导读:本文包含了基因多论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:基因,血管,突变,多元论,实在论,蛋白,微管。
基因多论文文献综述
屠伟平,张琳菲,陈佳炜[1]（2019）在《低血钾症SLC12A3基因多个位点突变1例分析》一文中研究指出家族性低钾、低镁血症(Gitelman综合征)是一种罕见的肾小管疾病,其病理特点因人而异,主要共性为低钾血症、低镁血症、低尿钙和代谢性碱中毒等,该疾病诸多症状如极度疲惫、肌肉无力和低血压等均与电解质异常有关。Gitelman综合征对患者的生活质量产生持续的严重影响,甚至往往危及生命[1]。一般认为,SLC12A3基因突变可引起失盐性肾小管综合疾病。SLC12A3基因编码位于远端回旋管状细胞中的氯化钠共(本文来源于《浙江医学》期刊2019年22期）
尹曼曼,刘汉平,楼觉人[2]（2019）在《猪圆环病毒2型Cap基因多拷贝质粒的构建及病毒样颗粒的表达》一文中研究指出通过构建多拷贝数表达质粒,获得高表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白Cap的毕赤酵母菌株。将Cap的基因克隆到pPIC3.5K载体中后,利用同尾酶技术将表达盒(5′AOX-Cap-TT)重复插入载体,分别构建了含有1、2、4、6个拷贝基因数的表达质粒并通过电转化导入KM71菌株,重组菌株经发酵和甲醇诱导,通过SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白的表达;绘制不同拷贝数重组菌株的生长曲线;表达产物经纯化后透射电镜观察是否组装形成病毒样颗粒(VLPs)并免疫小鼠评估其免疫原性。Western blot结果显示,Cap蛋白能够在酵母细胞内表达,且6拷贝质粒的重组菌表达量最高;生长曲线显示拷贝数提高未对菌体正常生长带来影响;电镜下观察到表达的Cap蛋白能够自发装配成直径约为20 nm、与天然PCV2粒子大小相当、均一的VLPs;纯化后的VLPs免疫接种小鼠后能有效刺激机体产生PCV2抗体。含多拷贝数表达质粒的工程菌可显着提高重组毕赤酵母中Cap的表达量。(本文来源于《动物医学进展》期刊2019年09期）
杨林,王柳月,李慧美,陈华波[3]（2019）在《改进的多片段重迭延伸PCR制作基因多位点突变》一文中研究指出为在研究工作中提高制作目标基因多位点突变体的效率,对常规重迭延伸PCR进行适当改进:对于相距较近的两个突变位点,只需设计一对突变引物各自涵盖其中一个位点即可一次突变;对于相距较远的两个位点,可以采用叁片段重迭延伸PCR的办法解决;两者结合则可一次性突变多个位点。以制作RBCT的6位点突变体PSM6为例,利用上述策略,设计两对突变引物;采用OE-PCR法,第一轮PCR扩增出叁个片段,第二轮PCR同时利用叁片段重迭延伸产物作为模板扩增出目标基因突变体,再按常规分子克隆方法将其连入质粒载体。经测序检测,发现得到了预期的目标基因多位点突变体。因此,采用灵活的引物设计策略,结合多片段重迭延伸PCR即可一次性制作基因的多位点突变体,此方案可解决研究工作中大多数多位点突变问题。(本文来源于《中国生物工程杂志》期刊2019年08期）
邓小燕,徐胜超[4]（2019）在《基于Yarn云平台的生物基因多序列比对并行算法》一文中研究指出为了解决生物信息学中基因多序列比对的计算速度慢和软件陈旧的问题,提出了基于Yarn (Yet Another Resource Negotiator)云平台的生物基因多序列比对并行计算方法 Yarn_clustalW。分析了clustalW算法的数学模型及其面向MapReduce的任务划分方式,Yarn_clustalW中综合考虑了基因的长度和数目,采用一种基于阈值刻度的任务划分方式。利用NCBI的GenBank生物基因数据作为案例程序进行了测试。实验结果表明:Yarn_clustalW比起多序列比对clustalW串行计算方法具有更快的运行时间与加速比,可以使生物科研人员节省很多时间与精力,方便对于药物靶标的发现,缩短生物药物的开发周期。(本文来源于《基因组学与应用生物学》期刊2019年07期）
