论文摘要
为建立一种快速,便于现场检测布鲁氏菌的方法,本研究基于布鲁氏菌(Brucella) Omp31基因的保守片段设计并合成引物和探针,通过对反应条件优化建立了布鲁氏菌重组酶聚合酶-侧流层析试纸条(RPA-LFD)检测方法,对该方法进行特异性、敏感性、重复性检测。结果显示该检测方法在39℃反应20 min以上便可肉眼观察到明显结果。特异性试验结果显示除布鲁氏菌基因组呈阳性外,维氏气单胞菌、大肠杆菌、甲型副伤寒沙门氏菌、肠炎沙门氏菌、乙型溶血性链球菌均为阴性,特异性较强;敏感性试验结果显示,该方法最低可检测到101拷贝/μL的质粒标准品,比常规PCR高出100倍,敏感性较高;重复性试验结果显示,3次批间重复试验无明显差异,稳定性良好。利用该方法检测34份临床样品,其检测结果与普通PCR检测结果符合率为100%。本研究建立了一种快速检测布鲁氏菌的方法,该方法不需要特殊的仪器,操作简便,灵敏度高,肉眼即可观察到结果,为布鲁氏菌病的现场快速诊断提供了帮助。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 于博,李博宇,赵博,李东,李健明,时坤,曾范利,宗颖,杜锐
关键词: 布鲁氏菌,重组酶聚合酶扩增技术,侧流层析试纸条
来源: 中国预防兽医学报 2019年12期
年度: 2019
分类: 农业科技,基础科学
专业: 生物学,畜牧与动物医学
单位: 吉林农业大学动物科学技术学院,吉林农业大学中药材学院
基金: 国家重点研发计划项目(2018YFD0500900),吉林省科技厅科技支撑计划(20180201010YY)
分类号: S852.61
页码: 1233-1237
总页数: 5
文件大小: 1406K
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标签:布鲁氏菌论文; 重组酶聚合酶扩增技术论文; 侧流层析试纸条论文;