导读:本文包含了初级卵泡论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:卵泡,小鼠,体外,卵巢,细胞,成熟,生长因子。
初级卵泡论文文献综述
江晨[1]（2015）在《蛋白质异戊二烯化修饰调控卵母细胞质量及初级卵泡次级卵泡转换的机制》一文中研究指出卵泡是卵巢结构和功能的基本单位,每个卵泡由卵母细胞及体细胞(颗粒细胞)构成。在出生前后,停滞在双线期的卵母细胞开始被周围的颗粒细胞包裹,逐渐形成原始卵泡。原始卵泡形成后数量固定,聚集在卵巢的皮质部位,处于生长发育静止状态,称为原始卵泡库。在每个生理周期,都会有部分原始卵泡受到高度有序的调控,被选择性活化,形成初级卵泡,随后经历次级卵泡,窦状卵泡等几个阶段,最终排卵。卵泡的活化和生长异常,将影响卵巢正常功能的发挥,导致女性生殖健康问题,如卵巢早衰等。因此,研究卵泡的活化和生长机制对于理解卵巢早衰发展的病因和寻找有效的预防和治疗手段具有非常重要的理论依据和临床意义。蛋白质的异戊二烯化修饰包括以FPP为底物的法尼基化修饰和以GGPP为底物的香叶基香叶基修饰,这两种修饰对于一些小G蛋白的膜定位及信号通路活化发挥着重要作用。香叶基香叶基焦磷酸合成酶(GGPPS)以FPP为底物,催化生成GGPP。FPP和GGPP分别在法尼基转移酶FTase和香叶基香叶基转移酶GGTase的催化下,根据蛋白质C末端-CaaX基序的特性,进行法尼基修饰和香叶基香叶基化修饰。我们发现GGPPS大量表达于各级卵泡的卵母细胞中,而在衰老小鼠的卵母细胞中显着下降。这提示我们GGPPS控制的蛋白质异戊二烯化修饰平衡很可能参与卵泡发育的调控。我们利用Cre-loxp系统,在卵母细胞中中敲除GGPPS后,发现原始卵泡形成正常,而初级卵泡发育出现阻滞,卵泡不能向次级卵泡发育,从而导致卵巢早衰,小鼠生育能力下降。进一步分析表明敲除GGPPS导致Racl的香叶基香叶基化修饰下降影响STAT3Y705位点磷酸化,进而阻碍了STAT3的入核,抑制其对卵母细胞特异性基因GDF9的转录作用,导致颗粒细胞接受的GDF9信号下降,Smad2信号受阻而不能正常增殖,即GGPPS敲除导致卵母细胞Racl-STAT3-GDF9信号异常,影响卵母细胞与颗粒细胞之间的交流,从而使得初级卵泡发育阻滞。另一方面,GGPPS敲除小鼠初级卵泡卵母细胞80%的线粒体存在典型的被双层膜包裹的自噬形态,LC3的免疫染色证实GGPPS基因敲除使初级卵泡卵母细胞出现大量的线粒体自噬现象,线粒体数量也显着下降。GGPPS控制的异戊二烯化修饰与蛋白质的上膜定位密切相关,因此我们推测GGPPS敲除后直接影响一些蛋白质的线粒体定位,导致线粒体质量和数量下降,不能满足这个阶段卵母细胞快速生长过程中的能量需求,从而导致初级卵泡发育阻滞。在原始卵泡的活化过程中,卵母细胞发生诸多内在分子信号的变化：一方面卵母细胞进入快速生长,基因组活化合成大量生长发育所需的分子,如GDF9等,GDF9通过旁分泌方式结合到颗粒细胞受体上,促进颗粒细胞的增殖。另一方面卵母细胞大量合成细胞内容物,对能量的需以几何指数增加,需要大量线粒体进行代谢提供足够的能量。这两方面决定了卵母细胞的质量,反应了卵母细胞之后发育的潜能,因此GGPPS敲除影响原始卵泡活化过程中内在分子信号的变化：GDF9和线粒体功能,导致卵母细胞质量下降,活化后的卵母细胞发育潜能降低,导致初级卵泡发育阻滞。综上所述,我们发现GGPPS控制的蛋白质异戊二烯化修饰对卵泡的早期发育至关重要,其对卵泡发育的调控机制体现在一方面通过Racl-STAT3-GDF9信号从而影响卵母细胞和颗粒细胞之间的交流,另一方面则通过控制卵母细胞线粒体的质量和数量。(本文来源于《南京大学》期刊2015-05-01）