孙世东,胡文秀,孙辰权一[5]（2019）在《黄海N系欧美基因多用途货车创新技术的研究与分析》一文中研究指出为研究开发一款既能满足乘客舒适性要求,同时又能良好实现承载能力的高端多用途货车新产品,不断推动多用途货车核心技术的发展,公司研发人员对高端多用途货车的市场定位技术方案、技术控制与产业化状况进行分析。重点探讨了黄海牌N系欧美基因多用途货车的创新技术。(本文来源于《客车技术》期刊2019年02期）
陆俏颖[6]（2019）在《论从基因选择论到基因多元论的转变》一文中研究指出基因选择论和基因多元论都认为基因是自然选择的单位,但两者有不同的理解。前者认为基因是唯一的最终选择单位,后者则强调基因层次的数量模型可呈现其他层次的自然选择。论文以本体论疑难为线索,梳理了从基因选择论到基因多元论的转变,论证其内涵是实在论基因到工具论基因的概念转换。基因选择论以表型性状到DNA分子的还原关系为前提,持有"实在论基因"(以物理DNA分子定义),因此遭遇了本体论疑难;基因多元论以基因与表型的代表关系为前提,持有"工具论基因"(以生物表型定义),这一概念转换可成功回避本体论疑难。(本文来源于《自然辩证法通讯》期刊2019年01期）
吴林鲜,兰晓天,朱永平,胡淞,田英男[7]（2018）在《墨兰B类PI基因多靶点CRISPR/Cas9载体构建》一文中研究指出MADS基因家族对植物成花具有重要作用,在兰花中,目前还没有利用CRISPR/Cas9进行基因编辑的相关报道。墨兰(Cymbidium sinense) B类PISTILLATA (PI)基因可能与墨兰舌瓣的形成有关,为了进一步验证其PI基因的功能,本研究利用在线软件CRISPR-P设计3个靶点,并采用Overlapping-PCR技术和Golden Gate cloning策略构建了墨兰PI基因CRISPR/Cas9的多重sg RNA载体系统,经PCR、酶切和测序验证,植物编辑载体已构建成功。为在墨兰中实现该基因的定向突变提供了理论依据,同时也为在兰花基因组中应用CRISPR/Cas9基因编辑技术进行基因的定点突变修饰提供参考。(本文来源于《分子植物育种》期刊2018年21期）
陈珺君,刘晓艳,闵勇,杨自文[8]（2018）在《表达aiiA基因多黏芽胞杆菌工程菌构建与功能分析》一文中研究指出AiiA蛋白能够专一性地水解革兰氏阴性菌分泌的信号分子,从而抑制其致病基因的表达,减弱致病性。根据NCBI上公布的蜡状芽胞杆菌ATCC14579的aiiA序列设计引物,从苏云金芽胞杆菌Bacillus thuringiensis NBIN-861中扩增得到aiiA基因(GenBank登录号:MG704113),全长基因约750 bp。将aiiA基因插入大肠杆菌表达载体pET-28a和芽胞杆菌表达载体pBMB1A中,构建重组表达载体pETaiiA和pBMaiiA,pETaiiA转化大肠杆菌BL21(DE3),pBMaiiA转化多黏类芽胞杆菌NR1,获得重组工程菌BLaiiA和BPaiiA。SDS-PAGE和蛋白质谱鉴定表明AiiA蛋白均成功表达,利用指示菌紫色杆菌CV026检测发现目的蛋白具有水解N-酰基高丝氨酸内酯活性。其中纯化的AiiA蛋白(1.13 mg/mL)和重组菌BPaiiA浓缩的发酵上清液中的AiiA蛋白活性较高(透明圈直径分别为16和18 mm),马铃薯致病性试验和抑菌试验结果表明该蛋白对胡萝卜欧文氏菌具有一定的抗病活性,但不具有抑菌活性。多黏芽胞杆菌NR1和重组菌BPaiiA发酵产生的抑菌物质含量均为1.2%～1.3%,具有良好的抑菌效果。本研究为构建更有效的生物防治菌株奠定了理论基础。(本文来源于《中国生物防治学报》期刊2018年03期）
