论文摘要
目的构建红色荧光基因标记基因组、绿色荧光基因标记RK2质粒的双荧光标记供体菌,以实现对耐药质粒在动物体内接合转移的可视化观察。方法利用RED重组技术,以Td-Tomato基因作为表达红色荧光蛋白（RFP）的基因,将Td-Tomato基因插入asl基因中间,并敲入到大肠杆菌K12基因组中制备成K12Td-tomato细菌。同时构建带有EGFP基因标记的RK2质粒EGFP-RK2,并电转K12Td-tomato细菌感受态细胞,实现双荧光标记供体菌的构建。结果构建的K12Tdtomato:RK2 （EGFP）供体菌能够稳定的同时发出绿色和红色荧光,并且荧光的表达是自发的,不需要底物的诱导。结论利用基因组技术可以构建双荧光标记的供体菌,为对耐药基因在生物体内的转移扩散研究提供了可行性。
论文目录
文章来源
类型: 期刊论文
作者: 杨忠委,师丹阳,金敏,尹静,谌志强,王华然,邱志刚,李君文,付佳伦,杨栋
关键词: 荧光标记,质粒,耐药性
来源: 解放军预防医学杂志 2019年06期
年度: 2019
分类: 医药卫生科技,基础科学
专业: 生物学,药学
单位: 军事科学院军事医学研究院环境医学与作业医学研究所,天士力控股集团有限公司研究院
基金: 国家自然科学基金(No.81673122),天津市科技支撑项目(No.15ZCZDSF00010)
分类号: Q78;R96
DOI: 10.13704/j.cnki.jyyx.2019.06.001
页码: 1-4
总页数: 4
文件大小: 309K
下载量: 144
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