孙婧[2]（2013）在《牛初级卵泡体外培养体系的建立和miR-27a在小鼠颗粒细胞中的功能的研究》一文中研究指出体外培养145-170gm牛腔前卵泡能够形成卵泡腔已有人报道,但体外培养50-70μm的牛初级卵泡能否发育成腔仍没有报道。为了建立适合牛初级卵泡体外生长发育的培养体系,同时进一步揭示牛腔前卵泡体外发育的相关机制,本实验以屠宰场获取的牛卵巢为材料,以机械分离法获取直径50-70μm的牛初级卵泡,以α-MEM为基础培养基,调整不同浓度促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)和雌二醇(E2)激素配比以及优化碱性成纤维生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)添加量等试验,使用胶原包被的叁维培养方法对牛初级卵泡进行体外培养13或21天(d),观察卵泡直径以及成腔的变化,并用Real-Time PCR检测卵泡发育及成熟相关基因：芳香化酶(CYP19A1)、抗缪勒激素(AMH)、生长分化因子9(GDF-9)、骨形成蛋白15(BMP-15)以及m型转化生长因子p受体(TGFβR3)的表达。结果发现,以α-MEM为基础培养基,0.25μg/mL FSH+5IU/mL LH+0.1μg/mL E2+50ng/mL bFGF组以及FSH+LH+E2+bFGF和25ng/mL EGF联合处理组卵泡直径在体外培养21d时显着高于其他组(p<0.05),并且在培养第19d和17d形成小的卵泡腔,成腔率分别为16.7%和33.3%。卵泡发育、成熟相关基因CYP19A1,AMH, GDF-9,BMP-15和TGFβR3的表达也有显着变化。综上,我们建立了一套有效的体外促进牛初级卵泡生长和成熟的培养体系,即α-MEM+FSH(0.25μg/mL)+LH(5IU/mL)+E2(0.1μg/mL)+bFGF(50ng/mL)+EGF(25ng/mL);MicroRNA(miRNA)是近年来发现的一类长度为20-25nt的小干扰RNA,它通过对基因的转录后调控,在细胞的增殖、分化、凋亡等方面发挥重要作用。本实验在之前牛初级卵泡培养的基础上,发现miR-27a在牛卵巢中表达较高,但由于条件限制,我们利用小鼠模型来探讨miR-27a对颗粒细胞功能的影响。我们发现,miR-27a在小鼠腔前卵泡颗粒细胞中表达较高,但在有腔卵泡颗粒细胞中表达明显下降。因此,本实验通过体外高效转染技术,将miR-27a模拟物(mimics)和抑制剂(inhibitor)转入小鼠颗粒细胞中,利用Real-Time PCR、流式细胞术等实验方法检测miR-27a和相关基因的表达以及观察其对颗粒细胞增殖和激素分泌的影响。结果发现：miR-27a有促进颗粒细胞凋亡、抑制颗粒细胞增殖、抑制颗粒细胞分泌雌激素的功能,它可能是通过下游的靶基因CREB1来影响颗粒细胞的凋亡和雌激素分泌,但具体机理还需进一步验证。(本文来源于《中国农业大学》期刊2013-10-01）
王利红,陈子江,李媛,赵立新[3]（2008）在《程序化冷冻对人始基卵泡与初级卵泡保存效果的影响》一文中研究指出目的:探讨程序化冷冻对人卵巢组织内的始基卵泡与初级卵泡形态与凋亡的影响。方法:采用慢速程序化冷冻保存人的卵巢皮质,采用组织形态学、电镜及原位凋亡检测观察冷冻前后的始基与初级卵泡的形态学变化及凋亡情况。结果:冷冻前后人正常形态的始基卵泡比例无显着变化,而冷冻后形态正常的初级卵泡的比例较新鲜组显着下降(P<0.05)。冷冻后的初级卵泡内线粒体肿胀,胞浆及线粒体出现空泡化,而始基卵泡的超微结构保持良好。冷冻前后2种卵泡的凋亡率比较无差异。结论:程序化冷冻对人初级卵泡的形态损伤严重,对始基卵泡保存较好。(本文来源于《生殖与避孕》期刊2008年09期）
张文红,朱伟杰,钟瑜,张春雪[4]（2002）在《两种激素对小鼠初级卵泡体外成熟培养的实验研究》一文中研究指出目的 :探讨卵泡刺激素 (FSH)和人绝经期尿促性腺激素 (hMG)对小鼠初级卵泡体外培养成熟的作用。方法 :从小鼠卵巢组织人工分离所获的初级卵泡 ,在添加胎牛血清 (FBS)以及FSH或hMG的WaymouthmediumMB75 2 / 1培养液中比较培养。结果 :小鼠初级卵泡在添加 10 0 μg/LhMG的培养液中有 15 .94 % (n =6 9)发育成小囊腔卵泡 ,在添加 30 0 μg/LhMG的培养液中有 2 8.5 7% (n =5 6 )发育成大囊腔卵泡 ;在添加FSH的各培养组中 ,无囊腔卵泡的形成。结论 :培养液中添加适当浓度的hMG比FSH对卵泡的生长有利(本文来源于《中国病理生理杂志》期刊2002年07期）