张灏龙[9]（2018）在《血管内皮细胞中生存素（Survivin）基因多效性分析》一文中研究指出动脉硬化为中老年常见疾病,随着高血压、高血糖、高血脂等发病率不断增高,动脉粥样硬化引起的心肌梗死、脑梗塞和肢体缺血坏死等危及生命的疾病越来越多,主要表现为动脉狭窄,内膜增生闭塞或栓塞,同时,内膜增生常伴随疾病的发生发展,目前主要治疗方式药物及手术治疗均无法逆转这一病理改变,它也是动脉旁路手术,介入手术后再狭窄闭塞的重要原因,以下肢动脉动脉闭塞最为常见。在外周血管疾病(periphery artery disease,PAD)治疗中侧支循环的建立能一定程度改善相应的症状,减缓疾病的进展甚至到达治愈的疗效,这一过程中血管内皮细胞(Vascular Endothelial Cells,VECs)的激活、增值、迁移、管腔结构的形成及塑性,并以出芽的方式形成新生血管网为保障侧支循环建立的关键所在,侧支循环建在增加末梢血量、改善循环灌注的同时,也可提升血管重建术后的长期通畅率。然后,研究表明成熟的VECs在病例生理情况下存在活性低,生长缓,更新慢等缺陷,极大程度的限制了在临床治疗中的应用。因此,如何赋予VECs抗凋亡、促增值、易迁移等特征为目前动脉硬化治疗急需解决的一大难题。生存素(Survivin,SVV)为 LAP(inhibitors of apoptosis protein)家族中分子量最小的成员,可与多种细胞周期及分裂相关蛋白如INCENP、Aurora B、CyclinD等发生交联反应从而提升细胞生存率。同时,SVV也能通过caspase依赖与非依赖细胞凋亡途径抑制细胞死亡过程。目前研究推测SVV可与caspase 3的感受器或效应器结合从而抑制细胞凋亡[1],也有报道指出SVV可直接与caspase 9结合抑制其凋亡活性[2]。最新研究表明SVV不仅在肿瘤细胞中表达上升,在人胚胎干细胞与多种体干细胞中也有显着表达,同时在未分化成熟的鳞状上皮、粘膜上皮细胞中也可检测到SVV表达,如食管上皮细胞、胃粘膜细胞及肾小管上皮细胞等[3,4],参与调控此类细胞对于内环境变化的所做出的相应反应并决定细胞的转归。SVV作为肿瘤非特异性基因,对细胞分化与凋亡调节有关键作用,在体内受到严格的调控,通常不参与细胞的肿瘤样变。本研究验证内皮细胞中SVV的表达情况,通过上调SVV的表达探讨其基因多效性对内皮细胞增值及凋亡等生物活性的影响,并对其机制进行进一步分析,同时体内验证内皮细胞中SVV基因对血管新生的作用,为周围血管疾病的基因靶向治疗奠定相应理论基础。第一部分内皮细胞中Suvivin基因的验证目的:验证内皮细胞中Survivin基因的表达情况方法:收集对数期生长的大鼠血管内皮细胞,采用真核细胞裂解液按照说明提取内皮细胞蛋白,通过western-blot及RT-PCR验证大鼠血管内皮细胞中Survivin基因(BIRC-5)在蛋白和核酸水平的表达情况。结果:western-blot结果显示各组大鼠血管内皮细胞在蛋白水平均可见Survivin蛋白表达,灰度值为70.45±3.586;同时RT-PCR结果提示BIRC-5在正常大鼠血管内皮细胞中均有表达,2-ΔΔCt为0.83±0.045。结论:Survivin蛋白及其编码基因BIRC-5在正常大鼠血管中均存在低表达。第二部分通过腺病毒转染过表达内皮细胞中Survivin 基因目的:上调内皮细胞中Survivin基因为其多效性研究构建理想细胞模型方法:构建携带目的基因(BIRC-5)及绿色荧光蛋白(Green Fluorescent Protein,GFP)的腺病毒载体,通过 MOI 梯度(100MOI、200MOI、300MOI)转染大鼠血管内皮细胞,在24h、48h荧光倒置显微镜观察GFP表达情况,摸索最适MOI。并通过western-blot及RT-PCR从蛋白及核酸水平验证Survivin基因的上调情况。结果:不同MOI转染结果显示,各组细胞在24、48h荧光强度呈递增趋势,且300MOI24h转染效率最佳,可达95%,western-blot结果显示300MOI转染组Survivin蛋白表达相应升高。PT-PCR结果显示BIRC-5较对照组显着升高。结论:Ad-GPF/SVV具有较高的转染率,对大鼠血管内皮细胞中Survivin基因表达有显着的提升第叁部分体外验证Survivin基因多效性对内皮细胞生物学活性的影响及其机制的研究目的:证实上调Survivin基因可使内皮细胞获得促增值、抗凋亡、易侵袭等生物活性并验证其调控靶点方法:Ad-GFP/SVV于300MOI转染大鼠血管内皮细胞,24小时后通过流式细胞仪、CCK-8、transwell试剂盒体外检测过表达Survivin基因内皮细胞的凋亡、增殖及侵袭活性变化,采用western-blot检测细胞周期蛋白Cyclin D及与survivin交联组成CPC的染色体过客蛋白INCENP及Aurora B蛋白及凋亡相关蛋白Caspase-3、bcl-2。