,普通组是将去细胞光氧化的猪主动脉瓣膜裁剪成带瓣血管片直接吻合到狗的腹主动脉上,2月后取出。观察其细胞生成情况,Ⅷ因子染色和α-SMA免疫组化染色观察其内皮细胞和肌成纤维细胞的生长情况,通过热皱缩温度、最大抗张强度和最大拉伸距离评价其机械性能。结果:两组狗术后均无死亡,大体观察两组带瓣血管片光滑,无血栓形成。Ⅷ因子染色和α-SMA染色显示预处理组的带瓣血管片上有大量的肌成纤维细胞生成,表面有单层排列的内皮细胞,普通组有少量的肌成纤维细胞和散在的内皮细胞生成。机械性能研究显示腹腔预处理组的带瓣血管片热皱缩温度、最大抗张强度和最大拉伸距离明显强于普通组的带瓣血管片p<0.05。结论:去细胞结合光氧化反应处理的猪主动脉瓣膜植入体内后无不良反应,生物稳定性好,无血栓形成腹腔预处理制备的组织工程瓣膜体内能够再细胞化,其机械性能保持好,抗栓性能好。腹腔预处理方法有望成为构建组织工程瓣膜的新途径。(本文来源于《中南大学》期刊2010-10-01)

徐磊[9](2010)在《PEG纳米微球改性去细胞瓣构建组织工程心脏瓣膜的实验研究》一文中研究指出第一部分丙烯酰化四分枝聚乙二醇纳米微球合成第一节不同分子量4-Arm PEG-Ac合成和鉴定【摘要】目的:合成叁种分子量丙烯酰化四分枝聚乙二醇(4-Arm polyethylene glycol-Acrylate,4-Arm PEG-Ac)。方法:以不同分子量四分枝聚乙二醇(4-Arm polyethylene glycol,4-Arm PEG)和丙烯酰氯为原料,通过酯化反应合成MW2,000Da、5,000Da及20,000Da叁种分子量4-Arm PEG-Ac。应用1H核磁共振、高效液相色谱、基质辅助激光解吸电离、凝胶过滤色谱法鉴定该聚合物。结果:所合成聚合物纯度高,分子量与设计相符,多分散性和置换度都达到要求。结论:叁种不同分子量多聚物都可以进行后续实验。第二节不同纳米微球合成和比较【摘要】目的:合成叁种分子量4-Arm PEG-Ac纳米微球,并选择最合适的一种纳米微球进行后续试验。方法:以乳化交联法合成纳米微球,通过产率计算、透射电镜、Zeta电位分析仪比较叁种纳米微球。结果:叁种微球粒径范围都在20nm左右,由4-Arm PEG-Ac (MW20,000Da)所合成的纳米微球产率最高、形态最好、粒径最均一、分散相最多。结论:本次试验成功合成了叁种纳米微球,以4-Arm PEG-Ac (MW20,000Da)为原料合成的纳米微球最适合进行后续试验。第二部分纳米微球改性去细胞瓣构建复合支架第一节纳米微球改性去细胞瓣构建复合支架【摘要】目的:构建纳米微球复合支架,并证明其微观结构稳定可靠。方法:以碳二亚胺盐酸盐( 1-Ethyl-3-(3-dimethyllaminopropyl)carbodiimide hydrochloride ,EDC.HCL)为交联剂,将纳米微球与去细胞瓣交联,制备纳米微球复合支架。对纳米微球复合支架进行HE染色观察、扫描电镜观察、叁硝基苯磺酸(trinitro-benzene-sulfonic acid,TNBS)法检测自由氨基变化、湍流反应器检测支架稳定性。结果:电镜下支架表面布满纳米微球,TNBS法发现纳米微球复合支架自由氨基较单纯去细胞瓣明显减少,在湍流应力场作用2天后复合支架微观结构仍然保持。结论:成功地构建了纳米微球复合支架,其微观结构稳定可靠,纳米微球与去细胞瓣的结合是牢固的化学键合。第二节纳米微球复合支架相关生物学性能研究【摘要】目的:研究纳米微球复合支架生物相容性、控释特性及生物力学性能。方法:皮下包埋法研究纳米微球复合支架生物相容性,酶联免疫吸附测定法(enzyme linked immunosorbent assay ,ELISA)研究其对转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的控释能力,拉伸试验研究其生物力学性能。结果:纳米微球复合支架皮下包埋实验炎症反应轻,该支架对TGF-β1包封率约为72%,从第12小时开始,表现出对TGF-β1明显控释,该支架最大应力及弹性模量高于天然瓣膜和去细胞瓣膜,维持最大应变的能力优于去细胞瓣膜。结论:构建的纳米微球复合支架具有良好的生物相容性,对于TGF-β1具有良好的包封和控释特性,生物力学性能优良。第叁部分纳米微球复合支架构建组织工程心脏瓣膜【摘要】目的:鉴定原代培养肌成纤维细胞,证明包封有TGF-β1的纳米微球复合支架+肌成纤维细胞(Myofibroblasts,MFBs)体外静态培养方法能构建性能优良的组织工程心脏瓣膜(tissue engineering heart valve,TEHV)。方法:原代培养MFBs,直接光镜观察和免疫组化法鉴定,羟脯氨酸试剂盒检测TEHV胶原含量,拉伸试验检测TEHV力学性能。结果:光镜及免疫组化结果证明原代培养细胞为MFBs。与另外两组TEHV相比,包封有TGF-β1的纳米微球复合支架所构建的TEHV胶原含量明显增加,弹性模量及最大应力明显增强,具有较好的维持最大应变的能力。结论:该原代培养法成功地培养出MFBs,TGF-β1纳米微球复合支架+MFBs体外静态培养有望构建出性能良好的TEHV。(本文来源于《华中科技大学》期刊2010-05-01)

