导读:本文包含了基因重组人骨形态发生蛋白论文开题报告文献综述、选题提纲参考文献及外文文献翻译，主要关键词:蛋白,形态,发生,腺病毒,基因,载体,技术。
基因重组人骨形态发生蛋白论文文献综述
唐勇,叶记超,胡旭民,沈慧勇[1]（2018）在《基因重组人骨形态发生蛋白-2联合自体骨椎间打压植骨在腰椎融合术中的应用研究》一文中研究指出背景:使用基因重组人骨形态发生蛋白-2(recombinant human bone morphogenetic protein-2, rhBMP-2)联合自体骨植入治疗骨缺损有较好疗效和安全性,而椎间植骨中rhBMP-2使用量与临床效果间的关系尚不明确。目的目的:评价rhBMP-2联合自体骨椎间打压植骨在腰椎融合术中的安全性和有效性。方法方法:2015年1月至2015年9月,因腰腿痛接受腰椎融合术的60例≤65岁患者,随机分为3组:单纯自体骨组、rhBMP-2(1 mg/椎间)联合自体骨组、rhBMP-2(2 mg/椎间)联合自体骨组;常规行椎板切除、神经根管扩大、后路椎间自体颗粒骨打压植骨加椎弓根钉内固定术,融合节段为1～2个椎间隙;其中单纯自体骨组共26个椎间隙;rhBMP-2(1 mg/椎间)联合自体骨组共27个椎间隙;rhBMP-2(2mg/椎间)联合自体骨组共26个椎间隙。临床疗效评价包含VAS评分、Oswestry功能障碍指数;影像学评价腰椎正侧位和动力位片;CT矢状位重建,观察上下终板间连续性骨小梁,横断面观察有无椎管游离骨粒、异位骨化。术后随访2年。结果结果:60例患者均完成随访,3组疾病组成、融合节段、年龄分布差异无统计学意义,手术时间、手术失血量、术后总引流量、平均住院时间等方面差异亦无统计学意义;未出现深部感染;2例出现伤口浅表感染(单纯自体骨组和2 mgrh BMP-2联合自体骨组各1例)。无内固定失败。未见椎管内游离骨粒脱出及异位骨化。术后VAS评分和Oswestry功能障碍指数均无统计学差异。3组末次随访融合率比较,仅2 mg rhBMP-2组与单纯自体骨组及1 mg rhBMP-2组之间差异有统计学意义,其余组间无统计学差异。结论结论:椎间融合使用自体骨联合2 mg rhBMP-2,可获得良好的融合效果,但远期效果仍需进一步研究。(本文来源于《中华骨与关节外科杂志》期刊2018年09期）
邱俊钦,尹承慧,曾昭勋,陈宗雄[2]（2012）在《人骨形态发生蛋白2基因重组腺病毒的构建与鉴定》一文中研究指出背景:骨形态发生蛋白2是诱导成骨关键物质,参与调节从细胞增殖、决定种系分化方向到细胞死亡等一系列的生物过程。目的:利用AdMax系统构建人骨形态发生蛋白2基因的重组腺病毒载体并鉴定。方法:以人cDNA为模板PCR扩增人骨形态发生蛋白2基因,转化E.coli感受态细胞,经菌落PCR鉴定阳性转化子、阳性克隆测序无误后,扩增、抽提。将带有目的基因的腺病毒表达载体和携带有腺病毒大部分基因的辅助包装质粒共转染293细胞进行病毒包装扩增,PCR检测目的基因、Western Blot检测目的蛋白及终点稀释法检测病毒滴度。结果与结论:PCR获得长度为1223bp的人骨形态发生蛋白2目的基因片段,同源重组表达载体经阳性克隆PCR及测序鉴定,结果正确。293细胞内包装、扩增,经Westernblot及PCR鉴定无误后,获得病毒滴度为5×1013pfu/L的重组腺病毒。实验成功构建携带有人骨形态发生蛋白2基因的重组腺病毒载体。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2012年50期）
何春耒,姬广林,刘午阳,吴东宝,何澄[3]（2012）在《人骨形态发生蛋白2基因重组腺病毒表达载体转染兔骨髓间充质干细胞》一文中研究指出背景:采用GatewayTM技术构建腺病毒载体,显着弥补了外源性细胞因子局部应用的缺陷。目的:观察人骨形态发生蛋白2重组腺病毒表达载体(Ad-BMP-2/GFP)转染兔骨髓间充质干细胞后骨形态发生蛋白2的表达情况。方法:密度梯度离心联合贴壁培养法,分离、培养、纯化兔骨髓间充质干细胞;GatewayTM技术构建的Ad-BMP-2/GFP腺病毒载体转染兔骨髓间充质干细胞。结果与结论:RT-PCR检测转染诱导后的细胞表达成骨细胞特异性产物骨钙素;转染后兔骨髓间充质干细胞在mRNA水平和蛋白水平均有人骨形态发生蛋白2的表达。结果表明构建的Ad-BMP-2/GFP可高效转染兔骨髓间充质干细胞,骨形态发生蛋白2在细胞中能高效表达。(本文来源于《中国组织工程研究》期刊2012年10期）