通过RT-PCR 检测 Caspase-3、bcl-2 mRNA 的变化,ELISA 检测 MMP-2、MMP-9、Ang-2分泌情况。结果:上调内皮细胞中Survivin基因后其增值活性较对照组明显增加,细胞周期蛋白CyclinD及有丝分裂调控蛋白INCENP、AuroraB及磷酸化Aurora B表达水平相应提升,同时,Survivin基因过表达提升内皮细胞抗凋亡能力,并从核酸和蛋白水平促进了 bcl-2的表达,抑制Caspase-3的表达从而失活了其介导的凋亡通路。内皮细胞中Survivin基因表达提升同样促进了其侵袭能力,分泌MMP-2、MMP-9、Ang-2较对照显着增加。结论:大鼠血管内皮细胞胞质中Survivin的上调对其增殖,抗凋亡及侵袭能力均有显着的影响。一定程度克服了其生理情况下生物活性低的缺陷。第四部分体内证实Survivin基因多效性促进新生血管生成目的:体内验证上调Survivin基因促进血管内皮细胞血管新生能力方法:通过肌肉注射将过表达Survivin基因的RAECs移植于裸鼠下肢肌肉组织中,2周后取组织以石蜡及冰冻切片,采用免疫组织化学检测CD31阳性的内皮细胞并计算新生微血管数量。同时,HE染色验证细胞异性型,排除其肿瘤样变。通过荧光双标检测新生微血管中CD31、Survivin 的表达。结果:细胞移植两周后,Survivin过表达组新生微血管数较对照组明显增加。HE染色各组均未见内皮细胞核形态异常,核质比例增大等肿瘤样变性,实验组新生血管内皮细胞中Survivin见显着表达。结论:构建的增殖型腺病毒通过提升内皮细胞中Survivin基因的表达,改变其生物活性从而获得较强的血管新生能力,并一定程度抵消了同种异体排除反应。(本文来源于《重庆医科大学》期刊2018-05-01）
同少飞[10]（2018）在《拟南芥KCHs基因多突纯合突变体的建立及KCHs生化功能研究》一文中研究指出在动物和真菌的一系列亚细胞活动中,驱动蛋白和动蛋白都能够利用ATP水解所释放的化学能量而沿着微管发生机械运动。植物体中目前还未发现动蛋白家族,但是陆生植物却具有一类能以二聚体形式沿着微管定向运动的驱动蛋白-14(Kinesin-14)家族。该家族中的特异亚家族KCHs(Kinesin Calponin Homology Domain)包含一个马达结构域,两个卷曲螺旋结构域和一个C H结构域。目前研究已知在水稻根部和棉纤维中KCH1是微丝和微管之间的连接子,并具有重要的生物学功能。虽然在拟南芥中已经鉴定出七种KCHs,然而KCHs潜在的生物学功能和生化功能却知之甚少,故而需要对KCHs的生化性质和生物学功能进行深入的研究。此前,本实验室研究发现KCHs家族蛋白在拟南芥的生长和发育阶段存在严重的功能冗余,要了解导致功能冗余的原因有必要获得KCHs的高阶纯合突变体。为此,本研究采用了两种策略,一是在抑制水平良好的T-DNA插入单基因纯合突变体的基础上,经过遗传学筛选获得高阶纯合突变体;二是利用CRISPR/Cas9基因组编辑技术通过靶向编辑特定的KCHs基因,结合测序后获得可靠的高阶的纯和突变体系。此外,还研究了KCHs CH结构域的生化功能。主要的研究成果如下:1.利用遗传学杂交法获得了KCH1/2/3/4/5/6/7、KCH1/2/3/5/6/7和KCH1/2/3/4/6/7叁种六阶或七阶基因型的纯合突变体。在这些高阶纯合突变体,KCH1、KCH2、KCH4、KCH6、KCH7的抑制水平良好,几乎完全沉默;KCH3和KCH5抑制水平较差,表达量仅为WT的40%。2.以KCH1/2/3/6/7的五阶纯合突变体为背景,利用CRISPR/Cas9基因编辑技术使KCH4第406位碱基‘C’缺失,导致移码突变,最终通过遗传转化和分子鉴定获得了基因型为KCH1/2/3/4/6/7的六阶突变体。