邓诚,董念国,史嘉玮,胡志伟,陈思[10](2010)在《聚乙二醇载药缓释微球复合去细胞瓣制备组织工程心脏瓣膜支架》一文中研究指出目的:制备聚乙二醇(PEG)载药缓释微球复合去细胞瓣组织工程心脏瓣膜(TEHV)支架。方法:制备PEG微球,电镜观察粒径。去细胞瓣与PEG微球偶联,吸附转化生长因子(TGF-β1)。行ELISA检测,分子生物学、形态学和生物力学检测。结果:PEG微球粒径(42.72+3.48)nm。酶联免疫吸附检测示缓释效果明显,7dTGF-β1释放率67.22%,PEG微球的TGF-β1包封率为82.01%。与单纯去细胞瓣膜比较,复合支架羟脯氨酸含量和DNA含量无显着变化,形态学检测显示复合支架细胞外基质联合紧密,胶原纤维结构紧凑,且瓣叶生物力学性能提高。结论:制备PEGTGF-β1缓释微球去细胞瓣复合支架可行。(本文来源于《临床心血管病杂志》期刊2010年01期)

去细胞瓣膜论文开题报告

(1)论文研究背景及目的

此处内容要求:

首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景,再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题,并提出你的论文准备的观点或解决方法。

写法范例:

目的:应用甲氧基聚乙二醇-聚己内酯(methoxy poly(ethylene glycol)-poly(ε-caprolactone),MPEG-PCL)作为去细胞试剂,探索其对猪主动脉瓣的去细胞效果,并与目前常用的两种去细胞试剂(曲拉通(Triton X-100)和脱氧胆酸钠(sodium deoxycholate,SD))在组织形态、瓣膜相关成分、生物相容性及力学性能等方面作比较,旨在为组织工程心脏瓣膜的构建研究提供一种新颖的去细胞方法。方法:采用开环聚合法合成MPEG-PCL,并对其进行傅里叶红外光谱和核磁共振氢谱表征。新鲜猪主动脉瓣分别用不同浓度的MPEG-PCL进行去细胞处理,依据组织形态学观察确定最佳去细胞浓度,并以此浓度MPEG-PCL与同浓度曲拉通和脱氧胆酸钠分别对主动脉瓣进行处理(A组:MPEG-PCL,B组:Triton X-100,C组:SD,D组:正常瓣膜)。采用HE、MASSON染色和扫描电镜从组织形态学评价3种试剂的去细胞效果,再测定瓣膜相关成分,测定生物相容性和力学性能并通过细胞毒性实验测定各组去细胞瓣的毒性,从多方面评价各组瓣膜去细胞效果。结果:傅里叶红外光谱显示合成的共聚物具有MPEG链段和PCL链段的伸缩振动峰(3443.05cm-1、1728.66cm-1、1109.81cm-1),核磁共振氢谱显示合成的共聚物具有MPEG链段和PCL链段的质子峰(d1.38、1.65、2.31、4.06、3.64 ppm),通过红外光谱和核磁共振氢谱表征显示,成功合成MPEG-PCL,且共聚物的分子量约为4000 D。对于经不同浓度MPEG-PCL处理的猪主动脉瓣,从光学显微镜下观察,浓度为1%MPEG-PCL去细胞效果良好,细胞去除完全且瓣膜纤维结构保持完整。1%MPEG-PCL与同浓度的曲拉通和脱氧胆酸钠对瓣膜进行去细胞处理,并与正常瓣膜组比,各去细胞组瓣膜残留DNA量明显减少(A:5.00±0.11 ng/mg VS.B:21.26±0.84 ng/mg VS.C:16.31±0.83 ng/mg VS.D:336.94±9.33 ng/mg)(P<0.05),其中以MPEG-PCL组残存最少。各去细胞组瓣膜弹性蛋白含量减少(A:202.43±22.70 ng/mg VS.B:226.82±25.21 ng/mg VS.C:209.43±17.54 ng/mg VS.D:326.39±43.74 ng/mg)。而各去细胞组瓣膜含水量和胶原蛋白含量与正常瓣膜组比,未见明显变化。各去细胞组瓣膜均见一定程度的血小板黏附,但各去细胞组的溶血率较正常组小。细胞毒性实验表明,MPEG-PCL无细胞毒性,细胞增殖率在24小时和48小时均高于Triton X-100和SD(24h/48h:A:97.16±1.66%/98.30±1.28%VS.B:87.17±0.41%/86.79±3.10%VS.C:77.22±1.96%/72.90±2.75%VS.D:97.70±1.41%/97.72±0.72%)。从力学性能上,各去细胞瓣膜组在圆周和径向方向的相关力学性能与正常瓣膜相比未见明显变化。结论:浓度为1%的MPEG-PCL可用于去细胞猪主动脉瓣的制备,其去细胞效果优于同浓度的曲拉通和脱氧胆酸钠。MPEG-PCL无细胞毒性,能将瓣膜上的细胞去除完全,保留细胞外基质的超微结构完整,可作为制备组织工程心脏瓣膜去细胞生物支架的一种新试剂。

(2)本文研究方法

调查法:该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。

观察法:用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。

实验法:通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。

文献研究法:通过调查文献来获得资料,从而全面的、正确的了解掌握研究方法。

实证研究法:依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。

定性分析法:对研究对象进行“质”的方面的研究,这个方法需要计算的数据较少。

定量分析法:通过具体的数字,使人们对研究对象的认识进一步精确化。

跨学科研究法:运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。

功能分析法:这是社会科学用来分析社会现象的一种方法,从某一功能出发研究多个方面的影响。

模拟法:通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。

去细胞瓣膜论文参考文献

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论文知识图

去细胞瓣膜支架;B构建中的TE...扫描电镜下种植细胞的去细胞瓣膜内皮细胞种植去细胞瓣膜支架 ...去细胞瓣膜细胞核去除彻底(HE×...:每片PEG交联去细胞瓣膜在不同时...去细胞瓣膜的扫描电镜,内皮细胞...

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去细胞瓣膜论文_白鹏,乔韡华,张楠,刘春耕,史嘉玮
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