张文红[5]（2001）在《小鼠和人初级卵泡及未成熟卵母细胞体外成熟培养的研究》一文中研究指出目的 通过建立卵泡和卵母细胞体外成熟培养模型，对卵母细胞的成熟机制进行研究，探讨卵母细胞成熟发育中颗粒细胞和激素的调节作用，增进对卵母细胞体外发育的认识。通过分析培养液中不同激素成分和浓度对小鼠初级卵泡体外生长成熟的作用，为人初级卵泡的体外成熟培养提供参考性实验依据。探讨小鼠未成熟卵母细胞在体外的成熟培养、受精以及受精后的胚胎发育，建立对成熟后卵母细胞活性及胚卵的检测方法；同时对人卵丘细胞-卵母细胞复合体（COCs）的体外成熟培养进行探讨性研究。方法 本实验以性成熟前昆明系小白鼠卵巢和患卵巢囊肿病人的卵巢组织为实验材料，在37℃，5％CO_2培养箱中培养初级卵泡和未成熟卵母细胞，并利用双醋酸荧光素（FDA）进行荧光染色，验证形态学观察结果。具体内容如下：1、小鼠卵巢小组织块在不同组成的酶液中消化处理，所获初级卵泡与机械法所 获初级卵泡在无胎牛血清（FBS）和促性腺激素的Waymouth medium MB752/1 培养液中比较培养。2、机械法所获小鼠初级卵泡在添加FBS以及卵泡刺激素（FSH）或人绝经期尿 促性腺激素（hMG）的Waymouth medium MB752/1培养液中比较培养。3、机械法所获小鼠未成熟卵母细胞的体外成熟、体外受精及胚胎培养。4、机械法及酶解法获取人初级卵泡和COCs的体外培养和成熟。结果1、在处理相同数量小鼠卵巢的情况下，含3mg/mL胶原蛋白酶IA和100IU/mL DNase的混合酶液组所获游离卵泡数多于其它组酶解结果；酶解所获卵泡的 体外培养存活时间却较机械法所获卵泡短。2、八鼠初级卵泡在添加 100mIU／mL hMG的培养液中有 15．940（n＝69）发育成 小囊腔卵泡，在添加300mIU／mL hMG的培养液中有28．57％（n。56）发育成大 囊腔卵泡。3、小鼠生发泡期卵田细胞体外培养24h，含300mIU／mLhm的AZ组卵日细胞体 外受精率为 33．33％…－84X 与含 300mIU／mL FSI的 BZ组间存在极显着差 异（P＜0＊1）；含300mIU／mLhMG的AZ组培养48h，囚出细胞受精率为0（n＝32）， 极显着低于含 150mIU／。L或 300mIU／mL FSH的 BI、BZ组（P＜0．01）。各组 受精卵的卵裂率比较，培养24h组普遍高于培养48h组。4、双醋酸荧光素ODA＊ 活胚卵及培养的正常卵母细胞发亮绿光。5、人初级卵泡在添加300m1U／mL hMG的培养液中能正常存活达20天以上，并 由IV级卵泡生长成VI级卵泡。人COC。在添加150mIU／mL FSH的培养液中 培养72h，释放Pbl而成熟。结论1、酶解法可获得较多游离卵泡，但刘卵泡的继续培养有不利影响。乙倍养液中添加适当浓度的伽G比陀［对卵泡的生长有利。3、小鼠GV期裸露卵日细胞能在体外培养成熟且受精分裂；培养液中促性腺激 素的种类和剂量以及培养时间对卵田细胞的成熟和受精有明显影响。4、FDA使形态学观察正常的培养后卵母细胞及受精后胚卵发亮绿光，两者结果 具有一致性。5、人卵泡和 COCS在己建立的小鼠卵泡和卵母细胞培养系统中能生长和成熟。(本文来源于《暨南大学》期刊2001-05-01）
张文红,朱伟杰,钟瑜[6]（2001）在《获得小鼠初级卵泡进行体外培养的酶解方法比较》一文中研究指出目的 :对酶解小鼠卵巢 ,获取初级卵泡的方法进行探讨。方法 :卵巢取自性成熟前的昆明系小白鼠 ,酶液由不同浓度的胶原蛋白酶、脱氧核糖核酸酶和链蛋白酶组成 ,培养液为WaymouthmediumMB75 2 /I,并添加牛血清白蛋白、胰岛素和转铁蛋白。实验共分 6组 ,每组所用酶液组成和处理时间各不相同。结果 :由 3mg/ml的胶原蛋白酶、10 0IU/ml的脱氧核糖核酸酶 ,另加或不加 0 .0 2mg/ml的链蛋白酶组成 ,处理时间为 2 0分钟的两个处理组 ,卵泡分离效果较好。结论 :胶原蛋白酶浓度是影响卵巢中卵泡分离的主要因素 ,它和消化时间对卵泡分离及分离后卵泡形态、存活能力有影响。(本文来源于《中国优生与遗传杂志》期刊2001年01期）