3.构建了KCH1(0-178)、KCH2(0-139)、KCH3(0-188)、KCH4(0-162)、KCH6(0-139)、KCH7(0-185)、KCH1(0-466)和KCH7(0-466)八种原核表达载体,并通过原核表达最终获得相应的纯化蛋白。4.体外高速和低速共沉淀分析证明:KCH1(0-466)、KCH4(0-162)、KCH6(0-466)蛋白都能够和F-actin结合,但结合能力有显着差异;KCH4(0-162)的结合能力大于KCH1(0-466)和KCH6(0-466)的结合能力,KCH1(0-466)的结合能力与KCH6(0-466)的结合能力相当。5.将KCH1(0-466)、KCH4(0-162)和KCH6(0-466)分别与F-actin孵育并经鬼笔环肽488染色后,激光共聚焦显微镜观察发现KCH1(0-466)、KCH4(0-162)和KCH6(0-466)都能够使F-actin由丝状结构变成棒状或网状结构。综上所述,本研究成功的建立多种抑制水平良好的KCHs高阶纯合突变体,从而为后续的遗传学、细胞生物学和分子生物学研究提供了必要的遗传材料。此外,首次在体外证明拟南芥KCHs家族蛋白可以和微丝结合并能使其聚合成束,本研究对于了解KCHs的功能与作用机理有重要的学术意义。(本文来源于《兰州大学》期刊2018-04-01）
基因多论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
通过构建多拷贝数表达质粒,获得高表达猪圆环病毒2型衣壳蛋白Cap的毕赤酵母菌株。将Cap的基因克隆到pPIC3.5K载体中后,利用同尾酶技术将表达盒(5′AOX-Cap-TT)重复插入载体,分别构建了含有1、2、4、6个拷贝基因数的表达质粒并通过电转化导入KM71菌株,重组菌株经发酵和甲醇诱导,通过SDS-PAGE和Western blot检测目的蛋白的表达;绘制不同拷贝数重组菌株的生长曲线;表达产物经纯化后透射电镜观察是否组装形成病毒样颗粒(VLPs)并免疫小鼠评估其免疫原性。Western blot结果显示,Cap蛋白能够在酵母细胞内表达,且6拷贝质粒的重组菌表达量最高;生长曲线显示拷贝数提高未对菌体正常生长带来影响;电镜下观察到表达的Cap蛋白能够自发装配成直径约为20 nm、与天然PCV2粒子大小相当、均一的VLPs;纯化后的VLPs免疫接种小鼠后能有效刺激机体产生PCV2抗体。含多拷贝数表达质粒的工程菌可显着提高重组毕赤酵母中Cap的表达量。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
基因多论文参考文献
[1].屠伟平,张琳菲,陈佳炜.低血钾症SLC12A3基因多个位点突变1例分析[J].浙江医学.2019
[2].尹曼曼,刘汉平,楼觉人.猪圆环病毒2型Cap基因多拷贝质粒的构建及病毒样颗粒的表达[J].动物医学进展.2019
[3].杨林,王柳月,李慧美,陈华波.改进的多片段重迭延伸PCR制作基因多位点突变[J].中国生物工程杂志.2019
[4].邓小燕,徐胜超.基于Yarn云平台的生物基因多序列比对并行算法[J].基因组学与应用生物学.2019
[5].孙世东,胡文秀,孙辰权一.黄海N系欧美基因多用途货车创新技术的研究与分析[J].客车技术.2019
[6].陆俏颖.论从基因选择论到基因多元论的转变[J].自然辩证法通讯.2019
[7].吴林鲜,兰晓天,朱永平,胡淞,田英男.墨兰B类PI基因多靶点CRISPR/Cas9载体构建[J].分子植物育种.2018
[8].陈珺君,刘晓艳,闵勇,杨自文.表达aiiA基因多黏芽胞杆菌工程菌构建与功能分析[J].中国生物防治学报.2018
[9].张灏龙.血管内皮细胞中生存素（Survivin）基因多效性分析[D].重庆医科大学.2018
[10].同少飞.拟南芥KCHs基因多突纯合突变体的建立及KCHs生化功能研究[D].兰州大学.2018
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