蒋红梅,龙洁,汤炜,田卫东,刘磊[4]（2011）在《采用Gateway~(TM)技术构建人骨形态发生蛋白-2基因重组腺病毒载体》一文中研究指出目的:采用基于attL/attR的λ噬菌体位点特异性重组系统的Gateway~(TM)技术构建人骨形态发生蛋白-2基因重组腺病毒载体(Ad-hBMP-2)。方法:从携带hBMP-2基因片段的pcDNA3.1质粒中获取目的基因hBMP-2片段,连入带attL1,attL2位点的入门载体pENTR~(TM)11中,形成入门克隆,将入门克隆与带attR1,attR2位点的目的载体Ad/CMV/V5-DEST在高效重组酶作用下发生(本文来源于《第六次中国国际暨第九次全国口腔颌面外科学术会议论文集》期刊2011-06-17）
马勇,张辛,敖英芳[5]（2008）在《人骨形态发生蛋白12基因重组腺病毒载体的构建》一文中研究指出目的:构建及制备人骨形态发生蛋白12(BMP12)基因重组腺病毒,证明其可感染脂肪组织来源干细胞并表达蛋白。方法:将包含有BMP12cDNA全长序列的BMP12-pED6质粒用限制性内切酶EcoRI进行酶切,得到一个1260bp大小的含有BMP12cDNA的目的基因片段。将目的基因片段插入质粒pcDNA3.1后,用KpnI和PmeI进行双酶切,插入pAdtrack-CMV。插入目的基因片段的穿梭质粒pAdtrack-CMV-BMP12用PmeI进行酶切线性化后与腺病毒骨架载体pAdEasy-1一起电转化入感受态BJ5183菌株。用PCR及多种酶切方法鉴定重组体。最终将线性化的重组质粒利用脂质体转入293A细胞中进行病毒包装。BMP12基因随着重组腺病毒在感染的293A细胞中扩增而得到复制,并通过CsCl梯度离心法得以纯化。Elisa法检测Ad-BMP12感染脂肪组织来源干细胞后BMP12的蛋白表达。结果:pAdtrack-CMV-BMP12经酶切证实有1260bp的插入片段。酶切及PCR鉴定证实BMP12基因重组腺病毒载体构建成功。GFP(green fluorescent protein)表明重组腺病毒扩增成功并制备出高滴度重组病毒。该重组病毒可成功感染脂肪来源组织干细胞并表达BMP12蛋白。结论:BMP12基因能够重组于腺病毒载体,可以进行有效扩增,产生高浓度的重组腺病毒,从而用于BMP12基因治疗的研究。(本文来源于《中国运动医学杂志》期刊2008年02期）
蒋红梅,龙洁,汤炜,田卫东,刘磊[6]（2008）在《采用Gateway~(TM)技术构建人骨形态发生蛋白-2基因重组腺病毒载体》一文中研究指出目的:采用基于attLXattR的λ噬菌体位点特异性重组系统的Gateway~(TM)技术构建人骨形态发生蛋白-2基因重组腺病毒载体(Ad-hBMP-2)。方法:从pcDNA3.1质粒中获取目的基因hBMP-2片段,连入带attL1、attL2位点的入门载体pENTRTM11中,形成入门克隆,将入门克隆与带attR1、attR2位点的目的载体Ad/CMV/V5-DEST在高效重组酶作用下发生体外重组形成表达克隆ad-BMP-2,经鉴定将ad-BMP-2线性化后转入293A细胞包装,通过细胞裂解法获得人骨形态发生蛋白-2的基因重组腺病毒珠Ad-hBMP-2,将其扩增,采用western blotting技术分析目的蛋白表达。结果:经酶切及测序证实目的基因BMP-2片段按正确方向重组入目的载体中,带BMP-2的目的载体在293A细胞中包装成功,获得成熟的病毒颗粒,测得病毒滴度为2.5×10~9pfu/ml,western blotting结果证实Ad-hBMP-2在293A细胞中高效表达hBMP-2蛋白,结论:本实验首次利用基于λ噬菌体的位点特异性重组系统的Gateway~(TM)技术成功构建了Ad-hBMP-2,该技术与传统构建方法比较具有高效性和灵活性,为进一步研究BMP-2的生理功能和利用BMP-2进行骨基因治疗奠定了实验基础。(本文来源于《现代生物医学进展》期刊2008年02期）