初级卵泡论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
体外培养145-170gm牛腔前卵泡能够形成卵泡腔已有人报道,但体外培养50-70μm的牛初级卵泡能否发育成腔仍没有报道。为了建立适合牛初级卵泡体外生长发育的培养体系,同时进一步揭示牛腔前卵泡体外发育的相关机制,本实验以屠宰场获取的牛卵巢为材料,以机械分离法获取直径50-70μm的牛初级卵泡,以α-MEM为基础培养基,调整不同浓度促卵泡素(FSH)、促黄体素(LH)和雌二醇(E2)激素配比以及优化碱性成纤维生长因子(bFGF)和表皮生长因子(EGF)添加量等试验,使用胶原包被的叁维培养方法对牛初级卵泡进行体外培养13或21天(d),观察卵泡直径以及成腔的变化,并用Real-Time PCR检测卵泡发育及成熟相关基因：芳香化酶(CYP19A1)、抗缪勒激素(AMH)、生长分化因子9(GDF-9)、骨形成蛋白15(BMP-15)以及m型转化生长因子p受体(TGFβR3)的表达。结果发现,以α-MEM为基础培养基,0.25μg/mL FSH+5IU/mL LH+0.1μg/mL E2+50ng/mL bFGF组以及FSH+LH+E2+bFGF和25ng/mL EGF联合处理组卵泡直径在体外培养21d时显着高于其他组(p<0.05),并且在培养第19d和17d形成小的卵泡腔,成腔率分别为16.7%和33.3%。卵泡发育、成熟相关基因CYP19A1,AMH, GDF-9,BMP-15和TGFβR3的表达也有显着变化。综上,我们建立了一套有效的体外促进牛初级卵泡生长和成熟的培养体系,即α-MEM+FSH(0.25μg/mL)+LH(5IU/mL)+E2(0.1μg/mL)+bFGF(50ng/mL)+EGF(25ng/mL);MicroRNA(miRNA)是近年来发现的一类长度为20-25nt的小干扰RNA,它通过对基因的转录后调控,在细胞的增殖、分化、凋亡等方面发挥重要作用。本实验在之前牛初级卵泡培养的基础上,发现miR-27a在牛卵巢中表达较高,但由于条件限制,我们利用小鼠模型来探讨miR-27a对颗粒细胞功能的影响。我们发现,miR-27a在小鼠腔前卵泡颗粒细胞中表达较高,但在有腔卵泡颗粒细胞中表达明显下降。因此,本实验通过体外高效转染技术,将miR-27a模拟物(mimics)和抑制剂(inhibitor)转入小鼠颗粒细胞中,利用Real-Time PCR、流式细胞术等实验方法检测miR-27a和相关基因的表达以及观察其对颗粒细胞增殖和激素分泌的影响。结果发现：miR-27a有促进颗粒细胞凋亡、抑制颗粒细胞增殖、抑制颗粒细胞分泌雌激素的功能,它可能是通过下游的靶基因CREB1来影响颗粒细胞的凋亡和雌激素分泌,但具体机理还需进一步验证。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
初级卵泡论文参考文献
[1].江晨.蛋白质异戊二烯化修饰调控卵母细胞质量及初级卵泡次级卵泡转换的机制[D].南京大学.2015
[2].孙婧.牛初级卵泡体外培养体系的建立和miR-27a在小鼠颗粒细胞中的功能的研究[D].中国农业大学.2013
[3].王利红,陈子江,李媛,赵立新.程序化冷冻对人始基卵泡与初级卵泡保存效果的影响[J].生殖与避孕.2008
[4].张文红,朱伟杰,钟瑜,张春雪.两种激素对小鼠初级卵泡体外成熟培养的实验研究[J].中国病理生理杂志.2002
[5].张文红.小鼠和人初级卵泡及未成熟卵母细胞体外成熟培养的研究[D].暨南大学.2001
[6].张文红,朱伟杰,钟瑜.获得小鼠初级卵泡进行体外培养的酶解方法比较[J].中国优生与遗传杂志.2001
论文知识图
