首页> 正文

猪伪狂犬病毒环介导等温扩增技术检测方法的建立

2020-12-02阅读(758)

猪伪狂犬病毒环介导等温扩增技术检测方法的建立

论文摘要

为建立通用性猪伪狂犬病毒（PRV）环介导等温扩增快速检测方法,本实验根据PRV gB基因序列的保守区段设计四套特异性引物,基于环介导等温扩增技术引入环引物,筛选出特异性引物PRV-1,对其特异性、灵敏度进行评估,进行临床样本和人工干扰样本检测试验,并与实时荧光定量PCR（Quantitative real-time PCR,qPCR）检测结果进行比较分析。结果表明该检测方法能够特异性的检出PRV的存在,具有良好的特异性;灵敏度检测下限为10fg/μL;且本文建立的检测方法其结果与临床样品和人工干扰样本qPCR检测结果具有高度的一致性。因此,本实验建立的PRV环介导等温扩增检测方法特异性强、灵敏度高,具有较好的稳定性,并且操作安全、简便、高效,该方法的建立为猪伪狂犬病的快速诊断和基层检疫提供了新的选择。

论文目录

  • 1 材料与方法
  •   1.1 材料与试剂
  •     1.1.1 实验材料
  •     1.1.2 主要试剂盒耗材
  •   1.2 仪器与设备
  •   1.3 方法
  •     1.3.1 引物设计
  •     1.3.2 病毒DNA的提取
  •     1.3.3 含伪狂犬病毒靶基因的阳性质粒的构建
  •     1.3.4 PRV LAMP检测方法反应体系的建立
  •     1.3.5 PRV LAMP特异性实验
  •     1.3.6 PRV LAMP灵敏度实验
  •     1.3.7 临床样品检测
  •     1.3.8 人工干扰实验
  • 2 结果与讨论
  •   2.1 PRV引物筛选和反应体系的建立
  •   2.2 恒温检测PRV的特异性
  •   2.3 恒温检测PRV的灵敏度
  •   2.4 临床样品检测
  •   2.5 人工干扰样本检测
  • 3 总结

    • 文章来源

    类型: 期刊论文

    作者: 陈珍金,曹炜伟,石磊,叶蕾

    关键词: 猪伪狂犬病毒,基因,环介导等温扩增技术

    来源: 现代食品科技 2019年09期

    年度: 2019

    分类: 工程科技Ⅰ辑,基础科学,农业科技

    专业: 生物学,畜牧与动物医学

    单位: 暨南大学食品安全与营养研究院

    基金: 广东省自然科学基金项目(2017A030310175),国家重点研发计划畜禽养殖专项(2016YFD0500600)

    分类号: S852.65

    DOI: 10.13982/j.mfst.1673-9078.2019.9.036

    页码: 277-282+290

    总页数: 7

    文件大小: 1942K

    下载量: 178

    相关论文文献

    • [1].猪伪狂犬病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立及初步应用[J]. 江苏农业科学 2019(07)
    • [2].两株抗猪伪狂犬病毒的单克隆抗体制备与鉴定[J]. 畜牧与兽医 2017(05)
    • [3].新型猪伪狂犬病毒的分离与鉴定[J]. 黑龙江畜牧兽医 2017(12)
    • [4].变异猪伪狂犬病毒的分离鉴定分析[J]. 畜牧兽医科学(电子版) 2017(08)
    • [5].一例猪伪狂犬病毒病的诊治[J]. 中国畜禽种业 2016(01)
    • [6].广西猪伪狂犬病毒感染状况调查报告[J]. 广东畜牧兽医科技 2008(06)
    • [7].一例猪伪狂犬病毒病的诊治报告[J]. 中国动物保健 2014(09)
    • [8].猪伪狂犬病毒病与圆环病毒病2型混合感染的诊断[J]. 贵州农业科学 2011(11)
    • [9].沈阳某猪场伪狂犬病流行病学调查及免疫效果评估[J]. 畜牧与兽医 2017(06)
    • [10].一起仔猪伪狂犬病例的调查分析[J]. 畜牧兽医科学(电子版) 2017(11)
    • [11].上海地区一株猪伪狂犬病毒的分离与鉴定[J]. 中国畜禽种业 2013(07)
    • [12].一例猪伪狂犬病毒与大肠杆菌混合感染调查分析[J]. 中国畜禽种业 2020(04)
    • [13].猪伪狂犬病毒分子生物学检测方法研究进展[J]. 猪业科学 2016(01)
    • [14].崇阳县猪伪狂犬病毒感染调查[J]. 湖北畜牧兽医 2014(11)
    • [15].猪肾细胞感染猪伪狂犬病毒后的细胞观察与分析[J]. 台湾农业探索 2013(02)
    • [16].4种中药多糖体外抗猪伪狂犬病毒的作用研究[J]. 江苏农业学报 2010(03)
    • [17].猪伪狂犬病毒C株的分离鉴定[J]. 上海农业学报 2015(01)
    • [18].可视化LAMP快速检测猪伪狂犬病毒[J]. 河南农业科学 2012(06)
    • [19].猪伪狂犬病毒PCR检测方法的优化[J]. 猪业科学 2020(04)
    • [20].猪伪狂犬病毒HX14株的分离与鉴定[J]. 上海交通大学学报(农业科学版) 2017(01)
    • [21].育肥猪伪狂犬病毒、大肠杆菌混合感染的诊断与防控分析[J]. 黑龙江畜牧兽医 2017(12)
    • [22].新疆北疆猪伪狂犬病毒野毒的PCR检测[J]. 草食家畜 2015(05)
    • [23].猪伪狂犬病毒的分子生物学研究进展[J]. 科技致富向导 2012(08)
    • [24].猪伪狂犬病毒TK基因的扩增及序列分析[J]. 上海农业学报 2020(03)
    • [25].猪细小病毒、猪伪狂犬病毒和猪圆环病毒2型多重PCR方法的建立及初步应用[J]. 上海畜牧兽医通讯 2017(05)
    • [26].猪伪狂犬病毒Real-time PCR检测方法的建立和弱毒疫苗病毒含量的检测[J]. 江西农业学报 2019(09)
    • [27].猪伪狂犬病毒与猪圆环病毒2型混合感染的诊治[J]. 中国动物保健 2016(01)
    • [28].基于猪伪狂犬病毒gE基因的PCR法快速诊断猪伪狂犬病的研究[J]. 黑龙江畜牧兽医 2010(23)
    • [29].抗猪伪狂犬病毒的中草药筛选的进展[J]. 湖南畜牧兽医 2010(03)
    • [30].猪伪狂犬病毒和猪圆环病毒Ⅱ型双重PCR检测方法的建立及应用[J]. 黑龙江畜牧兽医 2015(13)

    标签：;  ;  ;  

    猪伪狂犬病毒环介导等温扩增技术检测方法的建立
    下载Doc文档

    猜你喜欢

    © 2024 毕论降 版权所有 鄂ICP备12018319号-6