张裕东,赵剑,吴红平,李林芳[7]（2005）在《骨形态发生蛋白-4基因重组腺病毒载体的构建》一文中研究指出目的:通过Cre/LoxP位点特异性重组系统构建携带人骨形态发生蛋白-4基因的重组腺病毒载体(Ad.BMP4)。方法:根据GenBank获得BMP4的基因序列合成引物,经PCR扩增获得长度为1230bp的BMP4基因片断,经酶切、测序鉴定后,与腺病毒穿梭质粒pSuCMV连接,随后与5'缺陷型腺病毒右臂的质粒pBGHloxPΔE1E3通过脂质体Lipofectamine2000共转染至293细胞,获得重组腺病毒Ad.BMP4,并予以扩增、纯化、鉴定。结果:经酶切电泳和测序证明获得的BMP4基因片断序列、大小和方向正确,目的基因插入的位置、方向正确,经重组、扩增和纯化后获得病毒滴度为2.9×109pfu/ml的重组腺病毒Ad.BMP4,以PCR扩增和测序的方法证实了所构建病毒含有目的基因的片断,安全性检测证明所构建的腺病毒无野生性腺病毒的存在。结论:通过Cre/LoxP位点特异性重组系统构建了腺病毒Ad.BMP4。采用的腺病毒载体点特异性重组的方法极大地提高了包装成功率,且包装成功的病毒颗粒均为含有目的基因的重组病毒,从而保证了重组过程的快速和高效。(本文来源于《中国交通医学杂志》期刊2005年06期）
马庆军,党耕町,马大龙,王志国,张惠珠[8]（1998）在《人骨形态发生蛋白-2的基因重组及其在大肠杆菌中的表达》一文中研究指出目的用基因工程技术在大肠杆菌中表达人骨形态发生蛋白２（ｈＢＭＰ２）。方法将包含ｈＢＭＰ２部分前肽和成熟肽的３′端７３０ｂｐｃＤＮＡ片段，插入原核表达载体ｐｋｐＬ３ａ的多克隆位点，构建成ｐＫｐＬ３ａ／ｈＢＭＰ２重组表达载体，转化大肠杆菌ｐｏｐ２１３６，挑选阳性克隆，经诱导表达后用ＳＤＳＰＡＧＥ鉴定。结果该克隆表达的ｈＢＭＰ２为ＭＷ２７０００，表达量占菌体总蛋白１０％，部分纯化后植入大鼠股部肌肉，组织学观察到肌肉内大量间充质细胞增生及骨与软骨形成。结论说明重组ｈＢＭＰ２具有诱导异位骨与软骨形成的生物学功能。(本文来源于《中华医学杂志》期刊1998年04期）
基因重组人骨形态发生蛋白论文开题报告
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
背景:骨形态发生蛋白2是诱导成骨关键物质,参与调节从细胞增殖、决定种系分化方向到细胞死亡等一系列的生物过程。目的:利用AdMax系统构建人骨形态发生蛋白2基因的重组腺病毒载体并鉴定。方法:以人cDNA为模板PCR扩增人骨形态发生蛋白2基因,转化E.coli感受态细胞,经菌落PCR鉴定阳性转化子、阳性克隆测序无误后,扩增、抽提。将带有目的基因的腺病毒表达载体和携带有腺病毒大部分基因的辅助包装质粒共转染293细胞进行病毒包装扩增,PCR检测目的基因、Western Blot检测目的蛋白及终点稀释法检测病毒滴度。结果与结论:PCR获得长度为1223bp的人骨形态发生蛋白2目的基因片段,同源重组表达载体经阳性克隆PCR及测序鉴定,结果正确。293细胞内包装、扩增,经Westernblot及PCR鉴定无误后,获得病毒滴度为5×1013pfu/L的重组腺病毒。实验成功构建携带有人骨形态发生蛋白2基因的重组腺病毒载体。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
基因重组人骨形态发生蛋白论文参考文献
[1].唐勇,叶记超,胡旭民,沈慧勇.基因重组人骨形态发生蛋白-2联合自体骨椎间打压植骨在腰椎融合术中的应用研究[J].中华骨与关节外科杂志.2018
[2].邱俊钦,尹承慧,曾昭勋,陈宗雄.人骨形态发生蛋白2基因重组腺病毒的构建与鉴定[J].中国组织工程研究.2012
[3].何春耒,姬广林,刘午阳,吴东宝,何澄.人骨形态发生蛋白2基因重组腺病毒表达载体转染兔骨髓间充质干细胞[J].中国组织工程研究.2012
[4].蒋红梅,龙洁,汤炜,田卫东,刘磊.采用Gateway~(TM)技术构建人骨形态发生蛋白-2基因重组腺病毒载体[C].第六次中国国际暨第九次全国口腔颌面外科学术会议论文集.2011
[5].马勇,张辛,敖英芳.人骨形态发生蛋白12基因重组腺病毒载体的构建[J].中国运动医学杂志.2008
[6].蒋红梅,龙洁,汤炜,田卫东,刘磊.采用Gateway~(TM)技术构建人骨形态发生蛋白-2基因重组腺病毒载体[J].现代生物医学进展.2008
[7].张裕东,赵剑,吴红平,李林芳.骨形态发生蛋白-4基因重组腺病毒载体的构建[J].中国交通医学杂志.2005
[8].马庆军,党耕町,马大龙,王志国,张惠珠.人骨形态发生蛋白-2的基因重组及其在大肠杆菌中的表达[J].中华医学杂志.1998
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